金銀花蛀干害蟲咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)基因鑒定及表達(dá)譜分析
發(fā)布時(shí)間:2022-02-26 14:26
金銀花Lonicera japonicaThunb為忍冬科Caprifoliaceae多年生常綠藤本植物,其花是我國(guó)傳統(tǒng)常用中藥?Х燃够⑻炫#╔ylotrechus grayii White)是金銀花的蛀干害蟲,隱蔽危害,利用化學(xué)農(nóng)藥對(duì)其防治效果不明顯且嚴(yán)重影響藥材安全性,急需開發(fā)無公害的防治手段。在長(zhǎng)期進(jìn)化過程中,昆蟲形成高度靈敏和復(fù)雜的嗅覺系統(tǒng),用其感受并識(shí)別外界環(huán)境中的化學(xué)信息物質(zhì),完成寄主植物、配偶的搜尋和定位。昆蟲嗅覺信號(hào)的形成涉及氣味結(jié)合蛋白(odorant-binding proteins,OBPs)和化學(xué)感受蛋白(chemosensory protein,CSPs)等一系列相關(guān)蛋白的互作,闡明昆蟲對(duì)環(huán)境中揮發(fā)性化合物的感受機(jī)制,為利用化學(xué)信息素對(duì)害蟲進(jìn)行迷向、引誘等可持續(xù)控制提供理論依據(jù)。本文通過測(cè)定咖啡脊虎天牛成蟲觸角轉(zhuǎn)錄組,利用生物信息學(xué)方法鑒定嗅覺相關(guān)蛋白基因,并分析化學(xué)感受蛋白基因CSPs在不同組織的表達(dá)差異,初步揭示咖啡脊虎天牛的嗅覺感受機(jī)制,為該天牛科學(xué)防治提供理論依據(jù)。主要取得如下研究結(jié)果:1、咖啡脊虎天牛觸角轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及生物信息學(xué)分析:(1)咖啡脊虎天...
【文章來源】:貴州師范大學(xué)貴州省
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 金銀花藥用價(jià)值
1.2 金銀花常見害蟲
1.3 咖啡脊虎天牛研究現(xiàn)狀
1.3.1 形態(tài)特征
1.3.2 生物學(xué)習(xí)性
1.3.3 危害及發(fā)生規(guī)律
1.3.4 防治措施
1.4 昆蟲嗅覺感受機(jī)制
1.4.1 昆蟲嗅覺感器
1.4.2 昆蟲對(duì)信息化學(xué)物質(zhì)的識(shí)別
1.5 嗅覺相關(guān)蛋白研究概況
1.5.1 昆蟲氣味結(jié)合蛋白研究進(jìn)展
1.5.2 昆蟲化學(xué)感受蛋白研究進(jìn)展
1.5.3 昆蟲氣味受體研究進(jìn)展
1.5.4 昆蟲感覺神經(jīng)元膜蛋白研究進(jìn)展
1.6 研究目的與意義
1.7 研究?jī)?nèi)容
1.8 技術(shù)路線
2 咖啡脊虎天牛觸角轉(zhuǎn)錄組分析
2.1 材料與方法
2.1.1 供試?yán)ハx
2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
2.1.3 咖啡脊虎天?俁NA的提取
2.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
2.3 生物信息分析流程
2.3.1 測(cè)序數(shù)據(jù)過濾
2.3.2 Unigene的功能注釋
2.4 結(jié)果與分析
2.4.1 咖啡脊虎天牛總RNA提取質(zhì)量
2.4.2 測(cè)序及組裝結(jié)果
2.4.3 Unigene功能注釋與KOG分類
2.4.4 Nr注釋
2.4.5 GO注釋
2.4.6 KOG注釋
2.4.7 KEGG注釋
2.5 討論
3 咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)基因鑒定
3.1 實(shí)驗(yàn)方法
3.1.1 咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)基因鑒定
3.1.2 OBP基因鑒定
3.1.3 CSP基因鑒定
3.1.4 ORs、SNMPs基因鑒定
3.2 序列分析
3.3 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)蛋白序列分析
3.4.2 構(gòu)建咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)蛋白系統(tǒng)發(fā)育樹
3.5 討論
4 咖啡脊虎天牛化學(xué)感受基因組織表達(dá)模式研究
4.1 材料與方法
4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.2 主要儀器
4.1.3 主要試劑
4.1.4 總RNA提取
4.1.5 cDNA第一鏈合成
4.1.6 qRT-PCR引物設(shè)計(jì)
4.1.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)反應(yīng)
4.2 結(jié)果分析
4.2.1 qRT-PCR結(jié)果
4.3 討論
5 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士研究生期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]金銀花病蟲害發(fā)生規(guī)律與防治技術(shù)[J]. 翟愛勇,周凌云. 河南農(nóng)業(yè). 2018(04)
[2]光肩星天牛氣味結(jié)合蛋白AglaOBP12的基因克隆、表達(dá)及配體結(jié)合特征[J]. 李廣偉,陳秀琳,尚天翠. 昆蟲學(xué)報(bào). 2017(10)
[3]中華蜜蜂氣味受體基因AcerOR113的克隆與時(shí)空表達(dá)分析[J]. 杜亞麗,王樹杰,趙慧婷,潘建芳,楊爽,郭麗娜,徐凱,姜玉鎖. 昆蟲學(xué)報(bào). 2017(05)
[4]黃斑星天牛雌蟲觸角氣味結(jié)合蛋白基因的鑒定及組織分布[J]. 李廣偉,陳秀琳,尚天翠. 生態(tài)學(xué)雜志. 2017(06)
[5]管氏腫腿蜂對(duì)咖啡滅字脊虎天牛寄生作用的研究[J]. 楊文波,吳國(guó)星,徐志強(qiáng),吳道慧,何霞紅,秦小萍. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2017(02)
[6]釋放天敵防治松褐天牛技術(shù)研究[J]. 吳東生,高尚坤,唐艷龍. 中國(guó)森林病蟲. 2017(02)
[7]中華蜜蜂氣味受體基因AcOr170的克隆與序列分析[J]. 楊樂,曾志將,張麗珍. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2017(01)
[8]山華李天牛的生活習(xí)性、危害癥狀及防控技術(shù)分析——以湖南省江華縣為例[J]. 劉祖斌,藍(lán)華中. 江西農(nóng)業(yè). 2017(03)
[9]茶尺蠖信息素結(jié)合蛋白PBP2的基因克隆、原核表達(dá)及其結(jié)合功能[J]. 馮一璐,傅曉斌,吳帆,崔宏春,李紅亮. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(03)
[10]煙粉虱MED隱種氣味結(jié)合蛋白基因BtabOBP2和BtabOBP4的cDNA克隆及原核表達(dá)[J]. 謝紅艷,萬魯長(zhǎng),黃春燕,劉國(guó)霞,Jean-Fran?ois Picimbon,宮志遠(yuǎn). 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2017(04)
博士論文
[1]桃蛀螟性信息素結(jié)合蛋白的功能研究[D]. 葛星.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[2]梨小食心蟲識(shí)別寄主植物揮發(fā)物的分子機(jī)制[D]. 李廣偉.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[3]斜紋夜蛾與棉鈴蟲化感基因鑒定及受體功能分析[D]. 張進(jìn).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]中華蜜蜂氣味受體基因Or1、Or2、Or3的鑒定、表達(dá)及定位分析[D]. 趙慧婷.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[5]麥長(zhǎng)管蚜氣味結(jié)合蛋白的結(jié)合特性及組織定位[D]. 鐘濤.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[6]云斑天牛觸角cDNA文庫的構(gòu)建及相關(guān)嗅覺蛋白的表達(dá)及功能分析[D]. 李慧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]金銀花黃酮活性成分分離純化與生物學(xué)效應(yīng)研究[D]. 唐敏.第三軍醫(yī)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]云斑天牛Minus-C OBPs與配基的結(jié)合與釋放機(jī)制[D]. 鄭志川.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]松褐天牛氣味結(jié)合蛋白基因克隆與分析[D]. 李娜.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]中黑盲蝽嗅覺相關(guān)蛋白鑒定及非典型嗅覺受體基因分析[D]. 崔歡歡.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[4]基于觸角轉(zhuǎn)錄組的麥長(zhǎng)管蚜OBPs和CSPs基因鑒定及表達(dá)譜研究[D]. 薛文鑫.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[5]金銀花農(nóng)藥殘留狀況與膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)研究[D]. 顧炎.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2016
[6]松褐天牛氣味結(jié)合蛋白基因的克隆與功能分析[D]. 王娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[7]噻蟲嗪對(duì)金銀花藥材質(zhì)量安全性評(píng)價(jià)研究[D]. 劉亞南.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2015
[8]金銀花中兩種除蟲菊酯類農(nóng)藥的殘留動(dòng)態(tài)研究[D]. 劉璐.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2015
[9]黃曲條跳甲化學(xué)感受基因的鑒定與表達(dá)分析[D]. 王正兵.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 2015
[10]云斑天牛性信息素分離鑒定及氣味結(jié)合蛋白結(jié)合特性分析[D]. 潘翔宇.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
本文編號(hào):3644657
【文章來源】:貴州師范大學(xué)貴州省
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 文獻(xiàn)綜述
1.1 金銀花藥用價(jià)值
1.2 金銀花常見害蟲
1.3 咖啡脊虎天牛研究現(xiàn)狀
1.3.1 形態(tài)特征
1.3.2 生物學(xué)習(xí)性
1.3.3 危害及發(fā)生規(guī)律
1.3.4 防治措施
1.4 昆蟲嗅覺感受機(jī)制
1.4.1 昆蟲嗅覺感器
1.4.2 昆蟲對(duì)信息化學(xué)物質(zhì)的識(shí)別
1.5 嗅覺相關(guān)蛋白研究概況
1.5.1 昆蟲氣味結(jié)合蛋白研究進(jìn)展
1.5.2 昆蟲化學(xué)感受蛋白研究進(jìn)展
1.5.3 昆蟲氣味受體研究進(jìn)展
1.5.4 昆蟲感覺神經(jīng)元膜蛋白研究進(jìn)展
1.6 研究目的與意義
1.7 研究?jī)?nèi)容
1.8 技術(shù)路線
2 咖啡脊虎天牛觸角轉(zhuǎn)錄組分析
2.1 材料與方法
2.1.1 供試?yán)ハx
2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
2.1.3 咖啡脊虎天?俁NA的提取
2.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
2.3 生物信息分析流程
2.3.1 測(cè)序數(shù)據(jù)過濾
2.3.2 Unigene的功能注釋
2.4 結(jié)果與分析
2.4.1 咖啡脊虎天牛總RNA提取質(zhì)量
2.4.2 測(cè)序及組裝結(jié)果
2.4.3 Unigene功能注釋與KOG分類
2.4.4 Nr注釋
2.4.5 GO注釋
2.4.6 KOG注釋
2.4.7 KEGG注釋
2.5 討論
3 咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)基因鑒定
3.1 實(shí)驗(yàn)方法
3.1.1 咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)基因鑒定
3.1.2 OBP基因鑒定
3.1.3 CSP基因鑒定
3.1.4 ORs、SNMPs基因鑒定
3.2 序列分析
3.3 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹
3.4 結(jié)果與分析
3.4.1 咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)蛋白序列分析
3.4.2 構(gòu)建咖啡脊虎天牛嗅覺相關(guān)蛋白系統(tǒng)發(fā)育樹
3.5 討論
4 咖啡脊虎天牛化學(xué)感受基因組織表達(dá)模式研究
4.1 材料與方法
4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
4.1.2 主要儀器
4.1.3 主要試劑
4.1.4 總RNA提取
4.1.5 cDNA第一鏈合成
4.1.6 qRT-PCR引物設(shè)計(jì)
4.1.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)反應(yīng)
4.2 結(jié)果分析
4.2.1 qRT-PCR結(jié)果
4.3 討論
5 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士研究生期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]金銀花病蟲害發(fā)生規(guī)律與防治技術(shù)[J]. 翟愛勇,周凌云. 河南農(nóng)業(yè). 2018(04)
[2]光肩星天牛氣味結(jié)合蛋白AglaOBP12的基因克隆、表達(dá)及配體結(jié)合特征[J]. 李廣偉,陳秀琳,尚天翠. 昆蟲學(xué)報(bào). 2017(10)
[3]中華蜜蜂氣味受體基因AcerOR113的克隆與時(shí)空表達(dá)分析[J]. 杜亞麗,王樹杰,趙慧婷,潘建芳,楊爽,郭麗娜,徐凱,姜玉鎖. 昆蟲學(xué)報(bào). 2017(05)
[4]黃斑星天牛雌蟲觸角氣味結(jié)合蛋白基因的鑒定及組織分布[J]. 李廣偉,陳秀琳,尚天翠. 生態(tài)學(xué)雜志. 2017(06)
[5]管氏腫腿蜂對(duì)咖啡滅字脊虎天牛寄生作用的研究[J]. 楊文波,吳國(guó)星,徐志強(qiáng),吳道慧,何霞紅,秦小萍. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2017(02)
[6]釋放天敵防治松褐天牛技術(shù)研究[J]. 吳東生,高尚坤,唐艷龍. 中國(guó)森林病蟲. 2017(02)
[7]中華蜜蜂氣味受體基因AcOr170的克隆與序列分析[J]. 楊樂,曾志將,張麗珍. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2017(01)
[8]山華李天牛的生活習(xí)性、危害癥狀及防控技術(shù)分析——以湖南省江華縣為例[J]. 劉祖斌,藍(lán)華中. 江西農(nóng)業(yè). 2017(03)
[9]茶尺蠖信息素結(jié)合蛋白PBP2的基因克隆、原核表達(dá)及其結(jié)合功能[J]. 馮一璐,傅曉斌,吳帆,崔宏春,李紅亮. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(03)
[10]煙粉虱MED隱種氣味結(jié)合蛋白基因BtabOBP2和BtabOBP4的cDNA克隆及原核表達(dá)[J]. 謝紅艷,萬魯長(zhǎng),黃春燕,劉國(guó)霞,Jean-Fran?ois Picimbon,宮志遠(yuǎn). 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2017(04)
博士論文
[1]桃蛀螟性信息素結(jié)合蛋白的功能研究[D]. 葛星.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[2]梨小食心蟲識(shí)別寄主植物揮發(fā)物的分子機(jī)制[D]. 李廣偉.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[3]斜紋夜蛾與棉鈴蟲化感基因鑒定及受體功能分析[D]. 張進(jìn).南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]中華蜜蜂氣味受體基因Or1、Or2、Or3的鑒定、表達(dá)及定位分析[D]. 趙慧婷.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[5]麥長(zhǎng)管蚜氣味結(jié)合蛋白的結(jié)合特性及組織定位[D]. 鐘濤.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[6]云斑天牛觸角cDNA文庫的構(gòu)建及相關(guān)嗅覺蛋白的表達(dá)及功能分析[D]. 李慧.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[7]金銀花黃酮活性成分分離純化與生物學(xué)效應(yīng)研究[D]. 唐敏.第三軍醫(yī)大學(xué) 2008
碩士論文
[1]云斑天牛Minus-C OBPs與配基的結(jié)合與釋放機(jī)制[D]. 鄭志川.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]松褐天牛氣味結(jié)合蛋白基因克隆與分析[D]. 李娜.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]中黑盲蝽嗅覺相關(guān)蛋白鑒定及非典型嗅覺受體基因分析[D]. 崔歡歡.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[4]基于觸角轉(zhuǎn)錄組的麥長(zhǎng)管蚜OBPs和CSPs基因鑒定及表達(dá)譜研究[D]. 薛文鑫.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2016
[5]金銀花農(nóng)藥殘留狀況與膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)研究[D]. 顧炎.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2016
[6]松褐天牛氣味結(jié)合蛋白基因的克隆與功能分析[D]. 王娟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[7]噻蟲嗪對(duì)金銀花藥材質(zhì)量安全性評(píng)價(jià)研究[D]. 劉亞南.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2015
[8]金銀花中兩種除蟲菊酯類農(nóng)藥的殘留動(dòng)態(tài)研究[D]. 劉璐.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2015
[9]黃曲條跳甲化學(xué)感受基因的鑒定與表達(dá)分析[D]. 王正兵.仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院 2015
[10]云斑天牛性信息素分離鑒定及氣味結(jié)合蛋白結(jié)合特性分析[D]. 潘翔宇.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
本文編號(hào):3644657
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