以栽培辣椒和野生型辣椒為試驗材料,采用雙重PCR體系構(gòu)建的方法,建立了辣椒抗瘡痂病基因Bs2和Bs3的雙重PCR反應(yīng)體系,以期利用該反應(yīng)體系提高辣椒抗瘡痂病種質(zhì)資源鑒定和育種分離世代材料分子標(biāo)記輔助篩選的效率。結(jié)果表明:抗瘡痂病基因Bs2和Bs3的雙重PCR反應(yīng)體系,以Bs2-For/Bs2-Rev和Bs3-For/Bs3-Rev為特異引物,在退火溫度為52℃時,具有很好的多態(tài)性和穩(wěn)定性。此外,用該體系對不同辣椒種材料進行抗病性鑒定,與接種鑒定的結(jié)果一致,進一步驗證了該體系的可靠性。該雙重PCR反應(yīng)體系可用于辣椒抗瘡痂病品種選育。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗材料
    1.2 試驗方法
        1.2.1 基因組DNA (gDNA)的提取與標(biāo)記引物設(shè)計
        1.2.2 單組PCR反應(yīng)條件
        1.2.3 雙重引物PCR反應(yīng)條件
        1.2.4 聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測
        1.2.5 雙重PCR反應(yīng)特異性與穩(wěn)定性驗證
        1.2.6 雙重PCR反應(yīng)體系的廣適性驗證
        1.2.7 辣椒材料抗病性接種鑒定
2 結(jié)果與分析
    2.1 單一PCR引物驗證
    2.2 雙重PCR最佳反應(yīng)條件
    2.3 雙重PCR檢測Bs2和Bs3的特異性
    2.4 雙重PCR適用性驗證
    2.5 辣椒抗瘡痂病接種鑒定
3 討論
    3.1 雙重PCR標(biāo)記開發(fā)方法的應(yīng)用
    3.2 雙重PCR的影響因素
    3.3 辣椒抗瘡痂病鑒定


【參考文獻】：
期刊論文
[1]抗蟲耐除草劑轉(zhuǎn)基因玉米SW-1目標(biāo)性狀測試及多重PCR檢測[J]. 張欣,董玉鳳,王旭靜,王志興.  生物技術(shù)進展. 2017(04)
[2]辣椒瘡痂病抗性研究進展[J]. 姚明華,李寧,王飛.  辣椒雜志. 2013(03)
[3]116個小麥品種（系）抗葉銹基因Lr9-Lr26、Lr19-Lr20的復(fù)合PCR檢測[J]. 任曉利,劉太國,劉博,高利,陳萬權(quán).  植物保護. 2012(02)
[4]多重PCR技術(shù)在植物生物學(xué)研究中的應(yīng)用[J]. 劉正斌,高慶榮,王瑞霞,喬曉琳,邱新民.  分子植物育種. 2005(02)
[5]辣椒和甜椒品種抗細(xì)菌性瘡痂病鑒定[J]. 孫福在,趙廷昌,張寶璽.  植物保護. 2004(03)

博士論文
[1]辣椒抗CMV的遺傳分析及相關(guān)QTL定位[D]. 姚明華.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]同時檢測抗病基因Mi、Tm-2~2和Cf-9的多重PCR體系的建立[D]. 任素賢.河北科技大學(xué) 2015
[2]同時檢測抗病基因Ty-1、Ty-2和Ty-3的多重PCR體系的建立[D]. 宋層孝.河北科技大學(xué) 2015



本文編號：3660861