播散型卡介苗感染疾病是一種罕見(jiàn)的先天性免疫缺陷疾病,患者對(duì)卡介苗（BCG）、非結(jié)核分枝桿菌（NTM）等弱致病分枝桿菌易感。本文對(duì)三個(gè)中國(guó)播散型卡介苗感染疾病家系進(jìn)行遺傳學(xué)分析,通過(guò)一代測(cè)序的方法尋找每個(gè)家系的致病基因,再通過(guò)分子生物學(xué)方法對(duì)該基因的生化功能進(jìn)行研究,從而闡明播散型卡介苗感染疾病發(fā)生的相關(guān)的致病機(jī)理。對(duì)三個(gè)患者的致病基因進(jìn)行突變篩選,我們發(fā)現(xiàn)三個(gè)無(wú)血緣關(guān)系的患者的致病基因IL12RB1均攜帶新的復(fù)合雜合突變,患者的父母各攜帶IL12RB1基因的一個(gè)雜合突變。家系1的患者攜帶IL12RB1基因的復(fù)合雜合突變:c.635G>A（R212Q）和缺失突變（c.764delG）,家系2的患者攜帶IL12RB1基因的復(fù)合雜合突:c.632G>C（R211P）和c.847C>T（R283X）、家系3的患者攜帶IL12RB1基因的復(fù)合雜合突:c.64G>A（A22T）和c.1673₁674insGAGCTTCCTGAG。為了進(jìn)一步研究這些突變是如何影響IL12Rβ1蛋白的功能,我們構(gòu)建上述突變型和野生型的人源IL12RB1基因真核表達(dá)載體,將... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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三個(gè)播散型卡介苗感染家系系譜圖

）PCR 反應(yīng)體系據(jù) Taq 酶的反應(yīng)條件，設(shè)計(jì)優(yōu)化 PCR 反應(yīng)體系，如下表 4 所示：表 4：PCR 體系（50μL）Table4：PCR systerm（50μL）PCR反應(yīng)組分 用量（μL）10×PCR Buffer（Mg2+15 mM） 5DNA 模板（20ng/μL） 1dNTP(2.5mmol/L) 4primers（Forward/Reverse）（10μmol/L） 1/1Taq酶（5U/μL） 0.5ddH2O 補(bǔ)齊至50）PCR 反應(yīng)程序序設(shè)定如下：

PCR反應(yīng)程序Fig.3：ReactionprogramofPCR


本文編號(hào)：3555222