獨腳金內(nèi)酯（Strigolactones,SLs）是一種產(chǎn)生于植物根部的類胡蘿卜素衍生物,自獨腳金內(nèi)酯從棉花根中分離得到以來,其合成、信號轉導及生理功能研究取得了重要進展。它們有諸多重要的生理作用,如調(diào)控根系和叢枝菌根共生,抑制植物分枝,調(diào)控植物開花以及響應非生物脅迫等。MAX2基因是獨腳金內(nèi)酯信號轉導途徑中的關鍵基因,編碼一類F-box蛋白,MAX2蛋白已顯示出調(diào)節(jié)植物多種生物過程的能力,包括植物結構,光形態(tài)發(fā)生,衰老和karrikin信號傳導,響應非生物脅迫信號等方面。黃瓜作為我國重要的蔬菜作物,干旱、鹽等非生物脅迫會嚴重影響黃瓜的生長發(fā)育及品質(zhì)產(chǎn)量,目前,MAX2基因在黃瓜中的克隆研究鮮有報道,因此,本試驗克隆了黃瓜中的MAX2基因,初步探究該基因在干旱、鹽脅迫中的分子機制,為CsMAX2基因在黃瓜獨腳金內(nèi)酯信號轉導途徑中響應非生物脅迫提供了理論依據(jù)。本試驗結果表明:（1）通過克隆及生物信息學分析對CsMAX2基因編碼蛋白質(zhì)的結構和功能進行預測分析。結果表明,該序列開放閱讀框所翻譯的蛋白質(zhì)有715個氨基酸,CsMAX2是一類親水性蛋白,具有保守的F-box/LRR-repeat結... 

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 黃瓜在抗逆脅迫方面的研究進展
        1.1.1 黃瓜響應干旱脅迫的研究進展
        1.1.2 黃瓜響應鹽脅迫的研究進展
    1.2 獨腳金內(nèi)酯的研究進展
        1.2.1 獨腳金內(nèi)酯的結構
        1.2.2 獨腳金內(nèi)酯的信號轉導途徑
        1.2.3 獨腳金內(nèi)酯與植物生長發(fā)育及抗逆相關性研究
    1.3 獨腳金內(nèi)酯與脫落酸間的相互作用
    1.4 本課題研究的目的意義與技術路線
        1.4.1 研究的目的意義
        1.4.2 技術路線
第2章 黃瓜CsMAX2基因的克隆及生物信息學分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗方法
    2.2 結果
        2.2.1 黃瓜CsMAX2基因克隆
        2.2.2 黃瓜CsMAX2基因生物信息學分析
    2.3 討論
    2.4 小結
第3章 黃瓜CsMAX2基因的表達特性分析
    3.1 試驗材料及試劑
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 主要試驗儀器
        3.1.3 試劑、酶和引物
    3.2 方法
        3.2.1 黃瓜各組織器官的取材
        3.2.2 干旱、鹽、ABA處理后的取材
        3.2.3 RNA提取及檢測
        3.2.4 cDNA獲得
        3.2.5 黃瓜CsMAX2 基因不同組織及在干旱、鹽與ABA脅迫下的表達模式分析
    3.3 結果
        3.3.1 CsMAX2基因在黃瓜不同組織中的表達分析
        3.3.2 CsMAX2基因在干旱、鹽與脫落酸處理下的表達特性分析
    3.4 討論
    3.5 小結
第4章 黃瓜CsMAX2基因植物超表達載體構建及在擬南芥中的功能驗證
    4.1 試驗材料及試劑
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 菌種與載體
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 培養(yǎng)基
    4.2 試驗方法
        4.2.1 植物表達載體的構建
        4.2.2 重組載體雙酶切鑒定
        4.2.3 農(nóng)桿菌介導的擬南芥遺傳轉化
        4.2.4 擬南芥種子的收取與篩選
        4.2.5 CsMAX2超表達擬南芥的鑒定
            4.2.5.1 提取擬南芥 DNA
            4.2.5.2 CsMAX2 超表達擬南芥 DNA PCR 擴增鑒定
            4.2.5.3 CsMAX2 超表達擬南芥的RNA鑒定
        4.2.6 CsMAX2超表達擬南芥種子的收取與保存
        4.2.7 CsMAX2 超表達擬南芥在干旱、鹽與ABA處理下的萌發(fā)期表型
        4.2.8 CsMAX2超表達擬南芥干旱、鹽處理下的生理指標測定
    4.3 結果
        4.3.1 植物表達載體雙酶切鑒定
        4.3.2 CsMAX2超表達擬南芥的鑒定
        4.3.3 CsMAX2 超表達擬南芥在干旱、鹽、ABA處理下的萌發(fā)期表型
        4.3.4 CsMAX2 超表達擬南芥在干旱、鹽處理下葉綠素和MDA含量測定
    4.4 討論
    4.5 小結
第5章 黃瓜CsMAX2 超表達擬南芥對干旱、鹽與ABA相關Marker基因的調(diào)控機制分析
    5.1 試驗材料及試劑
        5.1.1 試驗材料
        5.1.2 主要試驗儀器
        5.1.3 試劑、酶和引物
    5.2 方法
        5.2.1 干旱、鹽處理后擬南芥取材
        5.2.2 RNA提取及檢測
        5.2.3 cDNA獲得
        5.2.4 熒光定量PCR
    5.3 結果
        5.3.1 RNA提取及檢測
        5.3.2 CsMAX2 超表達擬南芥對干旱與鹽脅迫相關Marker基因的表達調(diào)控分析
        5.3.3 CsMAX2 超表達擬南芥對ABA信號通路基因的表達調(diào)控分析
    5.4 討論
    5.5 小結
總結
參考文獻
攻讀碩士期間所發(fā)表的學術論文
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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[2]小麥TaNAC29和TaNAC2D基因克隆及抗逆功能研究[D]. 黃權軍.華中科技大學 2016
[3]擬南芥MAX2蛋白介導ABA信號及抗旱反應的分子機制[D]. 呂天曉.中國科學院研究生院（東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所） 2015

碩士論文
[1]miR166和miR319在黃瓜響應鹽脅迫中的功能分析[D]. 何小夢.華中農(nóng)業(yè)大學 2019
[2]干旱脅迫對黃瓜幼苗次生代謝物質(zhì)含量及相關酶活性的影響[D]. 金夢.安徽農(nóng)業(yè)大學 2017
[3]不同外源硒對干旱脅迫下黃瓜生長的影響[D]. 饒玲.西南大學 2017
[4]SMXL4在擬南芥獨腳金內(nèi)酯信號轉導及干旱響應中的功能研究[D]. 朱浩威.蘭州大學 2017
[5]楊樹中MAX2同源基因的克隆[D]. 姜思思.華中農(nóng)業(yè)大學 2016
[6]氮素和獨角金內(nèi)酯對水稻分蘗芽生長發(fā)育的調(diào)控[D]. 潘壽.南京農(nóng)業(yè)大學 2016
[7]水稻中獨腳金內(nèi)酯的結構鑒定及檢測方法的研究[D]. 賈瑞琳.中國農(nóng)業(yè)科學院 2013



本文編號：3652443