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鹽堿脅迫下過表達(dá)超氧化物歧化酶基因OsCu/Zn-SOD水稻耐性分析

發(fā)布時間:2021-11-28 04:44
  超氧化物歧化酶(SOD)能將超氧陰離子自由基(O2—)快速歧化,將其轉(zhuǎn)化成過氧化氫和分子氧的專一酶類。本研究對OsCu/Zn-SOD蛋白在植物應(yīng)答鹽堿脅迫時的作用進(jìn)行探討。以水稻(Oryza satiya)品種龍粳11作為研究材料,利用RT-PCR技術(shù),克隆得到長度為636 bp的葉綠體銅鋅超氧化物歧化酶基因(OsCu/Zn-SOD,AK059841)的cDNA,編碼211個氨基酸組成的蛋白,它與野生稻和谷子Cu/Zn-SOD蛋白高度同源。qRT-PCR檢測到OsCu/Zn-SOD在水稻根中表達(dá)量最低,在花和S5葉階段表達(dá)量最高。而且,在L5葉階段到成熟期期間OsCu/Zn-SOD基因表達(dá)量水平降低。通過TargetP軟件預(yù)測OsCu/Zn-SOD基因可能的亞細(xì)胞位置,再利用基因槍轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)與轉(zhuǎn)OsCu/Zn-SOD::GFP基因擬南芥定位實(shí)驗(yàn),確定了 OsCu/Zn-SOD亞細(xì)胞位置在葉綠體中。在NaCl脅迫和NaHC03脅迫下,OsCu/Zn-SOD基因表達(dá)水平升高。萌發(fā)期檢測到過表達(dá)OsCu/Zn-SOD株系在125、150和170 mM NaCl脅迫下萌發(fā)率和株高的表現(xiàn)好于非轉(zhuǎn)基... 

【文章來源】:東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

鹽堿脅迫下過表達(dá)超氧化物歧化酶基因OsCu/Zn-SOD水稻耐性分析


圖1-1鹽脅迫下的一般途徑[14]??Fig.?1-1?The?general?pathway?under?salt?stress??通常認(rèn)為抗氧化脅迫的第一道防線就是超氧化物歧化酶(SOD),能將生物??

鹽堿脅迫下過表達(dá)超氧化物歧化酶基因OsCu/Zn-SOD水稻耐性分析


圖1-2?SOD在整個植?

組氨酸,天冬氨酸,活性中心,可溶性


??圖1-2?SOD在整個植物細(xì)胞中的位置[39]??Fig.?1-2?Locations?of?SOD?throughout?the?plant?cell??1.2.4銅/鋅-超氧化物歧化酶特性??Cu/Zn-SOD氧化型的活性中心是由一個溶劑分子和4個組氨酸(His)以扭曲??的方金字塔形式配位的Cu2+,另一個是由兩個組氨酸(His)和天冬氨酸(Asp)??以大致四面體形式配位的Zn2+[7G_71]。而Fe-SOD活性中心則是由三個組氨酸、一??個天冬氨酸和一個0H/H20分子在三角雙錐中配位的單一鐵離子,該分子由一個??保守的氫鍵網(wǎng)絡(luò)(包括谷氨酰胺(Gin)和絡(luò)氨酸(Tyr))支撐(圖1-3)。通過??對比發(fā)現(xiàn),Mn-SOD與Fe-SOD兩個酶之間存在結(jié)構(gòu)上相似|45'471。??0146?J?N80????"?W128?〇??,,A80??4今!??Mn-SOD?(or?Fe-SOD)?CuZn-SOD??圖1-3?Mn-SOD或Fe-SOD和Cu/Zn-SOD的活性位點(diǎn)【47]??Fig.?1-3?Active?site?of?Mn-SOD?or?Fe-SOD?and?Cu/Zn-SOD??當(dāng)空氣中完全充滿氧氣時,可溶性的Fe(II)幾乎不存在,不溶性Cu(I)轉(zhuǎn)化為??可溶性Cu(ii)(圖1-4)。這一階段,cu(n)開始被用作sod活性部位的金屬輔酶??-5-??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號:3523730

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