絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶（SHMT）在植物細(xì)胞一碳代謝途徑上起著重要作用。我們識(shí)別毛果楊PtrSHMT家族有9個(gè)基因成員,eFP數(shù)據(jù)顯示7個(gè)PtrSHMTs基因在多個(gè)組織內(nèi)有轉(zhuǎn)錄表達(dá),其中PtrSHMT9在木質(zhì)部表達(dá)水平最高。進(jìn)一步定量PCR和Aspwood檢測(cè)顯示,PtrSHMT9表達(dá)量在莖木質(zhì)組織次生壁加厚階段呈現(xiàn)高水平,這表明它可能參與楊樹木材形成。用Cas9/gRNA基因編輯技術(shù),制備PtrSHMT9被編輯產(chǎn)生的突變體,獲得4個(gè)不同株系ptrshmt9敲除突變體。這些研究結(jié)果為深入探究樹木SHMT及PtrSHMT9功能,提供了基礎(chǔ)信息和遺傳材料。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 毛果楊SHMT家族成員識(shí)別
        1.2.2 植物總RNA分離、總c DNA合成和基因組DNA提取
        1.2.3 Ptr SHMT基因e FP表達(dá)熱圖、在Aspwood轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù)檢測(cè)和定量PCR
        1.2.4 植物基因編輯載體構(gòu)構(gòu)建
        1.2.5 毛果楊遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因植株鑒定
        1.2.6 轉(zhuǎn)基因植株體內(nèi)Ptr SHMT9基因靶位點(diǎn)編輯鑒定
2 結(jié)果與分析
    2.1 楊樹SHMT基因家族識(shí)別
    2.2 Ptr SHMT基因家族表達(dá)分析
    2.3 p HSE401-Ptr SHMT9基因編輯載體構(gòu)建
    2.4 p HSE401-Ptr SHMT9遺傳轉(zhuǎn)化毛果楊及其分子鑒定
    2.5 Ptr SHMT9基因位點(diǎn)編輯突變分析
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Targeted Mutagenesis in Zea mays Using TALENs and the CRISPR/Cas System[J]. Zhen Liang,Kang Zhang,Kunling Chen,Caixia Gao.  Journal of Genetics and Genomics. 2014(02)



本文編號(hào)：3653932