發(fā)布時間：2022-09-17 14:22

　　目的:探討辛伐他�。╯imvastatin,SVA）通過調(diào)控細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶1（checkpoint kinase 1,Chk1）基因表達(dá)對宮頸癌細(xì)胞增殖、凋亡及放療敏感性的影響。方法:體外培養(yǎng)宮頸癌Hela細(xì)胞,采用不同濃度（3.25μmol/L、6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L）SVA處理細(xì)胞,以0μmol/L SVA為空白組（Con組）。采用MTT法檢測SVA對細(xì)胞的增殖抑制率,篩選SVA最適濃度（SVA組）用于后續(xù)研究。流式細(xì)胞術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡率。采用2、4、6、8 Gy劑量X射線照射細(xì)胞。將Chk1陰性對照質(zhì)粒、Chk1 si RNA分別轉(zhuǎn)染至Hela細(xì)胞,分別命名為si-NC、si-Chk1組;重組pc DNA 3. 1/Chk1基因過表達(dá)質(zhì)粒及空載體對照質(zhì)粒分轉(zhuǎn)染至SVA組細(xì)胞中,分別命名為SVA+pc DNA-Chk1組、SVA+pc DNA組。采用q RT-PCR與Western blot法檢測各組細(xì)胞中Chk1 m RNA及蛋白表達(dá)水平; MTT法檢測各組細(xì)胞增殖能力;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況;克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞... 

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞與主要試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及照射條件
        1.2.2 MTT法檢測SVA對細(xì)胞增殖的抑制作用
        1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率
        1.2.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        1.2.5 克隆形成實(shí)驗(yàn)
        1.2.6 實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測Chk1 mRNA表達(dá)水平
        1.2.7 蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測Chk1蛋白表達(dá)水平
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 不同濃度SVA對宮頸癌Hela細(xì)胞增殖抑制率的影響
    2.2 SVA對宮頸癌Hela細(xì)胞凋亡率的影響
    2.3 SVA對宮頸癌Hela細(xì)胞放療敏感性的影響
    2.4 SVA對宮頸癌Hela細(xì)胞中Chk1基因表達(dá)的影響
    2.5 抑制Chk1表達(dá)對宮頸癌Hela細(xì)胞增殖、凋亡、放療敏感性的影響
    2.6 過表達(dá)Chk1逆轉(zhuǎn)了SVA對宮頸癌Hela細(xì)胞增殖、凋亡和放療敏感性的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3679394