水稻稻曲病是由稻曲菌（Ustilaginoidea virens）侵染引起的水稻穗部病害,研究其致病機(jī)理對(duì)研究植物與病原物的互作機(jī)制和尋求新的化學(xué)防治靶標(biāo)具有重要意義。本研究對(duì)稻曲菌UvustA、UvPmk1和UvCDC2基因進(jìn)行了功能分析,主要研究結(jié)果如下:1.為了驗(yàn)證UvustA是否參與稻曲菌素A合成,對(duì)UvustA基因進(jìn)行了敲除和互補(bǔ),研究結(jié)果表明敲除和互補(bǔ)轉(zhuǎn)化子在菌落生長(zhǎng)速度、產(chǎn)孢量和對(duì)水稻晚秈98的致病力上與野生型菌株均無(wú)顯著差異。采用LC-MS對(duì)野生型菌株、敲除突變體和去除UvustA信號(hào)肽的突變體侵染水稻形成稻曲球中的稻曲菌素A進(jìn)行定性分析,檢測(cè)結(jié)果表明在野生型菌株接種形成的稻曲球中存在稻曲菌素A,而在敲除突變體以及去除UvustA信號(hào)肽的突變體接種形成的稻曲球中均未檢測(cè)到稻曲菌素A的存在;通過信號(hào)肽預(yù)測(cè)、融合蛋白表達(dá)定位及western bloting分析發(fā)現(xiàn),UvustA為分泌蛋白,可以分泌到胞外,推測(cè)基因UvustA參與稻曲菌素A的形成,但與稻曲球形成無(wú)關(guān)。2.對(duì)UvPmk1基因的功能分析結(jié)果表明,UvPmk1基因的缺失導(dǎo)致稻曲菌產(chǎn)孢量明顯下降,對(duì)滲透脅迫、細(xì)胞壁完... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

稻曲病菌侵染循環(huán)主要階段（Zhangetal.,2014）

vPdeH 與稻曲菌產(chǎn)孢，致病相關(guān)（Guo et al.，2019）。Liang 等利用 CRISPR-C術(shù)成功高效的獲得了 USTA 和 UvSTL2 突變體（Liang et al., 2018）。Li 等 UvPKS1 負(fù)責(zé)稻曲菌中黑粉菌素的生物合成（Li et al., 2019）。此外，Sun道了稻曲菌的基因組序列并預(yù)測(cè)了可能的效應(yīng)子（Sun et al., 2013）。Fang發(fā)現(xiàn)效應(yīng)子 SCRE2 抑制植物免疫并調(diào)節(jié)對(duì)水稻的毒力（Fang et al.，2019）力的推進(jìn)了稻曲菌分子遺傳水平上的研究。 稻曲菌素的研究進(jìn)展.1 稻曲菌素的類型稻曲球中含有多種次生代謝物，目前研究較多的有稻曲菌素（ustiloxins）粉菌素（ustilaginoidins），兩者均是從水稻稻曲球中分離鑒定出來(lái)的 (Lu et 014; Zhou et al., 2012）。稻曲菌素屬于具有醚鍵的 13 元環(huán)核心結(jié)構(gòu)的環(huán)肽。鑒定出的稻曲菌素有 6 種，分別為稻曲菌素 A，B，C，D，F(xiàn) 和 G（圖 1-2）

華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019 屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文2 結(jié)果與分析2.1 UvustA 基因序列分析及系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建根據(jù) Tsukui 等人預(yù)測(cè)的稻曲菌素合成基因簇，我們針對(duì)其中一個(gè)編碼前體蛋白的基因 UvustA 進(jìn)行研究。PCR 擴(kuò)增及基因組數(shù)據(jù)庫(kù)顯示稻曲菌 UvustA 基因全長(zhǎng) 457bp，包含 1 個(gè)外顯子，編碼 134aa 的蛋白（圖 2-3 A）。含有兩個(gè) RPT1結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)進(jìn)化分析表明，UvustA 基因編碼的蛋白與青霉（Penicillium freii），黃曲霉（Aspergillus flavus），曲霉（Aspergillus oryzae）和黑曲霉（Aspergillus niger）的蛋白聚為一簇，而與黃色鐮刀菌（Fusarium culmorum）的 ustB 進(jìn)化關(guān)系較遠(yuǎn)（圖 2-3 B）。A

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[3]希金斯刺盤孢致病缺陷型突變體的篩選及其T-DNA插入基因的功能分析[D]. 劉麗萍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013

碩士論文
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