發(fā)布時間：2022-07-20 13:44

　　目的探討DDB2基因不同轉(zhuǎn)錄本在胃癌及其遠(yuǎn)端正常組織中表達(dá)差異及其對胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法選取68對胃癌組織及其對應(yīng)的遠(yuǎn)端正常胃組織,制成組織芯片,通過免疫組化染色分析胃癌及正常組織中常態(tài)轉(zhuǎn)錄本W(wǎng)T編碼蛋白的表達(dá)差異。而后提取48對胃癌和遠(yuǎn)端正常胃組織的總RNA,利用qPCR檢測DDB2基因WT、D1轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)水平。而后通過qPCR檢測多種胃癌細(xì)胞系中DDB2不同轉(zhuǎn)錄本的本底表達(dá)水平并構(gòu)建DDB2 WT和D1過表達(dá)質(zhì)粒,分別將空載體和兩種質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入胃癌細(xì)胞系并進(jìn)行分組。應(yīng)用WB實(shí)驗(yàn)檢測轉(zhuǎn)染情況并根據(jù)轉(zhuǎn)染情況與其本底表達(dá)情況篩選工具細(xì)胞系。通過CCK-8實(shí)驗(yàn)與Transwell實(shí)驗(yàn)檢測各組細(xì)胞的增殖與遷移能力。通過WB實(shí)驗(yàn)檢測各組細(xì)胞的上皮間質(zhì)化與凋亡情況。結(jié)果DDB2 WT轉(zhuǎn)錄本編碼蛋白在胃癌與正常組織之間無明顯差異。在RNA水平,胃癌組織中DDB2 D1轉(zhuǎn)錄本的在表達(dá)顯著高于遠(yuǎn)端正常組織（P<0.05）,而WT轉(zhuǎn)錄本在兩者間表達(dá)無明顯差異。體外實(shí)驗(yàn)中,WT轉(zhuǎn)錄本促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖但抑制其遷移能力（P<0.05）,而D1轉(zhuǎn)錄本抑制增殖但促進(jìn)其遷移能力（P<0.... 

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 DDB2在胃癌與其遠(yuǎn)端正常胃組織中的表達(dá)差異
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑耗材與儀器
        2.2 方法
    3 結(jié)果
        3.1 DDB2WT編碼蛋白在胃癌與遠(yuǎn)端正常胃組織中表達(dá)量無明顯差異
        3.2 DDB2基因WT、D1轉(zhuǎn)錄本在胃癌與遠(yuǎn)端正常組織中的RNA表達(dá)水平
    4.討論
第二部分 DDB2不同轉(zhuǎn)錄本對胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    1 前言
    2 材料方法
        2.1 主要試劑耗材和儀器設(shè)備
        2.2 方法
    3 結(jié)果
        3.1 工具細(xì)胞系的篩選
        3.2 DDB2 WT轉(zhuǎn)錄本促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖而抑制遷移,D1轉(zhuǎn)錄本抑制胃癌細(xì)胞增殖而促進(jìn)遷移
        3.3 DDB2 WT、D1轉(zhuǎn)錄本對胃癌細(xì)胞的凋亡與EMT現(xiàn)象無明顯影響
    4 討論
本研究創(chuàng)新性自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀期間取得研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3664108