水稻種子特異表達(dá)基因OsbZIP76的功能研究
發(fā)布時(shí)間:2022-09-29 13:40
水稻是世界上最重要的糧食作物之一。胚乳是水稻種子的重要組成部分,胚乳的發(fā)育狀態(tài)直接影響水稻產(chǎn)量和稻米品質(zhì),因此對(duì)水稻胚乳發(fā)育調(diào)控機(jī)理的研究具有非常重要的意義。近年來發(fā)現(xiàn)印記基因?qū)τ跀M南芥種子的發(fā)育十分重要,然而迄今為止,關(guān)于控制水稻胚乳發(fā)育的水稻印記基因的作用還未得到很好的認(rèn)識(shí),同時(shí)研究證明轉(zhuǎn)錄因子廣泛參與水稻胚乳發(fā)育的調(diào)控。因此,本項(xiàng)目擬對(duì)一個(gè)bZIP轉(zhuǎn)錄因子家族中潛在的印記基因OsbZIP76展開研究,探索其在水稻胚乳發(fā)育過程中作用。具體研究結(jié)果如下:1.前人研究表明OsbZIP76是母本特異表達(dá)印記基因,但是實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在五豐(W)和豫6(Y)的正反交組合中主要表達(dá)豫6的等位基因,當(dāng)東鄉(xiāng)野生稻(D)作為母本分別與榮豐(R)和豫6(Y)雜交后主要表達(dá)東鄉(xiāng)野生稻(D)的等位基因,當(dāng)東鄉(xiāng)野生稻(D)作為父本分別與榮豐(R)和豫6(Y)雜交后母本等位基因和父本等位基因以2:1的比例表達(dá)。因此,在我們所選取的這四組正反交組合中OsbZIP76并不呈現(xiàn)印記表達(dá)模式,表明OsbZIP76是一個(gè)背景依賴性的印記基因。2.煙草亞細(xì)胞定位結(jié)果表明OsbZIP76主要定位在煙草表皮細(xì)胞細(xì)胞核中,這與O...
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號(hào)說明
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 水稻胚乳發(fā)育的研究進(jìn)展
1.1.1 水稻胚乳的發(fā)育進(jìn)程
1.1.2 水稻胚乳發(fā)育的分子調(diào)控
1.2 印記基因的研究進(jìn)展
1.2.1 印記基因的發(fā)現(xiàn)
1.2.2 印記基因的進(jìn)化理論
1.2.3 印記基因與胚乳發(fā)育
1.3 植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展
1.3.1 植物轉(zhuǎn)錄因子家族的研究
1.3.2 植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)
1.3.3 植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子生物學(xué)功能
1.4 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 載體構(gòu)建
2.2.1 OsbZIP76過表達(dá)和OsbZIP76 RNAi載體構(gòu)建
2.2.2 OsbZIP76 CRISPR/Cas9載體構(gòu)建
2.3 定量RT-PCR分析
2.3.1 水稻組織總RNA提取
2.3.2 第一鏈cDNA的合成
2.3.3 定量RT-PCR
2.4 印記基因驗(yàn)證
2.5 煙草亞細(xì)胞定位
2.6 原位雜交
2.7 轉(zhuǎn)錄激活活性檢測(cè)
2.8 酵母雙雜交
2.9 雙熒光素酶檢測(cè)試驗(yàn)(LUC)
2.10 雙分子熒光互補(bǔ)試驗(yàn)(BiFC)
2.11 樹脂切片
第三章 結(jié)果和分析
3.1 OsbZIP76的印記表達(dá)模式驗(yàn)證
3.2 OsbZIP76表達(dá)模式
3.3 OsbZIP76亞細(xì)胞定位
3.4 OsbZIP76異常表達(dá)造成種子發(fā)育較小
3.5 osbzip76突變體胚乳細(xì)胞化提前
3.6 轉(zhuǎn)錄組分析
3.7 OsbZIP76和OsNF-YB1/9互作
第四章 小結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]植物種子發(fā)育的分子機(jī)理[J]. 劉春明,程佑發(fā),劉永秀,孫蒙祥,薛紅衛(wèi). 中國(guó)基礎(chǔ)科學(xué). 2016(02)
[2]植物NF-Y轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能及其研究進(jìn)展[J]. 宋秋明,李大勇,張慧娟,宋鳳鳴. 植物生理學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]植物基因組印跡的表觀遺傳學(xué)機(jī)制及其演化研究[J]. 李玥,賴思晨,張?jiān)品?田寶強(qiáng),嚴(yán)勝柒. 分子植物育種. 2014(05)
[4]bZIP轉(zhuǎn)錄因子與植物抗逆性研究進(jìn)展[J]. 曹紅利,岳川,王新超,楊亞軍. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(08)
[5]核因子Y在植物中的分類及其功能概述[J]. 李文濱,李勝暢,王志坤. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(01)
[6]植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能[J]. 張計(jì)育,渠慎春,郭忠仁,杜小麗,都貝貝,章鎮(zhèn). 西北植物學(xué)報(bào). 2011(05)
[7]Polycomb Group蛋白復(fù)合體與植物春化作用[J]. 安艷榮,徐建斌,安海龍. 遺傳. 2011(03)
[8]擬南芥的印記基因和印記表達(dá)調(diào)控[J]. 張紅宇,徐培洲,楊華,吳先軍. 遺傳. 2010(07)
[9]植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展[J]. 楊穎,高世慶,唐益苗,冶曉芳,王永波,劉美英,趙昌平. 麥類作物學(xué)報(bào). 2009(04)
[10]水稻胚乳游離核的分裂及其影響因素[J]. 劉滿希,王忠,吳小美,陳義芳,顧蘊(yùn)潔. 中國(guó)水稻科學(xué). 2008(03)
博士論文
[1]組蛋白甲基化與DNA甲基化的相互作用及其表觀遺傳機(jī)制的研究[D]. 陳香嵩.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3682697
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
符號(hào)說明
第一章 文獻(xiàn)綜述
1.1 水稻胚乳發(fā)育的研究進(jìn)展
1.1.1 水稻胚乳的發(fā)育進(jìn)程
1.1.2 水稻胚乳發(fā)育的分子調(diào)控
1.2 印記基因的研究進(jìn)展
1.2.1 印記基因的發(fā)現(xiàn)
1.2.2 印記基因的進(jìn)化理論
1.2.3 印記基因與胚乳發(fā)育
1.3 植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展
1.3.1 植物轉(zhuǎn)錄因子家族的研究
1.3.2 植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)
1.3.3 植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子生物學(xué)功能
1.4 本研究的目的和意義
第二章 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.2 載體構(gòu)建
2.2.1 OsbZIP76過表達(dá)和OsbZIP76 RNAi載體構(gòu)建
2.2.2 OsbZIP76 CRISPR/Cas9載體構(gòu)建
2.3 定量RT-PCR分析
2.3.1 水稻組織總RNA提取
2.3.2 第一鏈cDNA的合成
2.3.3 定量RT-PCR
2.4 印記基因驗(yàn)證
2.5 煙草亞細(xì)胞定位
2.6 原位雜交
2.7 轉(zhuǎn)錄激活活性檢測(cè)
2.8 酵母雙雜交
2.9 雙熒光素酶檢測(cè)試驗(yàn)(LUC)
2.10 雙分子熒光互補(bǔ)試驗(yàn)(BiFC)
2.11 樹脂切片
第三章 結(jié)果和分析
3.1 OsbZIP76的印記表達(dá)模式驗(yàn)證
3.2 OsbZIP76表達(dá)模式
3.3 OsbZIP76亞細(xì)胞定位
3.4 OsbZIP76異常表達(dá)造成種子發(fā)育較小
3.5 osbzip76突變體胚乳細(xì)胞化提前
3.6 轉(zhuǎn)錄組分析
3.7 OsbZIP76和OsNF-YB1/9互作
第四章 小結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]植物種子發(fā)育的分子機(jī)理[J]. 劉春明,程佑發(fā),劉永秀,孫蒙祥,薛紅衛(wèi). 中國(guó)基礎(chǔ)科學(xué). 2016(02)
[2]植物NF-Y轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能及其研究進(jìn)展[J]. 宋秋明,李大勇,張慧娟,宋鳳鳴. 植物生理學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]植物基因組印跡的表觀遺傳學(xué)機(jī)制及其演化研究[J]. 李玥,賴思晨,張?jiān)品?田寶強(qiáng),嚴(yán)勝柒. 分子植物育種. 2014(05)
[4]bZIP轉(zhuǎn)錄因子與植物抗逆性研究進(jìn)展[J]. 曹紅利,岳川,王新超,楊亞軍. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2012(08)
[5]核因子Y在植物中的分類及其功能概述[J]. 李文濱,李勝暢,王志坤. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2012(01)
[6]植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子的生物學(xué)功能[J]. 張計(jì)育,渠慎春,郭忠仁,杜小麗,都貝貝,章鎮(zhèn). 西北植物學(xué)報(bào). 2011(05)
[7]Polycomb Group蛋白復(fù)合體與植物春化作用[J]. 安艷榮,徐建斌,安海龍. 遺傳. 2011(03)
[8]擬南芥的印記基因和印記表達(dá)調(diào)控[J]. 張紅宇,徐培洲,楊華,吳先軍. 遺傳. 2010(07)
[9]植物bZIP轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展[J]. 楊穎,高世慶,唐益苗,冶曉芳,王永波,劉美英,趙昌平. 麥類作物學(xué)報(bào). 2009(04)
[10]水稻胚乳游離核的分裂及其影響因素[J]. 劉滿希,王忠,吳小美,陳義芳,顧蘊(yùn)潔. 中國(guó)水稻科學(xué). 2008(03)
博士論文
[1]組蛋白甲基化與DNA甲基化的相互作用及其表觀遺傳機(jī)制的研究[D]. 陳香嵩.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
本文編號(hào):3682697
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