發(fā)布時間：2022-08-07 17:14

　　甘遂（Euphorbia kansui Liou）是大戟科（Euphorbiaceae）大戟屬（Euphorbia）的多年生草本植物,是我國特有的一種傳統(tǒng)中藥,入藥部位為其塊根,主治水腫、咳喘、腫瘤等病癥。每年7、8月份幼苗由種子或留在地下的塊根形成,12月份生長停止,完成營養(yǎng)生長,到次年3月份幼苗出土,4月份開花,5月底果實成熟,完成生殖生長。甘遂全株各部位均有白色乳汁,其為乳汁管的細胞質(zhì)。甘遂的乳汁管為無節(jié)分枝乳汁管,其有效成分如萜類和類黃酮等物質(zhì)大多產(chǎn)生并儲存于乳汁中,因此研究乳汁管的發(fā)育具有很重要的理論和實踐意義。細胞自噬是一種高度保守的物質(zhì)循環(huán)過程,主要是調(diào)控長壽命蛋白質(zhì)和功能異常的細胞器的降解。我們課題組在甘遂的乳汁管中觀察到線粒體、質(zhì)體等細胞器與類似溶酶體的小型酸性細胞器融合的現(xiàn)象,并在甘遂轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中發(fā)現(xiàn)了自噬相關(guān)基因�；诖�,我們根據(jù)甘遂轉(zhuǎn)錄組信息克隆了自噬相關(guān)蛋白ATG8家族的2個同源基因（ATG8c和ATG8f）的CDS序列,并分析了其在根、莖、葉和乳汁中的表達,同時建立了甘遂快繁生芽和生根以及愈傷組織培養(yǎng)的最佳條件,為后續(xù)甘遂乳汁管自噬發(fā)生模式、構(gòu)建ATG8轉(zhuǎn)基... 

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1.1 甘遂及其乳汁管的研究概況
        1.1.1 甘遂的研究進展
        1.1.2 甘遂乳汁管的研究進展
    1.2 植物自噬研究概況
        1.2.1 植物自噬的研究進展及作用
        1.2.2 植物自噬相關(guān)基因及ATG8的研究進展
    1.3 植物組織培養(yǎng)的研究進展
        1.3.1 影響植物組織培養(yǎng)的主要因素
        1.3.2 褐化的控制
    1.4 研究目的及意義
第二章 研究材料和方法
    2.1 材料、試劑及儀器
        2.1.1 材料
        2.1.2 菌株及載體
        2.1.3 試劑盒與酶
        2.1.4 主要器材及儀器設(shè)備
        2.1.5 培養(yǎng)基、試劑、緩沖液及配制方法
    2.2 研究方法
        2.2.1 甘遂自噬相關(guān)基因ATG8CDS序列的克隆及分析
        2.2.2 愈傷培養(yǎng)及形態(tài)觀察
        2.2.3 快繁體系的建立
第三章 研究結(jié)果
    3.1 甘遂自噬相關(guān)基因CDS序列的克隆及表達分析
        3.1.1 甘遂根、莖、葉及乳汁總RNA的質(zhì)量檢測
        3.1.2 ATG8c、ATG8f編碼序列(CDS)的克隆及回收
        3.1.3 CDS的測序
        3.1.4 同源比對及進化樹分析
        3.1.5 ATG8的2個同源基因在甘遂根、莖、葉及乳汁中的表達分析
    3.2 甘遂的愈傷培養(yǎng)
        3.2.1 外植體的選擇及消毒條件的篩選
        3.2.2 不同激素組合的愈傷誘導(dǎo)情況
    3.3 甘遂的快繁培養(yǎng)
        3.3.1 不同激素組合的快繁誘芽情況及增殖培養(yǎng)
        3.3.2 不同激素對誘導(dǎo)快繁生根的影響
第四章 討論與結(jié)論
    4.1 2個ATG8同源基因的表達分析
    4.2 組培中消毒時間對后期培養(yǎng)的影響
    4.3 不同激素對愈傷組織培養(yǎng)的影響
    4.4 不同激素對快繁生根的影響
    4.5 結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3670720