目前,癌癥已經(jīng)成為了造成人類死亡的重要原因,嚴重影響人類的生命安全。傳統(tǒng)的治療方法,包括手術治療、化療和放療,對癌癥有一定的療效,但是其有限的治療效果和嚴重的毒副作用使其仍然不能滿足臨床需求。隨著納米技術的發(fā)展及在影像學和腫瘤分子生物學中的不斷應用,為癌癥的早期診療提供了更加有效的策略。在本論文的研究中,將納米材料氧化石墨烯與化藥治療相結(jié)合,實現(xiàn)了聚乙二醇（PEG）功能化的氧化石墨烯負載鬼臼毒素（PPT）的還原型谷胱甘肽（GSH）響應型前藥DCM-S-PPT活體腫瘤增殖的抑制;將聚乙烯亞胺（PEI）功能化的嵌入式雙介孔二氧化硅納米球（EDMSNs）與基因治療（CD/5-FC自殺基因系統(tǒng)）聯(lián)合,達到了活體內(nèi)有效治療HCT116移植瘤的效果。本論文的研究內(nèi)容和主要結(jié)論總結(jié)如下:1,通過共價結(jié)合的方式將六臂PEG-NH2與羧基化的氧化石墨烯結(jié)合,得到了 PEG功能化的氧化石墨烯（GO-PEG）,接下來通過π-π堆積和疏水相互作用的方式將鬼臼毒素的GSH響應型前藥DCM-S-PPT負載到GO-PEG的表面,得到 GO-PEG/DCM-S-PPT。在細胞水平上考察了 GO-PEG/DCM-S-P... 

【文章頁數(shù)】：154 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 癌癥治療現(xiàn)狀及常用治療方法
    1.2 鬼臼毒素和自殺基因治療的研究現(xiàn)狀
        1.2.1 鬼臼毒素
        1.2.2 自殺基因治療
    1.3 納米材料在生物醫(yī)學領域的應用
        1.3.1 納米氧化石墨烯
        1.3.2 介孔二氧化硅納米顆粒
    1.4 本課題的研究內(nèi)容及意義
第二章 聚乙二醇功能化的氧化石墨烯靶向輸送GSH響應型鬼臼毒素前藥的研究
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 實驗方法
    2.3 實驗結(jié)果與討論
        2.3.1 GO-PEG的制備
        2.3.2 GO-PEG的表征
        2.3.3 GO-PEG對細胞活性的影響
        2.3.4 不同細胞GSH含量測定結(jié)果
        2.3.5 DCM-S-PPT與GSH反應的動力學研究結(jié)果
        2.3.6 DCM-S-PPT與胞內(nèi)GSH反應研究
        2.3.7 DCM-S-PPT對細胞活性的影響
        2.3.8 GO-PEG/DCM-S-PPT復合物的制備
        2.3.9 GO-PEG/DCM-S-PPT復合物的PPT釋放
        2.3.10 GO-PEG/DCM-S-PPT對293T和HeLa細胞活性影響
        2.3.11 GO-PEG/DCM-S-PPT誘導HeLa細胞凋亡的研究
        2.3.12 GO-PEG/DCM-S-PPT復合物與胞外GSH響應研究
        2.3.13 GO-PEG/DCM-S-PPT復合物與胞內(nèi)GSH響應研究
        2.3.14 GO-PEG/DCM-S-PPT復合物活體內(nèi)抗腫瘤結(jié)果
    2.4 本章小結(jié)
第三章 CD/5 -FC自殺基因系統(tǒng)的構(gòu)建
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 實驗方法
    3.3 實驗結(jié)果與討論
        3.3.1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        3.3.2 重組質(zhì)粒在細胞中的表達
        3.3.3 CD融合蛋白的功能檢測
        3.3.4 穩(wěn)定細胞系的構(gòu)建
        3.3.5 5-FC作用下穩(wěn)定細胞系的相對細胞活性
        3.3.6 CD/5-FC自殺基因系統(tǒng)的旁觀者效應研究
        3.3.7 5-FC作用下HCT1116-FCY1細胞凋亡
        3.3.8 凋亡相關蛋白的檢測
        3.3.9 毛細管區(qū)帶電泳方法檢測細胞內(nèi)5-FC和5-FU
    3.4 本章小結(jié)
第四章 聚乙烯亞胺功能化的氧化石墨烯介導CD/5-FC自殺基因系統(tǒng)的研究
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 實驗材料
        4.2.2 實驗方法
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 GO-PEI的常制備
        4.3.2 GO-PEI的表征
        4.3.3 GO-PEI與質(zhì)粒的結(jié)合能力
        4.3.4 GO-PEI對細胞活性的影響
        4.3.5 GO-PEI的細胞轉(zhuǎn)染效果
        4.3.6 活體內(nèi)轉(zhuǎn)染結(jié)果
    4.4 本章小結(jié)
第五章 聚乙烯亞胺修飾納米介孔二氧化硅介導的CD/5-FC自殺基因系統(tǒng)的研究
    5.1 引言
    5.2 材料和方法
        5.2.1 實驗材料
        5.2.2 實驗方法
    5.3 實驗結(jié)果與討論
        5.3.1 EDMSNs-PEI的合成和表征
        5.3.2 EDMSNs和EDMSNs-PEI與質(zhì)粒DNA的結(jié)合能力
        5.3.3 EDMSNs及EDMSNs-PEI的細胞毒性分析
        5.3.4 EDMSNs-PEI細胞吞噬及細胞內(nèi)分布的研究
        5.3.5 EDMSNs-PEI介導的質(zhì)粒體外細胞轉(zhuǎn)染效果的研究
        5.3.6 EDMSNs-PEI介導的質(zhì)粒活體內(nèi)轉(zhuǎn)染效果的研究
        5.3.7 EDMSNs-PEI介導的CD/5-FC系統(tǒng)活體內(nèi)抑瘤實驗結(jié)果
    5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 研究結(jié)論
    6.2 研究展望
參考文獻
致謝
在校期間論文發(fā)表情況
附錄


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Folate-conjugated polyspermine for lung cancer–targeted gene therapy[J]. Mei Zhang,You-Kyoung Kim,Pengfei Cui,Jialiang Zhang,Jianbin Qiao,Yujing He,Jinyuan Lyu,Chengqiong Luo,Lei Xing,Hulin Jiang.  Acta Pharmaceutica Sinica B. 2016(04)
[2]Antitumor activity of mutant bacterial cytosine deaminase gene for colon cancer[J]. Long-Ying Deng,Jian-Ping Wang,Zhi-Fu Gui,Li-Zong Shen,Division of Gastrointestinal Surgery,Department of General Surgery,First Affiliated Hospital,Nanjing Medical University,300 Guangzhou,Nanjing 210029,Jiangsu Province,China.  World Journal of Gastroenterology. 2011(24)



本文編號：3657250