目的通過沉默人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞HaCaT細(xì)胞中nicastrin（NCSTN）基因的表達(dá),研究其下游細(xì)胞增殖及分化相關(guān)信號通路的改變。方法將HaCaT細(xì)胞分為干擾組、陰性對照組和空白對照組:干擾組轉(zhuǎn)染特異性NCSTN-siRNA,陰性對照組轉(zhuǎn)染陰性對照siRNA,空白對照組轉(zhuǎn)染等量轉(zhuǎn)染試劑。實時PCR及Western印跡檢測各組NCSTN mRNA和蛋白表達(dá)驗證轉(zhuǎn)染效率。運用Agilent人類全基因組表達(dá)譜芯片技術(shù)研究干擾組HaCaT細(xì)胞基因表達(dá)譜與陰性對照組之間的差異,以表達(dá)上調(diào)或者下調(diào)倍數(shù)≥ 2.0且P ≤ 0.05為標(biāo)準(zhǔn),將差異基因用GO分析進(jìn)行富集,篩選出表達(dá)差異顯著且與角質(zhì)形成細(xì)胞增生分化相關(guān)的基因,用實時PCR驗證結(jié)果。結(jié)果干擾組HaCaT細(xì)胞NCSTN mRNA及蛋白相對表達(dá)量分別為0.287 ± 0.090、0.443 ± 0.085,明顯低于陰性對照組（0.969 ± 0.127、1.047 ± 0.114）以及空白對照組（1.000 ± 0.151、1.000 ± 0.111）,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（F值分別為30.787、31.139,P值均為0.001）。表達(dá)譜... 

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Nicastrin基因突變的反常性痤瘡患者皮損Notch-HES信號通路的表達(dá)[J]. 肖學(xué)敏,李誠讓,何艷艷,張曉峰,徐浩翔,王寶璽.  中華皮膚科雜志. 2016 (06)



本文編號：3680381