本文關(guān)鍵詞：一種抗草甘膦基因的發(fā)現(xiàn)和抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻的培育，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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博士論文    

一種抗草甘膦基因的發(fā)現(xiàn)和抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻的培育

     論文目錄

致謝第1-6頁(yè)

摘要第6-8頁(yè)

Abstract第8-14頁(yè)

第一章 綜述第14-36頁(yè)

 1 草甘膦的生產(chǎn)及其發(fā)展第14-15頁(yè)

 2 草甘膦性質(zhì)及作用機(jī)理第15-20頁(yè)

   ·草甘膦的理化性質(zhì)第15-16頁(yè)

   ·草甘膦作用特點(diǎn)第16-18頁(yè)

     ·良好的內(nèi)吸性和極寬的殺草譜第16頁(yè)

     ·不易產(chǎn)生抗藥性第16-18頁(yè)

     ·安全、無(wú)害第18頁(yè)

   ·草甘膦毒性機(jī)理第18-20頁(yè)

 3 生物抗草甘膦的機(jī)理第20-22頁(yè)

 4 草甘膦靶標(biāo)酶EPSPS的研究現(xiàn)狀第22-28頁(yè)

   ·EPSPS的分類第22頁(yè)

   ·EPSPS定位第22-23頁(yè)

   ·EPSP合成酶的三維結(jié)構(gòu)與活性區(qū)第23-26頁(yè)

   ·EPSPS基因的克隆及分子生物學(xué)研究第26-28頁(yè)

 5 抗草甘磷轉(zhuǎn)基因作物的選育途徑及研究進(jìn)展第28-32頁(yè)

   ·轉(zhuǎn)基因的概念第28-29頁(yè)

   ·抗草甘膦轉(zhuǎn)基因作物的選育途徑第29-30頁(yè)

   ·抗草甘膦轉(zhuǎn)基因作物的研究進(jìn)展第30-32頁(yè)

 6 抗草甘磷轉(zhuǎn)基因水稻的研究現(xiàn)狀第32-36頁(yè)

   ·植物遺傳轉(zhuǎn)化方法及特點(diǎn)第33-36頁(yè)

     ·農(nóng)桿菌介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移第34頁(yè)

     ·基因槍介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移第34-35頁(yè)

     ·PEG介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移第35頁(yè)

     ·花粉管導(dǎo)入法介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移第35-36頁(yè)

第二章 抗草甘膦G6基因的克隆、表達(dá)及草甘膦抑制下生長(zhǎng)曲線的建立第36-79頁(yè)

 1 實(shí)驗(yàn)材料與方法第36-47頁(yè)

   ·實(shí)驗(yàn)材料第36-38頁(yè)

     ·土壤樣品第36頁(yè)

     ·工具酶及試劑盒第36頁(yè)

     ·菌株和載體第36-37頁(yè)

     ·培養(yǎng)基第37頁(yè)

     ·SDS-PAGE電泳分析所用的試劑第37頁(yè)

     ·Western blot分析所用的試劑第37頁(yè)

     ·酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)所用的試劑第37-38頁(yè)

     ·其它試劑第38頁(yè)

     ·實(shí)驗(yàn)動(dòng)物第38頁(yè)

   ·實(shí)驗(yàn)方法第38-47頁(yè)

     ·菌株的分離與純化第38-39頁(yè)

     ·菌株的鑒定第39-40頁(yè)

     ·抗草甘膦G6基因的克隆第40-44頁(yè)

     ·抗草甘膦G6基因的原核表達(dá)和草甘膦抑制下生長(zhǎng)曲線的建立第44-46頁(yè)

     ·目的蛋白的純化回收及抗體制備第46-47頁(yè)

 2 結(jié)果與分析第47-77頁(yè)

   ·菌株的鑒定第47-50頁(yè)

     ·16S rDNA鑒定第47-50頁(yè)

     ·G6菌株的電鏡觀察第50頁(yè)

   ·G6基因的擴(kuò)增第50-53頁(yè)

   ·G6蛋白的生物信息學(xué)分析第53-69頁(yè)

     ·G6蛋白一級(jí)結(jié)構(gòu)分析第53-65頁(yè)

     ·G6蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)分析第65頁(yè)

     ·G6蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)分析第65-69頁(yè)

   ·抗草甘膦G6基因的原核表達(dá)和草甘膦抑制下生長(zhǎng)曲線的建立第69-75頁(yè)

     ·原核表達(dá)載體的構(gòu)建第69-70頁(yè)

     ·草甘膦抑制下生長(zhǎng)曲線的建立第70-74頁(yè)

     ·G6原核表達(dá)和SDS-PAGE分析第74-75頁(yè)

   ·目的蛋白的純化和抗體的制備第75-77頁(yè)

     ·目的蛋白的純化第75-76頁(yè)

     ·抗體的制備和效價(jià)檢測(cè)第76-77頁(yè)

 3 討論第77-79頁(yè)

第三章 抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻的培育第79-97頁(yè)

 1 材料和方法第79-89頁(yè)

   ·材料第79-80頁(yè)

     ·植物材料第79頁(yè)

     ·菌株和質(zhì)粒第79-80頁(yè)

     ·試劑與儀器第80頁(yè)

     ·實(shí)驗(yàn)用溶液的配制第80頁(yè)

   ·方法第80-89頁(yè)

     ·植物表達(dá)載體的構(gòu)建第80-84頁(yè)

     ·農(nóng)桿菌感受態(tài)的制備和轉(zhuǎn)化第84-85頁(yè)

     ·水稻的轉(zhuǎn)化第85-86頁(yè)

     ·植物總DNA提取(CTAB法)第86-87頁(yè)

     ·轉(zhuǎn)G6抗草甘膦基因植株的PCR鑒定第87頁(yè)

     ·Western blot分析第87-88頁(yè)

     ·Southern印跡分析第88頁(yè)

     ·T_0和T_1轉(zhuǎn)基因水稻抗性實(shí)驗(yàn)第88-89頁(yè)

 2 結(jié)果與分析第89-96頁(yè)

   ·載體構(gòu)建第89-90頁(yè)

   ·抗草甘膦轉(zhuǎn)基因植株的獲得第90-91頁(yè)

   ·T_0代抗草甘膦植株的PCR檢測(cè)第91-92頁(yè)

   ·T_0代抗草甘瞵植株的Western blot檢測(cè)第92-93頁(yè)

   ·T_0代抗草甘膦植株的Southern blot檢測(cè)第93頁(yè)

   ·T_0代轉(zhuǎn)基因水稻抗性實(shí)驗(yàn)第93-95頁(yè)

   ·T_1代轉(zhuǎn)基因水稻抗性實(shí)驗(yàn)第95-96頁(yè)

 3 討論第96-97頁(yè)

總討論第97-98頁(yè)

參考文獻(xiàn)第98-109頁(yè)

縮寫與中英文對(duì)照第109-110頁(yè)

附錄A 常用生化及分子生物學(xué)試劑與儀器第110-112頁(yè)

附錄B 實(shí)驗(yàn)用溶液及培養(yǎng)基配方第112-115頁(yè)

論文編號(hào)BS782336，這篇論文共115頁(yè)
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