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miR-26b調(diào)控Sox6和Bhlhe22基因表達影響胰島素分泌的機制研究

發(fā)布時間:2022-12-08 03:54
  目的闡明miR-26b通過調(diào)控Sox6和Bhlhe22基因介導胰島素的分泌的機制。方法進行胰島β細胞INS-1培養(yǎng),miR-26b的過度表達通過慢病毒轉染,miR-26的干擾通過miR-26bminics。INS-1細胞可分為3類:野生型INS-1細胞、miR-26b過表達INS-1細胞和miR-26b抑制INS-1細胞。構建miR-26b沉默細胞株和過表達細胞株與驗證,采用慢病毒轉染技術再次分別構建Sox6和Bhlhe22基因沉默細胞株和Sox6和Bhlhe22基因過表達細胞株,使用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒檢測胰島素含量;采用實時聚合酶鏈式反應(QT-PCR)和免疫印跡法(Western blotting)方法檢測Sox6和Bhlhe22基因及蛋白的表達。結果與對照組相比,miR-26b過度表達組Bhihe22、Sox6基因及蛋白表達明顯降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05); miR-26b抑制組Bhihe22、Sox6基因及蛋白的表達明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與對照組相比,miR-26b過度表達組胰島素釋放增加68.9%,而miR-26b抑制組胰島素釋... 

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 mi R-26b過表達慢病毒構建
    1.3 INS-1細胞株培養(yǎng)
    1.4 胰島素ELISA檢測
    1.5 免疫印跡實驗
    1.6 熒光定量PCR實驗
    1.7 統(tǒng)計學處理
2 結果
    2.1 3組Sox6和Bhihe22蛋白及基因表達比較
    2.2 3組胰島素釋放的比較
3 討論
4 結論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]急性冠脈綜合征患者血清miR-26b、IGF-1表達水平與冠脈病變程度的相關性分析[J]. 王娟,陳丹,譚利國,汪茜.  熱帶醫(yī)學雜志. 2019(06)
[2]miR-26a調(diào)控Sox6和Bhlhe22表達對胰島素分泌的影響[J]. 柳嵐,桑丹,曾玲,蔣鳳秀,陸澤元.  中國社區(qū)醫(yī)師. 2016(34)



本文編號:3713497

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