本文關(guān)鍵詞：斑馬魚抗寒模型的構(gòu)建及魚類相關(guān)基因功能探討，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《復(fù)旦大學(xué)》 2009年

BHC80對斑馬魚心血管和造血系發(fā)育影響的初步研究

侯嘉云  

【摘要】： BHC80是BHC復(fù)合物(BRAF-histone deacetylase complex)的一個(gè)組分,神經(jīng)細(xì)胞和非神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)都有表達(dá),參與非神經(jīng)細(xì)胞中神經(jīng)特異性基因的轉(zhuǎn)錄抑制。BHC80結(jié)合H3K4me1/2去甲基后的產(chǎn)物H3K4me0,幫助維持LSD1與靶基因啟動子的結(jié)合而阻止H3K4me0重新甲基化成H3K4me1/2,因而BHC80參與LSD1抑制基因轉(zhuǎn)錄。 BHC80的基因敲除導(dǎo)致哺乳動物出生后很快死亡,不能用于心血管系統(tǒng)的研究。同時(shí)原始造血特異的因子缺失使哺乳動物在出生前死亡,也不能對定向造血進(jìn)行觀察;而斑馬魚可以通過滲透作用提供氧氣和營養(yǎng),氧氣供應(yīng)的25%-40%由體表滲透,即使心血管和血液系統(tǒng)有嚴(yán)重的缺陷也可以存活較長時(shí)間。同時(shí)斑馬魚仔魚通體透明,可用肉眼直接觀測表型變化。斑馬魚基因組,尤其是編碼基因與哺乳動物同源性高達(dá)75%,因此斑馬魚是研究心血管和胚胎造血早期發(fā)育的良好模式生物。我們利用斑馬魚具有的獨(dú)特優(yōu)勢研究BHC80在心血管系統(tǒng)發(fā)育和胚胎造血中的作用。 本文第一部分:用生物信息學(xué)的方法證明BHC80在脊椎動物的進(jìn)化過程中結(jié)構(gòu)和功能較為保守。應(yīng)用胚胎整體RNA原位雜交研究斑馬魚BHC80基因在早期胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)譜。 本文第二部分:用嗎啡啉修飾的反義寡核苷酸干擾BHC80 mRNA剪接,下調(diào)斑馬魚BHC80基因表達(dá)。用RT-PCR方法驗(yàn)證嗎啡啉修飾的反義寡核苷酸干擾的有效性。 本文第三部分:BHC80基因表達(dá)下調(diào)的斑馬魚胚胎心臟出現(xiàn)多種異常的表型,包括心房心室大小異常、環(huán)化不完全、嚴(yán)重者心臟發(fā)育呈管狀、心搏減弱等。用顯微熒光造影檢測血管的發(fā)育情況,BHC80基因表達(dá)下調(diào)的斑馬魚胚胎血管無明顯缺陷。 本文第四部分:BHC80基因表達(dá)下調(diào)導(dǎo)致紅細(xì)胞數(shù)量減少和PB1區(qū)紅細(xì)胞堆積。BHC80基因表達(dá)下調(diào)使胚胎紅系前體細(xì)胞增值增多并且分化延遲。因此可以認(rèn)為BHC80是斑馬魚胚胎早期正常造血功能所必須。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：Q46
【目錄】：

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