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甲基磺酸乙酯誘變加工番茄耐鹽突變體耐鹽基因的克隆及載體構(gòu)建

發(fā)布時間:2022-02-09 23:04
  世界上約20%的可耕種面積受到土壤鹽漬化和干旱脅迫的影響,這兩種脅迫是作物減產(chǎn)主要的非生物脅迫因素。而新疆鹽堿地面積是我國分布最廣、土壤積鹽最重的地區(qū),占全國鹽堿土地面積的22.0%。加工番茄是新疆重要的經(jīng)濟(jì)作物之一,為緩解土壤鹽堿化對番茄生長發(fā)育的影響,除土壤改良外,通過提高加工番茄自身的耐鹽性,來緩解鹽脅迫對加工番茄生長的影響,是最為經(jīng)濟(jì)有效的途徑。因此,本試驗(yàn)利用甲基磺酸乙酯(EMS)誘變加工番茄“JW9”材料來創(chuàng)造突變體,并以耐鹽性為選擇目標(biāo),篩選出耐鹽突變體。利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)分析耐鹽基因并進(jìn)行克隆和表達(dá)載體的構(gòu)建,以期利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)化擬南芥驗(yàn)證后獲得新的耐鹽材料。研究結(jié)果如下:1、大田種植觀察變異類型:以EMS半致死濃度(3.0%)誘變處理1500粒加工番茄種子10 h后單粒播種于穴盤,以清水處理140粒加工番茄種子10 h作為對照。在苗期,EMS處理材料共存活725株,對照全部存活,果實(shí)成熟后進(jìn)行單株留種,處理組共存活并收種592株,對照組幾乎全部存活。通過田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)一些主要的變異類型,如植株高大、植株矮小、莖不分枝、植株不開花、莖分枝多、雄性不育、無生長點(diǎn)、晚熟、莖... 

【文章來源】:石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū)211工程院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

甲基磺酸乙酯誘變加工番茄耐鹽突變體耐鹽基因的克隆及載體構(gòu)建


%EMS處理對番茄種子發(fā)芽指標(biāo)的影響

變異類型,植株


植株晚熟 23 1.53雄性不育 3 0.20無生長點(diǎn) 5 0.33植株變異總數(shù) 46 3.07 34.59總變異數(shù) 133 8.87 100.002.2.2 器官變異類型(1)葉器官變異類型植株主要的光合作用都來源于葉片,葉片占全植株的大部分面積,因此在受到誘變時也容易變異。如圖 2-3 所示,圖 A 中左邊大葉片明顯比右邊正常植株葉片面積大,而大葉片植株本身也比其他對照植株健壯,而結(jié)果多;圖 B 中幼苗葉片自然向內(nèi)卷曲,且葉片不正常長出;圖 C 中,兩片子葉中一片細(xì)長,另一片短小,但在后期能夠正常生長;圖 D 中下邊植株葉片與上邊植株葉片相比,明顯葉片顏色較淺,且變異植株果實(shí)表現(xiàn)為晚熟,結(jié)果少;圖 E 中兩片子葉成“V”型生長,但中間無生長點(diǎn),在后期植株自然死亡。有圖可以看出,葉片的變異出現(xiàn)在子葉期、幼苗期和植株成熟期,在植株整個生育期均有發(fā)生,說明 EMS 誘變作用會在植株整個生育期持續(xù)發(fā)生。

植株,花粉敗育,果實(shí),雄蕊


甲基磺酸乙酯誘變加工番茄耐鹽突變體耐鹽基因的克隆及載體構(gòu)建(2)莖、花、果實(shí)以及植株的突變類型如下圖所示雄蕊缺失:在圖 2-4(A)中,左邊為正;,右邊為缺失雄蕊的花,在田間觀察發(fā)現(xiàn)該植株在開花后并未結(jié)果,經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn),該植株的所有花朵只有雌蕊而沒有雄蕊,需要人工授粉才能結(jié)果;花粉敗育:圖 2-4(B)該植株開花后不久,全株大部分花朵凋零發(fā)黃,鏡檢發(fā)現(xiàn)其花粉敗育;莖不分枝:圖 2-4(C)田間觀察發(fā)現(xiàn)有 5 株番茄只有主干,沒有分枝,其他植株均有分枝;莖變粗:圖 2-4(D)與其他植株相比發(fā)現(xiàn),有 3 株的莖明顯比其他植株粗,且葉片較多且肥大,分枝也增多;分枝增多:圖 2-4(E)對照組番茄和其他正常植株分枝數(shù)一般在 4 至 8 個分枝,而該變異株可達(dá)到 8-10 個甚至 10 個以上的分枝;乳狀凸起:圖 2-4(F)6 株植株在果實(shí)幼果期就出現(xiàn)了凸起,這在之后的生長中凸起會隨果實(shí)膨大逐漸長大,影響果實(shí)外觀;果實(shí)頂部開裂:圖 2-4(G)有 13 株果實(shí)在生長過程中,果皮不能聚合出現(xiàn)裂口,造成果實(shí)開裂,使果肉外漏;植株高大:圖 2-4(H)對照組植株基本具有相同高度(40-60 cm),但誘變后代有 4 株植株較為高大健壯(80-90cm),且結(jié)果量也較多;植株矮。簣D 2-4(I)有 11 株較為矮小瘦弱,果實(shí)極少且晚熟,有的甚至不結(jié)果。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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[7]60Co-γ射線輻射對西瓜生長發(fā)育的影響[D]. 李玉明.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[8]擬南芥向水性突變體的篩選及其機(jī)理研究[D]. 黃夢靜.揚(yáng)州大學(xué) 2013
[9]轉(zhuǎn)StBADH基因T1代番茄植株的耐鹽性鑒定[D]. 殷武平.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[10]棉花SSCP標(biāo)記的開發(fā)及產(chǎn)量和纖維品質(zhì)性狀的QTL定位[D]. 李帥陽.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012



本文編號:3617798

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