有害赤潮及其引發(fā)的麻痹性貝類毒素（PSP）是全球性生態(tài)災(zāi)害及重大環(huán)境問題。典型赤潮甲藻微小亞歷山大藻引發(fā)赤潮在我國東海海域發(fā)生頻繁,并可產(chǎn)生麻痹性貝毒（PSP）在內(nèi)的多種赤潮毒素。嚴(yán)重影響海產(chǎn)品安全,人誤食了污染了 PSP的海產(chǎn)品會(huì)引發(fā)人體中毒甚至死亡。然而,PSP來源問題尚未明確是由其共生菌產(chǎn)生還是其宿主藻類產(chǎn)生。因此,只有對PSP來源和產(chǎn)生機(jī)制深入研究,才能實(shí)現(xiàn)對PSP的科學(xué)防控。藻菌關(guān)系為揭示藻共生菌在PSP的產(chǎn)生過程中發(fā)揮何種作用以及揭示PSP產(chǎn)生機(jī)制奠定了基礎(chǔ),而目前對此尚缺乏系統(tǒng)性研究。因甲藻基因組龐大,全基因組測序工作難以開展,而藻共生菌相比于產(chǎn)毒甲藻更易于培養(yǎng),且基因組小的特性。因此從自產(chǎn)毒菌株角度研究PSP的來源和合成機(jī)制更易取得實(shí)質(zhì)性突破。本文通過免培養(yǎng)的高通量測序方法首次解析了產(chǎn)PSP典型赤潮甲藻微小亞歷山大藻（Alexandrium minutum,amtk-4）共生菌群的種類及相對豐度;借助微生物純培養(yǎng)方法分離獲得可培養(yǎng)共生菌株5株;通過微生物多相分類學(xué)方法對新種Z1-D進(jìn)行了細(xì)菌分類學(xué)鑒定;基于全基因組功能基因比對及蛋白結(jié)構(gòu)模擬,對其可培養(yǎng)菌株Z1-D PS... 

【文章來源】：哈爾濱商業(yè)大學(xué)黑龍江省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２?ＰＳＰ來源的３種假說??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｔｈｒｅｅ?ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ?ｏｆ?ＰＳＰ?ｏｒｉｇｉｎ??１．１．６?ＰＳＰ的合成機(jī)制??－－

?（Ａｌｐｈａｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ?）和芽孢桿菌綱（Ｂａｃｉｌｌｉ）占絕對優(yōu)勢，比例分別為４７．１?％和??３６．９％。０－變形菌綱（Ｂｅｔａｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）?４．６％、ｙ－變形菌綱（Ｇａｍｍａｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）??３．９％、纖維粘網(wǎng)菌綱（Ｃｙｔｏｐｈａｇｉａ）?２．８％、浮霉菌綱（Ｐｈｙｃｉｓｐｈａｅｒａｅ）?１．４％、黃桿菌綱??（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉｉａ）?１．３％和放線菌綱（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）?１．１％則比例較低。??屬水平（見圖２－３）共包含２８個(gè)屬，其中優(yōu)勢屬（＞?５％）為乳球菌屬??（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ?），溝鞭藻玫瑰桿菌屬（Ｚ）／仙），玫瑰桿菌屬??廂廠心），芽孢桿菌屬（５ｇｃｚ７／ｗｓ）及紅細(xì)菌科未鑒定屬??ｕｎｃｌａｓｓｆｉｅｄ），所占比例分別為２５．５％、１９．８％、８．６％、６．２％及６．１％。高通量測序樣品??ａｍｔｋ４中共生細(xì)菌未能確定的屬（種）比例高達(dá)５９．７％，表明微小亞歷山大藻（ａｍｔｋ－??４）具有發(fā)現(xiàn)特殊生境共生菌新屬（種）的巨大潛力。??１０??Ｓ?＃??％?Ｉ?＾?才??／?Ｉ?Ｉ?＼??馨Ｉ?１??Ｉ??圖２－２基于ＯＴＵ的微小亞歷山大藻（ａｍｔｋ－４）共生菌群系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹??Ｆｉｇ．２－２?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ?ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?Ａｌｅｘａｎｄｒｉｕｍ?ｍｉｎｕｔｕｍ?（ａｍｔｋ－４）??ｂａｓｅｄ?ｏｎ?ＯＵＴ??－１５－??

ｃｔｅｒ５／〇＾＾?ａ?Ｓｏｌｉｂａｃｉｌｌｕｓ?２％??■?Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅ??Ｕｎｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ?６％?—???？＂Ａ?Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ?２％??ｍ?Ｂａｃｉｌｌｕｓ???Ｗ?ｍｋ＾＾￣ｍＳＭ１Ａ〇２１％??〇ｃｅａｎｉｃａｕｉｉｓ?ｉ〇／〇??＿?／？ｏｓｅｏｖａｎ’ｌｌ?、?Ｈｅｎｒｉｃｉｅｌｌａ?１％??■?Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ?１％??■?Ｄｉｎｏｒｏｓｅｏｂａｃｔｅｒ?２０°／＾??＼＿?Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ?２５％??圖２－３微小亞歷山大藻（ａｍｔｋ－４）共生菌群的屬水平分布圖??Ｆｉｇ．２－３?Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ?ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ?ａｔ?ｇｅｎｕｓ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｙｍｂｉｏｔｉｃ?ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ?ｏｉ?Ａｌｅｘａｎｄｒｉｕｍ??ｍｉｎｕｔｕｍ｛？ｉｍＸｋ－Ａ）??２．３．２可培養(yǎng)菌株１６Ｓ?ｒＲＮＡ系統(tǒng)發(fā)育分析??從微小亞歷山大藻（ａｍｔｋ４）培養(yǎng)物中分離獲得可培養(yǎng)共生菌５株。其１６ＳｒＲＮＡ序??列與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫同源性比對結(jié)果顯示其分別屬深海桿狀菌屬??ｓｐ．）、鼠尾菌屬（Ｍｉ／ｒ／ｃａｗＡ？?ｓｐ．）、根瘤菌屬謂ｓｐ．）、亞硫酸桿菌屬??ｓｐ．）及微桿菌屬（Ｍｃ＜９心ｃＭｒ／麵ｓｐ．）?５個(gè)屬，其中菌株Ｚ１－Ｄ及Ｚ１－４??與己有模式菌株１６Ｓ?ｒＲＮＡ基因特異性最高值分別為９７．８％及９７．３％，其１６Ｓ?ｒＲＮＡ基因??的鄰接法（Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－Ｊｏｉｎｉｎｇ）系統(tǒng)發(fā)育樹見圖４，鑒定其分別為亞硫酸桿菌屬??（５Ｗｇ／＾ｏ／？ａｃ＾ｒｓｐ．）及根瘤菌屬（Ａｆｅｓ＾ｒ／ｚ／ｚｃ？６／＿ｓｐ．）新種。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]東海產(chǎn)麻痹性貝毒鏈狀亞歷山大藻共附生菌群多樣性研究[J]. 唐瑩瑩,喬玉寶,蔣志偉,張靜,張若男,田曉清,馬麗艷,張曉玲,陸亞男,樊成奇,楊橋.  海洋漁業(yè). 2018(06)
[2]微小亞歷山大藻（Alexandrium minutum）的氮磷吸收、生長、產(chǎn)毒動(dòng)態(tài)變化[J]. 俞群娣,王亞軍,余新威,劉寅政,李葉,方力,陳成吉,羅紅宇.  海洋與湖沼. 2018(02)
[3]貝類生物毒素研究進(jìn)展[J]. 阮雯,紀(jì)煒煒,岳冬冬,方海,劉勤,王魯軍,王蕓,張曉峰,陸亞男.  漁業(yè)信息與戰(zhàn)略. 2017(04)
[4]高通量測序在醬香白酒微生態(tài)多樣性研究中的應(yīng)用[J]. 郭敏,黃永光,邱樹毅,胡建峰,胡峰,鐘方達(dá).  中國釀造. 2017(05)
[5]海水赤潮的危害及防治對策[J]. 張曉冉,龐雨寧.  河北漁業(yè). 2017(04)
[6]納米山藥多糖合生元結(jié)腸靶向微生態(tài)調(diào)節(jié)劑對大鼠腸道菌群的影響[J]. 孟德欣,于蓮,李雪欣,蘇瑾,馬淑霞,張濤,許月明.  中國新藥雜志. 2016(23)
[7]休眠孢囊作為甲藻有害藻華年際頻發(fā)和地理擴(kuò)散一種關(guān)鍵機(jī)制的研究進(jìn)展[J]. 唐贏中,胡章喜,鄧蘊(yùn)彥.  海洋科學(xué)集刊. 2016(00)
[8]我國近海有毒藻和藻毒素的研究現(xiàn)狀與展望[J]. 于仁成,羅璇.  海洋科學(xué)集刊. 2016(00)
[9]產(chǎn)麻痹性貝毒塔瑪亞歷山大藻共培養(yǎng)菌群的物種多樣性研究[J]. 劉巧紅,苑麗東,田曉清,馬麗艷,周宏農(nóng),樊成奇,楊憲時(shí),楊橋,張曉玲.  海洋漁業(yè). 2016(06)
[10]擬南芥轉(zhuǎn)酮醇酶蛋白AtTKL1的同源建模及與α-三聯(lián)噻吩結(jié)合作用分析[J]. 趙斌,霍靜倩,邢繼紅,齊萌,張金林,董金皋.  高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報(bào). 2015(04)

博士論文
[1]基于腸道菌群、代謝組學(xué)分析研究異常黑膽質(zhì)型哮喘維西醫(yī)結(jié)合治療的臨床療效及其作用機(jī)理[D]. 瑪麗葉古·阿吾提.新疆醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號：3603565