[研究目的]乙型肝炎病毒（HBV）感染是人類肝細(xì)胞癌（HCC）發(fā)展的主要危險(xiǎn)因素之一。在85%的HBV相關(guān)的HCC中都可以觀察到HBV的DNA整合到基因組中。雖然大多數(shù)HBV基因在HCC組織中不表達(dá),但在大多數(shù)HBV相關(guān)的HCC組織中檢測(cè)到HBV-X（HBx）蛋白,表明HBx蛋白在HBV相關(guān)HCC的發(fā)展中起重要作用。HBx蛋白是一種多功能調(diào)節(jié)因子,與肝細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)。然而,HBx蛋白致癌作用的分子機(jī)制仍未完全了解。本研究的目的是尋找與HBx調(diào)節(jié)肝癌發(fā)病相關(guān)的基因并確定其在肝癌發(fā)病機(jī)制中的臨床意義,同時(shí)對(duì)干擾素IFN-α2b治療乙型肝炎或HCC的機(jī)理進(jìn)行研究,探討IFN-α2b是否是通過(guò)抑制了 HBx相關(guān)基因的表達(dá)來(lái)對(duì)疾病進(jìn)行治療。[實(shí)驗(yàn)方法]1.HBx高表達(dá)細(xì)胞系的建立將攜帶HBx基因的慢病毒轉(zhuǎn)入肝癌細(xì)胞系BEL7404使其高表達(dá),并對(duì)其細(xì)胞功能變化進(jìn)行驗(yàn)證,如體外增殖速度變化,體內(nèi)成瘤速度變化,炎性因子釋放量變化。2.HBx表達(dá)與S100A4蛋白表達(dá)水平關(guān)系驗(yàn)證使用基因轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)來(lái)分析高表達(dá)組與陰性對(duì)照組細(xì)胞差異表達(dá)基因。通過(guò)蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證差異基因表達(dá)蛋白水平。將在... 

【文章來(lái)源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：119 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＨＢＶ病毒感染后疾病進(jìn)展情況??ＨＢＶ的長(zhǎng)度為３．２ｋｂ，是嗜肝ＤＮＡ病毒家族中的一員，屬于？種部分雙鏈的環(huán)狀ＤＮＡ??

緩解?穩(wěn)定?代償肝硬化??死亡??，慢性攜帶，進(jìn)展＾失代償肝硬化??３０?－?５０?年??圖１－１?ＨＢＶ病毒感染后疾病進(jìn)展情況??ＨＢＶ的長(zhǎng)度為３．２ｋｂ，是嗜肝ＤＮＡ病毒家族中的一員，屬于？種部分雙鏈的環(huán)狀ＤＮＡ??病毒。與其他嗜肝ＤＮＡ病毒一樣，小基因組表現(xiàn)出很高的信息密度。病毒圖譜見(jiàn)圖１－２［２］。??ＨＢＶ編碼四個(gè)重疊的開(kāi)放閱讀框（ｏｐｅｎ?ｒｅａｄｉｎｇ?ｆｒａｍｅｓ，?ＯＲＦｓ），即Ｓ區(qū)、Ｐ區(qū)、Ｃ區(qū)、Ｘ??區(qū)。編碼７種蛋白。??觀、??ｐｒｅＳ２??圖１－２?ＨＢＶ病毒基因圖譜??１１??

Ｖ增強(qiáng)子、第二第三激活子和原癌基因（ｃ－Ｊｕｎ、ｃ－Ｆｏｓ、ｃ－Ｍｙｃ）。??ＨＢｘ對(duì)轉(zhuǎn)錄因子也表現(xiàn)出激活活性，而且可以激活ＮＦ－ｋＢ等多種信號(hào)通路。ＨＢｘ功能見(jiàn)??圖?１－３。??４１＂?＂＂＂＂?Ｚ?ｃｃｃＤＮＡ??ＮＦ－ｕ，?．Ｋｌｔ?ｇ?削故??ＲＴｆ?＾?抑?Ｍ??，ＮＦ－＾?ｃＳｒｃ?Ｌ＾ｌ＿??ＡＰ－！?—■雙］??｜１?丄??轉(zhuǎn)細(xì)＜激話?麵傳改變６?Ｈｆｉ？?酬亡１??遑傳小穩(wěn)定?????ＨＣＣ發(fā)生發(fā)?Ｗ?ＨＢＶＷｒｌｔｔｔＭ??圖１－３?ＨＢｘ基因功能簡(jiǎn)圖??相比于只患有有肝炎的患者，大多數(shù)ＨＢＶ相關(guān)的ＨＣＣ組織中檢測(cè)到ＨＢＶ編碼的Ｘ蛋??白（ｈｅｐａｔｉｔｉｓ?Ｂ?ｖｉｒｕｓ－ｅｎｃｏｄｅｄ?Ｘ?ｐｒｏｔｅｉｎ，ＨＢｘ），表明?ＨＢｘ?蛋白在?ＨＢＶ?相關(guān)?ＨＣＣ?的發(fā)展中??起重要作用。ＨＢｘ是一種１５４個(gè)氨基酸的多功能調(diào)節(jié)蛋白，分子量約為１７?ｋＤａ［１２－１３］。它??是不同ＨＢＶ亞型中最保守的蛋白質(zhì)之一，幾乎存在于所有嗜肝ＤＮＡ病毒科的病毒中，主??要位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。其通過(guò)與宿主因子庫(kù)的直接或間接相互作用調(diào)節(jié)多種生物學(xué)過(guò)程，從而最??終產(chǎn)生ＨＣＣ。ＨＢｘ可以調(diào)節(jié)多種細(xì)胞過(guò)程，如氧化應(yīng)激、ＤＮＡ修復(fù)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄、蛋??白質(zhì)降解、細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞凋亡［１４－１５］。許多報(bào)道表明ＨＢｘ是最常見(jiàn)的病毒ＯＲＦ之一，??通常整合到宿主基因組中，其序列的表達(dá)在ＨＣＣ中起關(guān)鍵作用。通過(guò)突變或缺失分析，顯??示ＨＢｘ的羧基末端可能在蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用、轉(zhuǎn)錄反式激活、ＤＮＡ修復(fù)、細(xì)胞信號(hào)??傳導(dǎo)和ＨＣＣ的發(fā)病機(jī)理中起到至關(guān)重要的作用［１６］。??ＨＢｘ基因通常包含在ＨＢ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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