納米材料具有優(yōu)異的物理化學(xué)特性,在食品、化妝品、能源、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用,但隨之而來的安全問題也成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。納米材料可經(jīng)由皮膚接觸、呼吸、胃腸道吸收等不同方式進(jìn)入人體,并且可以透過或繞過血腦屏障對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system,CNS)造成危害,而CNS在人體生理活動(dòng)的調(diào)節(jié)中發(fā)揮了主導(dǎo)作用,所以對(duì)納米材料的神經(jīng)毒性進(jìn)行評(píng)價(jià)至關(guān)重要。目前關(guān)于納米材料神經(jīng)毒性的研究尚不充分,難以確定材料物化特性與毒性之間的構(gòu)效關(guān)系。本研究以二氧化硅粒子為研究對(duì)象,采用三種不同的體外神經(jīng)毒性模型細(xì)胞:N9小膠質(zhì)細(xì)胞、bEnd.3腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞和HT22神經(jīng)元對(duì)其神經(jīng)毒性進(jìn)行評(píng)價(jià),探究二氧化硅粒子毒性的尺寸效應(yīng)及神經(jīng)毒性機(jī)理。首先,通過透射電鏡、ζ電位及粒度分析、傅立葉紅外光譜等一系列檢測(cè)手段,表征了不同粒徑(50,100,300 nm)商品化二氧化硅粒子的形貌、表面官能團(tuán)、水力學(xué)半徑和分散性等物化特性,并通過DCF檢測(cè)了其誘導(dǎo)非生物活性氧的水平。其次,檢測(cè)不同粒徑的二氧化硅對(duì)N9、bEnd.3和HT22三種細(xì)胞模型的毒性作用,結(jié)果顯示,二氧化硅納米粒子對(duì)bEnd....

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 研究背景及意義
    1.2 納米材料的暴露途徑
    1.3 神經(jīng)毒性的研究現(xiàn)狀
        1.3.1 納米材料引發(fā)神經(jīng)毒性的機(jī)理
        1.3.2 納米材料的物化特性對(duì)毒性的影響
        1.3.3 納米材料神經(jīng)毒性的研究方法和模型
    1.4 選題依據(jù)及研究思路
2 二氧化硅粒子的制備和表征
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 St?ber法制備二氧化硅粒子
        2.3.2 透射電鏡分析材料形貌
        2.3.3 水力學(xué)半徑、多分散指數(shù)和ζ電勢(shì)的測(cè)量
        2.3.4 傅立葉紅外變換光譜分析
        2.3.5 非生物活性氧的測(cè)定
        2.3.6 二氧化硅粒子的細(xì)菌內(nèi)毒素測(cè)試
        2.3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 二氧化硅粒子的形貌分析
        2.4.2 二氧化硅粒子的水力學(xué)半徑和ζ電勢(shì)分析
        2.4.3 二氧化硅粒子的表面官能團(tuán)分析
        2.4.4 二氧化硅粒子引發(fā)的非生物活性氧檢測(cè)
        2.4.5 二氧化硅粒子的內(nèi)毒素水平
        2.4.6 St?ber二氧化硅粒子的形貌分析
        2.4.7 St?ber二氧化硅粒子的水力學(xué)半徑和ζ電勢(shì)分析
    2.5 本章小結(jié)
3 二氧化硅粒子的神經(jīng)毒性檢測(cè)以及硅羥基影響的探究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 流式細(xì)胞術(shù)鑒定N9 細(xì)胞表面標(biāo)記物F4/80和CD11b
        3.3.2 細(xì)胞活力的測(cè)定(MTS)
        3.3.3 二氧化硅粒子的熒光標(biāo)記方法
        3.3.4 二氧化硅粒子的熱重分析
        3.3.5 觀察N9,bEnd.3和HT22 細(xì)胞對(duì)二氧化硅粒子的胞吞情況
        3.3.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.4.1 N9 細(xì)胞表面F4/80和CD11b的表達(dá)
        3.4.2 二氧化硅粒子對(duì)N9,bEnd.3和HT22 細(xì)胞的毒性結(jié)果
        3.4.3 N9,bEnd.3和HT22 細(xì)胞對(duì)二氧化硅粒子的胞吞量比較
        3.4.4 表面硅羥基是二氧化硅粒子造成N9 細(xì)胞毒性的重要原因
    3.5 本章小結(jié)
4 探究納米二氧化硅粒子對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞的毒性機(jī)理
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和細(xì)胞
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 線粒體應(yīng)激氧的測(cè)定
        4.3.2 細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽含量的測(cè)定
        4.3.3 酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定小膠質(zhì)細(xì)胞炎性因子IL-1β的分泌
        4.3.4 蛋白印跡法測(cè)定N9 細(xì)胞胞內(nèi)IL-1β和 N-GSDMD的含量
        4.3.5 電轉(zhuǎn)的方法使N9 細(xì)胞GSDMD基因沉默
        4.3.6 原代小膠質(zhì)細(xì)胞的提取和分離
        4.3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 二氧化硅粒子引發(fā)小膠質(zhì)細(xì)胞應(yīng)激氧的產(chǎn)生
        4.4.3 二氧化硅粒子引起N9 細(xì)胞焦亡
        4.4.4 二氧化硅粒子在原代小膠質(zhì)細(xì)胞和巨噬細(xì)胞J774A.1 中引發(fā)焦亡
    4.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝



本文編號(hào)：3765133