利用Cre/loxp系統(tǒng)位點(diǎn)專一性重組的特點(diǎn)構(gòu)建誘導(dǎo)表達(dá)的定位重組系統(tǒng),特異性地敲除轉(zhuǎn)基因植物的選擇標(biāo)記基因。通過多重酶切、連接及測序后成功構(gòu)建植物表達(dá)載體p BI121-Cre-GUS。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤法將此目標(biāo)基因轉(zhuǎn)入平邑甜茶中,通過抗性篩選和PCR鑒定獲得轉(zhuǎn)基因陽性植株。對陽性植株進(jìn)行熱激誘導(dǎo)后通過PCR及GUS染色進(jìn)行檢測轉(zhuǎn)基因植株的刪除效果,最終獲得了無選擇標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)基因蘋果植株。 

【文章來源】：園藝學(xué)報. 2016,43(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：13 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 p BI121-Cre-GUS載體構(gòu)建
    1.3 煙草及平邑甜茶的轉(zhuǎn)化
    1.4 p BI121-Cre-GUS轉(zhuǎn)基因植株的GUS染色
    1.5 p BI121-Cre-GUS轉(zhuǎn)基因植株的熱激處理及分子檢測
2 結(jié)果與分析
    2.1 無標(biāo)記基因植物表達(dá)載體的獲得
    2.2 p BI121-Cre-GUS轉(zhuǎn)基因植株的獲得
    2.3 轉(zhuǎn)基因煙草植株的GUS檢測及分子鑒定
    2.4 轉(zhuǎn)基因平邑甜茶植株的GUS染色及分子檢測
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3623335