目的分離鑒定兒童糞便中四環(huán)素耐藥菌,了解四環(huán)素耐藥基因的分布與特點(diǎn)。方法使用多種四環(huán)素選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)兒童糞便,分離四環(huán)素耐藥菌株;采用16S rRNA基因PCR擴(kuò)增技術(shù)鑒定細(xì)菌;K-B紙片擴(kuò)散法和瓊脂稀釋法進(jìn)行四環(huán)素藥敏試驗;PCR技術(shù)檢測細(xì)菌攜帶tet（A）、tet（B）、tet（G）、tet（L）、tet（M）、tet（O）、tet（Q）、tet（W） 8種四環(huán)素耐藥基因的情況。結(jié)果采用四環(huán)素選擇性培養(yǎng)基共分離、鑒定了184株細(xì)菌;藥敏試驗結(jié)果顯示172株細(xì)菌為耐藥菌,12株為敏感菌;184株細(xì)菌中耐藥基因總檢出率為83.2%,敏感菌均未檢測到任何耐藥基因;大腸桿菌主要攜帶tet（A）和tet（B）,腸球菌全部攜帶tet（M）,雙歧桿菌和產(chǎn)氣柯林斯菌全部檢測到tet（W）;攜帶tet（B）基因的大腸桿菌藥敏抑菌圈明顯小于攜帶tet（A）基因的大腸桿菌（P<0.05）。結(jié)論四環(huán)素耐藥菌和耐藥基因廣泛存在于檢測兒童糞便樣本中,并呈現(xiàn)個體差異;腸道菌耐藥與攜帶耐藥基因有關(guān),且耐藥基因的種類具有種屬特異性;大腸桿菌攜帶不同耐藥基因可呈現(xiàn)出不同耐藥強(qiáng)度。 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,43(04)

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

部分菌株革蘭氏染色結(jié)果(倍數(shù)10 ×100)

所有細(xì)菌均進(jìn)行TC藥敏試驗,部分TC藥敏結(jié)果如圖2。由藥敏試驗結(jié)果(見表5)可知,184株細(xì)菌表型耐藥率為93.5%,表型敏感率為6.5%,無中介率。大腸桿菌耐藥率為91.8%,腸球菌、雙歧桿菌、產(chǎn)氣科特斯菌、遲緩埃格特菌耐藥率均為100%。9株敏感大腸桿菌均來Z-1樣本,另外3株敏感菌來自Z-3和Z-4。全部細(xì)菌藥敏試驗統(tǒng)計結(jié)果見表5。表5 184株細(xì)菌四環(huán)素藥敏試驗結(jié)果 樣本 細(xì)菌 數(shù)量 耐藥 中介 敏感 Z-1 大腸桿菌 32 23 0 9 希拉腸球菌 19 19 0 0 屎腸球菌 6 6 0 0 溶酪大球菌 1 1 0 0 產(chǎn)氣柯林斯菌 4 4 0 0 吉氏擬桿菌 1 1 0 0 Z-2 大腸桿菌 18 18 0 0 屎腸球菌 18 18 0 0 青春雙歧桿菌 4 4 0 0 Z-3 大腸桿菌 28 28 0 0 屎腸球菌 1 1 0 0 希拉腸球菌 1 1 0 0 魯氏不動桿菌 1 1 0 0 西伯利亞庫特氏菌 1 0 0 1 假小鏈雙歧桿菌 3 3 0 0 長雙歧桿菌 5 5 0 0 Z-4 大腸桿菌 20 20 0 0 鳥腸球菌 11 11 0 0 酪黃腸球菌 1 1 0 0 科氏葡萄球菌科氏亞種 1 0 0 1 糞嗜冷桿菌 1 1 0 0 吉氏庫特氏菌 1 0 0 1 產(chǎn)氨棒桿菌 1 1 0 0 表皮短桿菌 1 1 0 0 遲緩埃格特菌 4 4 0 0 總數(shù) 184 172 0 12

根據(jù)PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果判斷是否擴(kuò)增出目標(biāo)耐藥基因,部分菌株耐藥基因PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果見圖3。如表6、7所示,184株細(xì)菌中耐藥基因總檢出率為83.2%,12株TC敏感菌未檢出任何耐藥菌基因;其中tet(B)、tet(M)、tet(Q)、tet(W)、tet(A)檢出率分別為18.5%、32.1%、0.5%、8.7%、23.4%,未檢出耐藥基因比例為16.8%;172株耐藥菌中耐藥基因檢出率為89.0%,其中大腸桿菌主要檢測出tet(A)和tet(B),腸球菌全部檢測到tet(M),雙歧桿菌全部檢測到tet(W),產(chǎn)氣柯林斯菌全部檢出tet(W),19株耐藥菌(11.0%)未檢測到上述8種基因;所有細(xì)菌均未檢測到2種以上的耐藥基因,無細(xì)菌擴(kuò)增出tet(G)、tet(L)、tet(O)。表6 四環(huán)素敏感菌耐藥基因PCR擴(kuò)增結(jié)果 樣本 細(xì)菌(數(shù)量) tet(B) tet(M) tet(Q) tet(W) tet(A) tet(G) tet(L) tet(O) Z-1 大腸桿菌(9) 0 0 0 0 0 0 0 0 Z-2 無 0 0 0 0 0 0 0 0 Z-3 西伯利亞庫特氏菌(1) 0 0 0 0 0 0 0 0 Z-4 科氏葡萄球菌科氏亞種(1) 0 0 0 0 0 0 0 0 吉氏庫特氏菌(1) 0 0 0 0 0 0 0 0 總數(shù) 12 0 0 0 0 0 0 0 0

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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