本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)新技術(shù)研究進(jìn)展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《河南師范大學(xué)》 2013年

轉(zhuǎn)Cry1Ab抗蟲基因玉米的分子生物學(xué)研究

陳小潔  

【摘要】：玉米(Zea mays L.)是世界上重要的糧食作物、飼料原料和能源作物，隨著世界經(jīng)濟(jì)的持續(xù)發(fā)展和人口的不斷增長(zhǎng)，我國(guó)對(duì)玉米的需求量呈增長(zhǎng)趨勢(shì)。隨著環(huán)境的日益惡化，玉米的病蟲害越來越重。據(jù)FAO統(tǒng)計(jì)，每年全世界因蟲害造成的玉米損失約占產(chǎn)量的12%，因此提高玉米單產(chǎn)，培育抗病、抗蟲等玉米新品種顯得十分迫切。1996年第一例轉(zhuǎn)基因作物商業(yè)化種植后，全球轉(zhuǎn)基因作物種植面積持續(xù)增長(zhǎng)，2009年達(dá)到1.34億公頃。目前，作物新品種的培育已由傳統(tǒng)的選育逐漸向利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育方向轉(zhuǎn)換。 本研究通過基因槍介導(dǎo)法將人工改造的Cry1Ab抗蟲基因轉(zhuǎn)入HiⅡB玉米愈傷組織中，獲得轉(zhuǎn)Cry1Ab基因陽性玉米苗；通過比較轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米各組織部位Cry1Ab基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達(dá)量，探討了各組織部位的抗蟲性與玉米生物學(xué)特性之間的關(guān)系；通過對(duì)轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米進(jìn)行接蟲，，探討了Cry1Ab蛋白表達(dá)的有效性，為抗蟲Cry1Ab基因的研究提供參考。通過調(diào)查分析轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米植株的農(nóng)藝性狀，探討了轉(zhuǎn)基因玉米和對(duì)照玉米植株產(chǎn)量的變化情況，為轉(zhuǎn)基因玉米的育種工作提供依據(jù)。 1、本研究通過基因槍轟擊法成功將人工改造Cry1Ab基因轉(zhuǎn)入玉米愈傷組織中，并獲得了轉(zhuǎn)基因玉米植株，PCR檢測(cè)陽性苗為9株；試紙條鑒定Bt蛋白表達(dá)的T0代轉(zhuǎn)基因陽性苗5株；T0代共3株轉(zhuǎn)基因玉米收獲種子。 2、對(duì)轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米自交系T1代到T3代進(jìn)行PCR和免疫試紙條檢測(cè)，獲得穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米植株；統(tǒng)計(jì)T1代至T3代PCR檢測(cè)陽性率，與孟德爾的分離規(guī)律相比偏小。造成這種現(xiàn)象的原因可能是由于基因槍轟擊愈傷組織可引起的拷貝數(shù)多。 3、本研究通過RT-PCR和熒光定量PCR對(duì)穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米各組織部位Cry1Ab基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明葉片中Cry1Ab的表達(dá)量顯著高于葉鞘和根部。 4、通過統(tǒng)計(jì)分析接蟲后轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米和對(duì)照組玉米心葉期的蟲孔數(shù)及受害程度，將轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米分為高抗和高感。統(tǒng)計(jì)分析接蟲后成熟期的玉米植株莖稈和果穗各部位的蟲孔數(shù)及受害程度，結(jié)果表明，T1至T3代轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米與對(duì)照相比，苞葉上的蟲孔數(shù)（P0.05），苞葉蟲孔面積（P0.05）、莖蟲孔數(shù)（P0.05）、莖蟲孔面積（P0.05）、籽粒受害部位（P0.05）和籽粒受害數(shù)（P0.05）均小于對(duì)照組。說明轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米對(duì)玉米螟的抗性顯著高于對(duì)照HiⅡ B。進(jìn)一步鑒定了目的性狀的有效性，證明目的基因轉(zhuǎn)入玉米植株中，且目的蛋白得到有效表達(dá)。 5、田間農(nóng)藝性狀調(diào)查結(jié)果表明，與對(duì)照HiⅡ B相比，轉(zhuǎn)Cry1Ab基因玉米植株產(chǎn)量穩(wěn)定，略有增加趨勢(shì)，差異不顯著(P0.05)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：河南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：S513
【目錄】：

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【相似文獻(xiàn)】

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3 YMG記者 滕新書　通訊員 宋偉 王楊;[N];煙臺(tái)日?qǐng)?bào);2009年

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5 記者 李志宏;[N];喀什日?qǐng)?bào)(漢);2009年

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7 記者 韓成斌;[N];蘭州日?qǐng)?bào);2010年

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10 特約記者 蔣兵;[N];自貢日?qǐng)?bào);2011年

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  本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)新技術(shù)研究進(jìn)展，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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