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β4GalT1基因點(diǎn)突變?yōu)镚alNAcT對小鼠生理功能的影響

發(fā)布時間:2022-10-22 19:20
  [目的]本文旨在研究β-1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1基因(β4GalT1)突變?yōu)镹-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶基因(GalNAcT)對小鼠生理功能的影響。[方法]以β4GalT1基因點(diǎn)突變的純合子、雜合子和野生型小鼠為研究對象,觀察、測定和記錄小鼠的日常狀態(tài)與繁殖情況,并采用單因素方差分析和多重比較對數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析,研究β4GalT1基因點(diǎn)突變?yōu)镚alNAcT基因?qū)π∈笊L發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育和雌小鼠繁殖能力的影響。以純合子和野生型小鼠為研究對象,探討β4GalT1基因點(diǎn)突變對小鼠肝臟中蛋白質(zhì)糖基化的影響。[結(jié)果]通過對比不同周齡的純合子和野生型小鼠的體質(zhì)量和成年小鼠的主要器官質(zhì)量,發(fā)現(xiàn)β4GalT1基因點(diǎn)突變對小鼠體質(zhì)量和主要器官質(zhì)量均無顯著影響。通過對純合子和野生型小鼠肝臟中N-鏈寡糖的比較可知,β4GalT1基因點(diǎn)突變改變了小鼠肝臟中N-鏈寡糖的結(jié)構(gòu)。觀察純合子和野生型小鼠日常狀態(tài)發(fā)現(xiàn),純合子小鼠比野生型小鼠反應(yīng)遲滯,對外界刺激反應(yīng)不敏感。通過懸尾試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)純合子小鼠的靜止時間極顯著長于野生型小鼠(P<0.01)。對3種基因型小鼠進(jìn)行親本自交,發(fā)現(xiàn)純合子雌小鼠受孕困難,或者受孕以后不... 

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料和試劑
    1.2 β4GalT1基因點(diǎn)突變小鼠的設(shè)計(jì)
    1.3 動物飼養(yǎng)
    1.4 β4GalT1基因點(diǎn)突變小鼠基因型鑒定
        1.4.1 樣品采集及鼠尾基因組DNA的提取
        1.4.2 β4GalT1基因點(diǎn)突變小鼠基因型的鑒定
    1.5 β4GalT1基因點(diǎn)突變小鼠的繁殖、行為學(xué)分析及器官質(zhì)量測定
        1.5.1 β4GalT1基因點(diǎn)突變小鼠的繁殖
        1.5.2 β4GalT1基因點(diǎn)突變小鼠的形態(tài)和行為
        1.5.3 β4GalT1基因點(diǎn)突變小鼠的器官質(zhì)量
        1.5.4 統(tǒng)計(jì)分析
    1.6 β4GalT1基因點(diǎn)突變對小鼠肝臟中糖基化的影響
        1.6.1 小鼠肝臟樣品的處理
        1.6.2 小鼠肝臟中N-鏈寡糖的制備
            1)肝臟的前處理:
            2)N-鏈寡糖的酶解釋放:
            3)N-鏈寡糖的純化:
        1.6.3 小鼠肝臟N-鏈寡糖的高效液相色譜(UPLC)檢測
2 結(jié)果與分析
    2.1 小鼠基因型的鑒定
        2.1.1 PCR鑒定小鼠基因型
        2.1.2 不同基因型小鼠肝臟中N-鏈寡糖的比較
    2.2 β4GalT1基因點(diǎn)突變對小鼠的生長發(fā)育、行為及雌小鼠繁殖能力的影響
        2.2.1 β4GalT1基因點(diǎn)突變對小鼠生長發(fā)育的影響
        2.2.2 β4GalT1基因點(diǎn)突變對小鼠行為的影響
        2.2.3 β4GalT1基因點(diǎn)突變對雌小鼠繁殖能力的影響
3 討論與結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]肝臟功能的檢測方法分類及研究現(xiàn)狀[J]. 李婷.  肝臟. 2019(08)
[2]β1,4半乳糖基轉(zhuǎn)移酶的生物學(xué)功能研究進(jìn)展[J]. 李淑芬,李希.  生命的化學(xué). 2016(05)



本文編號:3696719

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