玉米自交系的抗旱性評(píng)價(jià)和ZmNAC基因的分子克隆
發(fā)布時(shí)間:2017-04-17 02:23
本文關(guān)鍵詞:玉米自交系的抗旱性評(píng)價(jià)和ZmNAC基因的分子克隆,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:玉米是我國(guó)三大糧食作物之一,干旱是影響玉米產(chǎn)量的主要因素,選育抗旱性強(qiáng)的玉米品種對(duì)玉米適應(yīng)干旱和穩(wěn)產(chǎn)具有重大意義。鑒定和評(píng)價(jià)玉米抗旱性,對(duì)生理特性進(jìn)行了解,可為抗旱育種提供科學(xué)依據(jù),同時(shí)也可通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)發(fā)掘抗旱基因,將其應(yīng)用到玉米抗旱育種中,提高玉米抗旱能力。NAC轉(zhuǎn)錄因子參與了植物的生長(zhǎng)代謝過(guò)程,還應(yīng)答干旱等環(huán)境脅迫。本研究以80份玉米自交系為材料,通過(guò)對(duì)玉米葉片失水率和相對(duì)含水量的測(cè)定及分析,篩選出15份自交系進(jìn)行脯氨酸含量、丙二醛含量以及超氧化物岐化酶、過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶活性測(cè)定。對(duì)五項(xiàng)指標(biāo)的耐旱系數(shù)進(jìn)行分級(jí),綜合評(píng)價(jià)玉米自交系的抗旱性。據(jù)此選出四個(gè)典型玉米自交系,分別從中克隆得到ZmNAC25基因,并進(jìn)行序列多態(tài)性分析。同時(shí)還對(duì)另三個(gè)ZmNAC基因進(jìn)行了初步分析,主要研究結(jié)果如下:1.干旱脅迫下,大多數(shù)自交系表現(xiàn)出相對(duì)含水量下降趨勢(shì),失水率、脯氨酸含量、丙二醛含量和三個(gè)抗氧化酶類活性均表現(xiàn)出升高趨勢(shì)。篩選出高抗旱自交系4份,抗旱自交系3份,中抗旱自交系2份,敏感自交系3份,高敏自交系3份。2.利用ClustalW軟件對(duì)不同玉米自交系來(lái)源的ZmNAC25基因進(jìn)行序列比對(duì)分析,對(duì)推測(cè)氨基酸序列進(jìn)行序列比對(duì),發(fā)現(xiàn)大多數(shù)堿基突變并未導(dǎo)致氨基酸位點(diǎn)發(fā)生改變,且在總共210個(gè)氨基酸位點(diǎn)中,抗旱性相近的自交系間存在的氨基酸位點(diǎn)差異僅有2-5個(gè),說(shuō)明ZmNAC25氨基酸序列的特征與玉米自交系抗旱性之間可能存在相關(guān)性。3.構(gòu)建ZmNAC25基因的植物過(guò)表達(dá)載體,通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化擬南芥,得到轉(zhuǎn)基因植株。
【關(guān)鍵詞】:玉米 抗旱性 NAC轉(zhuǎn)錄因子 ZmNAC 干旱脅迫
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:S513
【目錄】:
- 摘要5-6
- ABSTRACT6-9
- 第一章 文獻(xiàn)綜述9-24
- 1.1 植物抗旱性研究進(jìn)展9-17
- 1.1.1 植物抗旱機(jī)制9-12
- 1.1.2 玉米抗旱性的研究進(jìn)展12-17
- 1.2 植物轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展17-23
- 1.2.1 植物轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)18-19
- 1.2.2 植物轉(zhuǎn)錄因子的分類和生物學(xué)功能19-20
- 1.2.3 植物NAC轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展20-23
- 1.3 本研究目的與意義23-24
- 第二章 材料與方法24-34
- 2.1 玉米自交系的抗旱性鑒定24-26
- 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料24
- 2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)24-25
- 2.1.3 玉米自交系抗旱性測(cè)定指標(biāo)及方法25-26
- 2.2 玉米NAC基因的分子克隆26-34
- 2.2.1 植物材料26
- 2.2.2 菌株與載體26
- 2.2.3 主要使用試劑和儀器26
- 2.2.4 溶液以及培養(yǎng)基的配制26-28
- 2.2.5 實(shí)驗(yàn)方法28-34
- 第三章 結(jié)果與分析34-45
- 3.1 玉米自交系抗旱性評(píng)價(jià)34-40
- 3.1.1 干旱脅迫對(duì)玉米幼苗WLR和RWC的影響34-35
- 3.1.2 干旱脅迫對(duì)Pro和MDA含量的影響35-36
- 3.1.3 干旱脅迫對(duì)三種抗氧化酶活性的影響36-38
- 3.1.4 方差分析結(jié)果38
- 3.1.5 各玉米自交系的耐旱系數(shù)及抗旱性綜合評(píng)價(jià)38-40
- 3.2 玉米ZmNAC基因的PCR擴(kuò)增、克隆及序列分析40-43
- 3.2.1 玉米ZmNAC基因的PCR擴(kuò)增及克隆40-41
- 3.2.2 玉米ZmNAC25基因的序列分析41-42
- 3.2.3 玉米ZmNAC基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析42
- 3.2.4 玉米ZmNAC基因的啟動(dòng)子分析42-43
- 3.3 NAC基因遺傳轉(zhuǎn)化擬南芥43-45
- 第四章 結(jié)論與討論45-47
- 參考文獻(xiàn)47-51
- 附錄51-52
- 縮略詞52-53
- 致謝53-54
- 作者簡(jiǎn)介54
【相似文獻(xiàn)】
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
1 孫歡歡;玉米自交系的抗旱性評(píng)價(jià)和ZmNAC基因的分子克隆[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年
本文關(guān)鍵詞:玉米自交系的抗旱性評(píng)價(jià)和ZmNAC基因的分子克隆,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):312227
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