miR-26b調(diào)控Sox6和Bhlhe22基因表達(dá)影響胰島素分泌的機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2022-12-08 03:54
目的闡明miR-26b通過調(diào)控Sox6和Bhlhe22基因介導(dǎo)胰島素的分泌的機(jī)制。方法進(jìn)行胰島β細(xì)胞INS-1培養(yǎng),miR-26b的過度表達(dá)通過慢病毒轉(zhuǎn)染,miR-26的干擾通過miR-26bminics。INS-1細(xì)胞可分為3類:野生型INS-1細(xì)胞、miR-26b過表達(dá)INS-1細(xì)胞和miR-26b抑制INS-1細(xì)胞。構(gòu)建miR-26b沉默細(xì)胞株和過表達(dá)細(xì)胞株與驗(yàn)證,采用慢病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)再次分別構(gòu)建Sox6和Bhlhe22基因沉默細(xì)胞株和Sox6和Bhlhe22基因過表達(dá)細(xì)胞株,使用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒檢測(cè)胰島素含量;采用實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(QT-PCR)和免疫印跡法(Western blotting)方法檢測(cè)Sox6和Bhlhe22基因及蛋白的表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組相比,miR-26b過度表達(dá)組Bhihe22、Sox6基因及蛋白表達(dá)明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); miR-26b抑制組Bhihe22、Sox6基因及蛋白的表達(dá)明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與對(duì)照組相比,miR-26b過度表達(dá)組胰島素釋放增加68.9%,而miR-26b抑制組胰島素釋...
【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要試劑
1.2 mi R-26b過表達(dá)慢病毒構(gòu)建
1.3 INS-1細(xì)胞株培養(yǎng)
1.4 胰島素ELISA檢測(cè)
1.5 免疫印跡實(shí)驗(yàn)
1.6 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 3組Sox6和Bhihe22蛋白及基因表達(dá)比較
2.2 3組胰島素釋放的比較
3 討論
4 結(jié)論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]急性冠脈綜合征患者血清miR-26b、IGF-1表達(dá)水平與冠脈病變程度的相關(guān)性分析[J]. 王娟,陳丹,譚利國(guó),汪茜. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2019(06)
[2]miR-26a調(diào)控Sox6和Bhlhe22表達(dá)對(duì)胰島素分泌的影響[J]. 柳嵐,桑丹,曾玲,蔣鳳秀,陸澤元. 中國(guó)社區(qū)醫(yī)師. 2016(34)
本文編號(hào):3713497
【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要試劑
1.2 mi R-26b過表達(dá)慢病毒構(gòu)建
1.3 INS-1細(xì)胞株培養(yǎng)
1.4 胰島素ELISA檢測(cè)
1.5 免疫印跡實(shí)驗(yàn)
1.6 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 3組Sox6和Bhihe22蛋白及基因表達(dá)比較
2.2 3組胰島素釋放的比較
3 討論
4 結(jié)論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]急性冠脈綜合征患者血清miR-26b、IGF-1表達(dá)水平與冠脈病變程度的相關(guān)性分析[J]. 王娟,陳丹,譚利國(guó),汪茜. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2019(06)
[2]miR-26a調(diào)控Sox6和Bhlhe22表達(dá)對(duì)胰島素分泌的影響[J]. 柳嵐,桑丹,曾玲,蔣鳳秀,陸澤元. 中國(guó)社區(qū)醫(yī)師. 2016(34)
本文編號(hào):3713497
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