發(fā)布時(shí)間：2022-01-06 00:54

　　目的探究沉默MDA-MB-231細(xì)胞的CPNE1、FUNDC2、KCTD14、Vimentin基因及研究其對(duì)增殖能力的影響,初步為在三陰性乳腺癌的防治中提供理論基礎(chǔ)。方法1.先針對(duì)20個(gè)待檢基因設(shè)計(jì)3個(gè)RNA沉默靶點(diǎn),并將攜帶不同靶點(diǎn)的3個(gè)質(zhì)粒等比例混合及單獨(dú)進(jìn)行慢病毒包裝,通過(guò)慢病毒包裝載體感染MDA-MB-231細(xì)胞,再通過(guò)Celigo對(duì)細(xì)胞實(shí)現(xiàn)拍照和自動(dòng)計(jì)數(shù),比較沉默目的基因?qū)DA-MB-231細(xì)胞增殖的影響,初步篩選出增殖抑制表型明顯的基因。2.通過(guò)qRT-PCR驗(yàn)證CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM基因被沉默后mRNA的表達(dá)水平情況。3.通過(guò)MTS實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM基因被沉默后對(duì)細(xì)胞短期增殖能力的影響。4.通過(guò)平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM基因被沉默后對(duì)細(xì)胞長(zhǎng)期增殖能力的影響。結(jié)果1.高內(nèi)涵篩選結(jié)果顯示:在20個(gè)待檢基因中,增殖抑制表型明顯的基因?yàn)镃PNE1、VIM、KCTD14、FUNDC2。2.qRT-PCR檢測(cè)顯示:沉默CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM實(shí)驗(yàn)組mRNA的表達(dá)... 

【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

沉默MDA-MB-231細(xì)胞CPNE1、FUNDC2、KCTD14、VIM基因后可抑制MDA-

19圖 4.4 慢病毒感染 MDA-MB-231 細(xì)胞，檢測(cè)沉默目的基因?qū)?xì)胞長(zhǎng)期增殖能力的影響注：A：細(xì)胞克隆數(shù)拍照?qǐng)D片 ；B:細(xì)胞克隆數(shù)對(duì)應(yīng)的柱狀圖， 各實(shí)驗(yàn)組與 NC 組比較 ***P<0.001，t 檢驗(yàn)，各組同時(shí)各重復(fù) 3 次。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]沉默F(xiàn)BI-1基因?qū)θ幮匀橄侔┘?xì)胞MDA-MB-231增殖和凋亡的影響[J]. 陳茂劍,王麗,楊偉萍,覃慶洪,譚啟杏,練斌,韋長(zhǎng)元.  生理學(xué)報(bào). 2018(05)
[2]波形蛋白在原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J]. 成超,李海洋,葉朝陽(yáng),李國(guó)煒.  重慶醫(yī)學(xué). 2017(33)
[3]乳腺癌在中國(guó)的流行狀況和疾病特征[J]. 柏尚柱.  世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2017(41)

博士論文
[1]CPNE1促進(jìn)人肺腺癌細(xì)胞增殖遷移的作用及機(jī)制研究[D]. 劉順林.蘇州大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3571386