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代謝工程改造嗜熱厭氧桿菌(Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27)強(qiáng)化氫氣合成

發(fā)布時(shí)間:2021-01-17 16:00
  隨著人類城市化和工業(yè)化水平的加快,人們對(duì)能源的需求越來越大。隨著化石能源的快速消耗、不可再生和其在使用過程中造成的空氣污染等問題越來越嚴(yán)重,尋找新的清潔可再生能源成為近些年科研人員研究的重點(diǎn)。在眾多可再生能源中,氫氣由于具有高燃燒值及燃燒產(chǎn)物無污染兩大特性受到許多研究者青睞。本課題組篩選的Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27主要代謝產(chǎn)物有乙醇、乳酸、乙酸和氫氣。該菌不僅可以利用多種碳源,甚至可以直接利用半纖維素進(jìn)行代謝產(chǎn)物的合成及共利用戊糖和己糖,顯示出突出的應(yīng)用前景。但其氫氣產(chǎn)量和得率仍不足以使之成為工業(yè)發(fā)酵菌株,因此,為提高菌株氫氣產(chǎn)量和得率,需對(duì)其進(jìn)行代謝工程改造。T.aotearoense SCUT27在合成乙醇、乳酸和氫氣的過程中均需NADH提供電子,因此本研究首先從提高細(xì)胞內(nèi)NADH的供給著手提高其氫氣產(chǎn)量。在T.aotearoense SCUT27中,NADH依賴的還原態(tài)鐵氧還蛋白:NADP+氧化還原酶(NADH-dependent reduced ferredoxin:NADP+ox... 

【文章來源】:華南理工大學(xué)廣東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:138 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

代謝工程改造嗜熱厭氧桿菌(Thermoanaerobacterium aotearoense SCUT27)強(qiáng)化氫氣合成


嗜熱厭氧桿菌代謝途徑[70]

示意圖,質(zhì)粒,示意圖,基因敲除


第二章強(qiáng)化T.aotearoenseSCUT27胞內(nèi)NADH供給提高氫氣產(chǎn)量15以其水解液作為底物,分別在搖瓶水平和發(fā)酵罐水平對(duì)T.aotearoenseSCUT27nfnAB基因敲除工程菌發(fā)酵廉價(jià)生物質(zhì)水解液產(chǎn)氫的能力進(jìn)行評(píng)估。2.2材料與方法2.2.1實(shí)驗(yàn)材料2.2.1.1菌株和質(zhì)粒本章研究所用到的菌株和質(zhì)粒見表2-1,其中T.aotearoenseSCUT27由本實(shí)驗(yàn)室篩選保藏,E.coliDH5α感受態(tài)細(xì)胞購(gòu)自北京天根生化科技有限公司,載體pBluescriptIISK+購(gòu)自Stratagene,作為構(gòu)建nfnAB基因敲除載體的骨架:其結(jié)構(gòu)示意圖和質(zhì)粒上多克隆位點(diǎn)(MCS)結(jié)構(gòu)如圖2-1和圖2-2。圖2-1質(zhì)粒pBluescriptIISK+示意圖Fig.2-1ThestructureofcloningvectorpBluescriptIISK+圖2-2質(zhì)粒pBluescriptIISK+多克隆位點(diǎn)Fig.2-2Themultiplecloningsite(MCS)ofvectorpBluescriptIISK+

示意圖,質(zhì)粒,位點(diǎn),基因敲除


第二章強(qiáng)化T.aotearoenseSCUT27胞內(nèi)NADH供給提高氫氣產(chǎn)量15以其水解液作為底物,分別在搖瓶水平和發(fā)酵罐水平對(duì)T.aotearoenseSCUT27nfnAB基因敲除工程菌發(fā)酵廉價(jià)生物質(zhì)水解液產(chǎn)氫的能力進(jìn)行評(píng)估。2.2材料與方法2.2.1實(shí)驗(yàn)材料2.2.1.1菌株和質(zhì)粒本章研究所用到的菌株和質(zhì)粒見表2-1,其中T.aotearoenseSCUT27由本實(shí)驗(yàn)室篩選保藏,E.coliDH5α感受態(tài)細(xì)胞購(gòu)自北京天根生化科技有限公司,載體pBluescriptIISK+購(gòu)自Stratagene,作為構(gòu)建nfnAB基因敲除載體的骨架:其結(jié)構(gòu)示意圖和質(zhì)粒上多克隆位點(diǎn)(MCS)結(jié)構(gòu)如圖2-1和圖2-2。圖2-1質(zhì)粒pBluescriptIISK+示意圖Fig.2-1ThestructureofcloningvectorpBluescriptIISK+圖2-2質(zhì)粒pBluescriptIISK+多克隆位點(diǎn)Fig.2-2Themultiplecloningsite(MCS)ofvectorpBluescriptIISK+


本文編號(hào):2983174

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