本文關鍵詞：帶npt-Ⅱ基因轉基因水稻快速檢測技術的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

帶npt-Ⅱ基因轉基因水稻快速檢測技術的建立 Quick testing-technology of transgenic rice with npt-Ⅱ screen marker gene

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摘要：

以轉溶菌酶基因水稻純系材料中花9號(ZH9(R))及其受體品種中花9號(ZH9(CK))為材料,以ZH9(R)中攜帶的npt-Ⅱ基因作為輔助篩選標記,利用抗生素對其進行處理,建立了一套快速檢測帶npt-Ⅱ基因轉基因水稻的技術體系.使用不同濃度的卡那霉素(Kanamycin,Kan)和G418溶液將ZH9(R)和ZH9(CK)成株離體葉片于室內(nèi)室溫下置于培養(yǎng)皿中浸泡處理,通過觀察葉片變化,確定G418為檢測帶npt-Ⅱ基因轉基因水稻的最佳抗生素,將G418(溶液)80mg/L濃度(處理4天)作為檢測該類轉基因水稻成株離體葉片的臨界濃度.進一步用G418對ZH9(R)和ZH9(CK)種子、幼胚和幼苗進行了不同處理.確定:(1)G418(溶液)300 mg/L濃度(處理7天)作為檢測該類轉基因水稻種子的臨界濃度;(2)G418(1/2MS+0.5 mg/L6-BA+1.5%蔗糖培養(yǎng)基)200 mg/L濃度(處理10天)作為檢測該類轉基因水稻幼胚的臨界濃度;(3)G418(1/2 MS+0.5 mg/L6-BA+1.5%蔗糖培養(yǎng)基)150 mg/L濃度(處理12天)作為檢測該類轉基因水稻幼苗的臨界濃度,并且通過PCR方法證實了上述結論.將這些結論應用于ZH9(R)轉育后代葉片、種子、幼胚和幼苗群體的檢測,檢測效果都非常明顯.這為帶npt-Ⅱ基因轉基因水稻建立了一套簡便、直觀且準確的檢測方法.

  本文關鍵詞：帶npt-Ⅱ基因轉基因水稻快速檢測技術的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。