獨(dú)腳金內(nèi)酯（Strigolactones,SLs）是一種產(chǎn)生于植物根部的類胡蘿卜素衍生物,自獨(dú)腳金內(nèi)酯從棉花根中分離得到以來,其合成、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及生理功能研究取得了重要進(jìn)展。它們有諸多重要的生理作用,如調(diào)控根系和叢枝菌根共生,抑制植物分枝,調(diào)控植物開花以及響應(yīng)非生物脅迫等。MAX2基因是獨(dú)腳金內(nèi)酯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的關(guān)鍵基因,編碼一類F-box蛋白,MAX2蛋白已顯示出調(diào)節(jié)植物多種生物過程的能力,包括植物結(jié)構(gòu),光形態(tài)發(fā)生,衰老和karrikin信號(hào)傳導(dǎo),響應(yīng)非生物脅迫信號(hào)等方面。黃瓜作為我國(guó)重要的蔬菜作物,干旱、鹽等非生物脅迫會(huì)嚴(yán)重影響黃瓜的生長(zhǎng)發(fā)育及品質(zhì)產(chǎn)量,目前,MAX2基因在黃瓜中的克隆研究鮮有報(bào)道,因此,本試驗(yàn)克隆了黃瓜中的MAX2基因,初步探究該基因在干旱、鹽脅迫中的分子機(jī)制,為CsMAX2基因在黃瓜獨(dú)腳金內(nèi)酯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中響應(yīng)非生物脅迫提供了理論依據(jù)。本試驗(yàn)結(jié)果表明:（1）通過克隆及生物信息學(xué)分析對(duì)CsMAX2基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行預(yù)測(cè)分析。結(jié)果表明,該序列開放閱讀框所翻譯的蛋白質(zhì)有715個(gè)氨基酸,CsMAX2是一類親水性蛋白,具有保守的F-box/LRR-repeat結(jié)... 

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 黃瓜在抗逆脅迫方面的研究進(jìn)展
        1.1.1 黃瓜響應(yīng)干旱脅迫的研究進(jìn)展
        1.1.2 黃瓜響應(yīng)鹽脅迫的研究進(jìn)展
    1.2 獨(dú)腳金內(nèi)酯的研究進(jìn)展
        1.2.1 獨(dú)腳金內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)
        1.2.2 獨(dú)腳金內(nèi)酯的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
        1.2.3 獨(dú)腳金內(nèi)酯與植物生長(zhǎng)發(fā)育及抗逆相關(guān)性研究
    1.3 獨(dú)腳金內(nèi)酯與脫落酸間的相互作用
    1.4 本課題研究的目的意義與技術(shù)路線
        1.4.1 研究的目的意義
        1.4.2 技術(shù)路線
第2章 黃瓜CsMAX2基因的克隆及生物信息學(xué)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 黃瓜CsMAX2基因克隆
        2.2.2 黃瓜CsMAX2基因生物信息學(xué)分析
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第3章 黃瓜CsMAX2基因的表達(dá)特性分析
    3.1 試驗(yàn)材料及試劑
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 主要試驗(yàn)儀器
        3.1.3 試劑、酶和引物
    3.2 方法
        3.2.1 黃瓜各組織器官的取材
        3.2.2 干旱、鹽、ABA處理后的取材
        3.2.3 RNA提取及檢測(cè)
        3.2.4 cDNA獲得
        3.2.5 黃瓜CsMAX2 基因不同組織及在干旱、鹽與ABA脅迫下的表達(dá)模式分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 CsMAX2基因在黃瓜不同組織中的表達(dá)分析
        3.3.2 CsMAX2基因在干旱、鹽與脫落酸處理下的表達(dá)特性分析
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第4章 黃瓜CsMAX2基因植物超表達(dá)載體構(gòu)建及在擬南芥中的功能驗(yàn)證
    4.1 試驗(yàn)材料及試劑
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 菌種與載體
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 培養(yǎng)基
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 植物表達(dá)載體的構(gòu)建
        4.2.2 重組載體雙酶切鑒定
        4.2.3 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化
        4.2.4 擬南芥種子的收取與篩選
        4.2.5 CsMAX2超表達(dá)擬南芥的鑒定
            4.2.5.1 提取擬南芥 DNA
            4.2.5.2 CsMAX2 超表達(dá)擬南芥 DNA PCR 擴(kuò)增鑒定
            4.2.5.3 CsMAX2 超表達(dá)擬南芥的RNA鑒定
        4.2.6 CsMAX2超表達(dá)擬南芥種子的收取與保存
        4.2.7 CsMAX2 超表達(dá)擬南芥在干旱、鹽與ABA處理下的萌發(fā)期表型
        4.2.8 CsMAX2超表達(dá)擬南芥干旱、鹽處理下的生理指標(biāo)測(cè)定
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 植物表達(dá)載體雙酶切鑒定
        4.3.2 CsMAX2超表達(dá)擬南芥的鑒定
        4.3.3 CsMAX2 超表達(dá)擬南芥在干旱、鹽、ABA處理下的萌發(fā)期表型
        4.3.4 CsMAX2 超表達(dá)擬南芥在干旱、鹽處理下葉綠素和MDA含量測(cè)定
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第5章 黃瓜CsMAX2 超表達(dá)擬南芥對(duì)干旱、鹽與ABA相關(guān)Marker基因的調(diào)控機(jī)制分析
    5.1 試驗(yàn)材料及試劑
        5.1.1 試驗(yàn)材料
        5.1.2 主要試驗(yàn)儀器
        5.1.3 試劑、酶和引物
    5.2 方法
        5.2.1 干旱、鹽處理后擬南芥取材
        5.2.2 RNA提取及檢測(cè)
        5.2.3 cDNA獲得
        5.2.4 熒光定量PCR
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 RNA提取及檢測(cè)
        5.3.2 CsMAX2 超表達(dá)擬南芥對(duì)干旱與鹽脅迫相關(guān)Marker基因的表達(dá)調(diào)控分析
        5.3.3 CsMAX2 超表達(dá)擬南芥對(duì)ABA信號(hào)通路基因的表達(dá)調(diào)控分析
    5.4 討論
    5.5 小結(jié)
總結(jié)
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士期間所發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[5]楊樹中MAX2同源基因的克隆[D]. 姜思思.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
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[7]水稻中獨(dú)腳金內(nèi)酯的結(jié)構(gòu)鑒定及檢測(cè)方法的研究[D]. 賈瑞琳.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013



本文編號(hào)：3652443