【目的】實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）以高靈敏度和特異性等優(yōu)點(diǎn),成為基因表達(dá)分析的主要工具,而選擇適合不同條件下工作的內(nèi)參是qRT-PCR分析的前提。篩選得到適用于杜鵑紅山茶不同器官、不同時(shí)期花瓣的qRT-PCR分析的內(nèi)參基因,為后續(xù)相關(guān)基因功能研究提供可用的內(nèi)參基因�！痉椒ā窟x擇轉(zhuǎn)錄延伸因子編碼基因（EF1α）、α-tubulin（TUA）、β-tubulin（TUB）、Ubiquitin（UBQ）、肌動(dòng)蛋白（Actin）和甘油醛-3-磷酸脫氫酶（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH）6個(gè)看家基因,使用2種不同的計(jì)算程序GeNorm和NormFinder評(píng)估了6個(gè)基因表達(dá)的穩(wěn)定性。進(jìn)一步通過CaGASA3基因的表達(dá)模式驗(yàn)證了所選內(nèi)參基因的適用性。【結(jié)果】在不同器官中通過GeNorm和NormFinder篩選出穩(wěn)定性最好的基因,排名前2位的均為TUA和GAPDH,GAPDH基因在兩種計(jì)算程序評(píng)估中穩(wěn)定性均最佳。而在不同時(shí)期花瓣中,通過2種程序得出排名前2位的內(nèi)參基因均為T... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
    1.2 試驗(yàn)方法
        1.2.1 總RNA提取和cDNA合成
        1.2.2 內(nèi)參基因的選擇和引物設(shè)計(jì)
        1.2.3 qRT-PCR反應(yīng)條件
        1.2.4 引物特異性鑒定及擴(kuò)增效率計(jì)算
        1.2.5 內(nèi)參基因穩(wěn)定性驗(yàn)證及CaGASA3基因表達(dá)模式分析
        1.2.6 數(shù)據(jù)分析與內(nèi)參基因的確認(rèn)
2 結(jié)果與分析
    2.1 總RNA質(zhì)量及引物特異性
    2.2 引物擴(kuò)增特異性分析和擴(kuò)增效率
    2.3 候選內(nèi)參基因表達(dá)豐度分析
    2.4 候選內(nèi)參基因表達(dá)穩(wěn)定性分析
        2.4.1 GeNorm分析
        2.4.2 NormFinder分析
    2.5 內(nèi)參基因穩(wěn)定性的驗(yàn)證
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]萱草不同器官實(shí)時(shí)熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選[J]. 梁錦,劉海婷,鐘榮,李昊,尹冬梅,劉翔,秦巧平,張志國(guó),段可,倪迪安.  植物生理學(xué)報(bào). 2020(09)
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[8]不同光照條件下杜鵑紅山茶幼苗的生長(zhǎng)效應(yīng)及抗氧化生理響應(yīng)[J]. 李先民,劉新亮,李春牛,盧家仕,周錦業(yè),黃昌艷,卜朝陽(yáng).  熱帶作物學(xué)報(bào). 2019(04)
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