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Cre/loxp系統(tǒng)的構建及無選擇標記轉基因蘋果植株的獲得

發(fā)布時間:2022-02-13 14:08
  利用Cre/loxp系統(tǒng)位點專一性重組的特點構建誘導表達的定位重組系統(tǒng),特異性地敲除轉基因植物的選擇標記基因。通過多重酶切、連接及測序后成功構建植物表達載體p BI121-Cre-GUS。利用農桿菌介導的葉盤法將此目標基因轉入平邑甜茶中,通過抗性篩選和PCR鑒定獲得轉基因陽性植株。對陽性植株進行熱激誘導后通過PCR及GUS染色進行檢測轉基因植株的刪除效果,最終獲得了無選擇標記基因的轉基因蘋果植株。 

【文章來源】:園藝學報. 2016,43(02)北大核心CSCD

【文章頁數】:13 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料與試劑
    1.2 p BI121-Cre-GUS載體構建
    1.3 煙草及平邑甜茶的轉化
    1.4 p BI121-Cre-GUS轉基因植株的GUS染色
    1.5 p BI121-Cre-GUS轉基因植株的熱激處理及分子檢測
2 結果與分析
    2.1 無標記基因植物表達載體的獲得
    2.2 p BI121-Cre-GUS轉基因植株的獲得
    2.3 轉基因煙草植株的GUS檢測及分子鑒定
    2.4 轉基因平邑甜茶植株的GUS染色及分子檢測
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
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[4]ipt基因促進矮牽牛遺傳轉化效率及熱激啟動子驅動基因刪除[J]. 李巖,趙德剛.  基因組學與應用生物學. 2011(02)
[5]轉基因生物的安全性[J]. 施巧婷,魏成斌,李建林,藺萍,徐照學.  中國農學通報. 2009(22)
[6]無選擇標記技術與轉基因植物食品安全性[J]. 雷桅,劉昕.  中國食品學報. 2009(05)
[7]無抗性標記基因轉基因植物研究進展[J]. 張余洋,歐陽波,葉志彪.  農業(yè)生物技術學報. 2004(05)
[8]Cre-lox重組系統(tǒng)介導轉基因煙草中外源基因刪除的研究[J]. 甄偉,汪陽明,丁偉,陳溪,胡鳶雷,林忠平.  北京大學學報(自然科學版). 2001(04)



本文編號:3623335

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