發(fā)布時(shí)間：2022-12-11 07:44

　　地下鼠由于常年地下生活,進(jìn)化出了一系列區(qū)別于地面鼠的適應(yīng)性特征,典型特征是繁殖力下降。動(dòng)物繁殖對(duì)維護(hù)種群穩(wěn)定和物種多樣性有重要意義。銀星竹鼠（Rhizomys pruinosus）作為一種地下鼠,繁殖力較低,平均胎仔數(shù)僅2-4只,是研究地下鼠繁殖調(diào)控的理想物種。對(duì)卵巢發(fā)育規(guī)律的研究可為探究銀星竹鼠繁殖調(diào)控提供理論基礎(chǔ)。通過(guò)初步探究幾個(gè)關(guān)鍵時(shí)期銀星竹鼠卵巢的發(fā)育,識(shí)別與卵巢發(fā)育相關(guān)基因和轉(zhuǎn)錄組遺傳信息,為銀星竹鼠及地下鼠的繁殖研究提供基礎(chǔ)資料,同時(shí)也為探究地下鼠卵巢發(fā)育與繁殖力下降的關(guān)系奠定理論基礎(chǔ)。本研究采用解剖學(xué)方法對(duì)不同年齡組（兩周齡組、一月齡組、三月齡組、性成熟組和懷孕組）銀星竹鼠卵巢發(fā)育作了研究,同時(shí)做轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。在測(cè)序結(jié)果中篩選差異表達(dá)基因（differentially expressed gene,DEG）并對(duì)其進(jìn)行Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）數(shù)據(jù)庫(kù)富集,得到顯著性最大的兩條通路:卵巢類固醇合成通路和腎素血管緊張素系統(tǒng)通路。隨后對(duì)這兩條通路上的差異表達(dá)基因進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR（q-PCR）驗(yàn)證。旨在初步揭示銀星竹鼠... 

【文章頁(yè)數(shù)】：89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 地下鼠
    1.2 銀星竹鼠生物學(xué)特征
    1.3 哺乳動(dòng)物卵巢結(jié)構(gòu)與功能
        1.3.1 哺乳動(dòng)物卵巢的結(jié)構(gòu)
        1.3.2 卵巢的排卵功能
        1.3.3 卵泡的分類
        1.3.4 卵巢的內(nèi)分泌功能
    1.4 卵巢發(fā)育兩種調(diào)控途徑
        1.4.1 卵巢類固醇合成通路
        1.4.2 腎素血管緊張素系統(tǒng)
    1.5 測(cè)序技術(shù)的發(fā)展歷史
        1.5.1 轉(zhuǎn)錄組概述
        1.5.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的重要步驟及流程
    1.6 研究目的與意義
第2章 銀星竹鼠卵巢發(fā)育
    2.1 研究材料
        2.1.1 研究動(dòng)物
        2.1.2 研究設(shè)備及耗材
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)材料及試劑
    2.2 研究方法
        2.2.1 動(dòng)物組織的提取
        2.2.2 石蠟切片的制作
        2.2.3 HE染色
        2.2.4 卵泡大小及數(shù)量的測(cè)量
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 不同時(shí)期卵巢組織組織學(xué)特征
        2.3.2 卵泡計(jì)數(shù)
        2.3.3 各級(jí)卵泡大小測(cè)量
    2.4 討論
第3章 銀星竹鼠卵巢轉(zhuǎn)錄測(cè)序
    3.1 研究材料
        3.1.1 研究動(dòng)物
        3.1.2 研究設(shè)備及耗材
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.2 研究方法
        3.2.1 總RNA提取
        3.2.2 總RNA質(zhì)量檢測(cè)
        3.2.3 cDNA文庫(kù)構(gòu)建
        3.2.4 轉(zhuǎn)錄組質(zhì)控與測(cè)序
        3.2.5 Unigene功能注釋及表達(dá)量分析
        3.2.6 基因結(jié)構(gòu)分析
        3.2.7 差異表達(dá)基因篩選
        3.2.8 差異表達(dá)基因功能注釋和富集分析
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 總RNA提取結(jié)果
        3.3.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與組裝結(jié)果
        3.3.3 Unigene功能注釋
        3.3.4 基因結(jié)構(gòu)分析
        3.3.5 基因表達(dá)量分析
        3.3.6 差異表達(dá)基因識(shí)別
        3.3.7 差異表達(dá)基因功能注釋分析
        3.3.8 差異表達(dá)基因GO功能富集分析
        3.3.9 差異表達(dá)基因KEGG通路注釋
    3.4 討論
第4章 卵巢類固醇合成相關(guān)基因表達(dá)的q-PCR驗(yàn)證
    4.1 研究材料
        4.1.1 研究動(dòng)物
        4.1.2 研究設(shè)備及耗材
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    4.2 研究方法
        4.2.1 cDNA合成
        4.2.2 引物設(shè)計(jì)
        4.2.3 模板及引物專一性檢測(cè)
        4.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證
        4.2.5 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果及分析
        4.3.1 模板及引物專一性檢測(cè)
        4.3.2 類固醇合成相關(guān)基因?qū)崟r(shí)定量結(jié)果
        4.3.3 Cyplla mRNA的表達(dá)
        4.3.4 Cyp17 mRNA的表達(dá)
        4.3.5 17β-hsd mRNA的表達(dá)
        4.3.6 3β3-hsd mRNA的表達(dá)
    4.4 討論
第5章 腎素血管緊張素系統(tǒng)相關(guān)基因表達(dá)的q-PCR驗(yàn)證
    5.1 材料與方法
    5.2 結(jié)果及分析
        5.2.1 模板及引物專一性檢測(cè)
        5.2.2 腎素血管緊張素系統(tǒng)相關(guān)基因?qū)崟r(shí)定量結(jié)果
        5.2.3 Ace mRNA的表達(dá)
        5.2.4 Cpa3 mRNA的表達(dá)
        5.2.5 Cmal mRNA的表達(dá)
        5.2.6 Agt mRNA的表達(dá)
        5.2.7 AgtIIr2 mRNA的表達(dá)
    5.3 討論
第6章 總結(jié)及展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]銀星竹鼠的生物學(xué)特性研究[D]. 卓智龍.廣西師范大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3718399