發(fā)布時(shí)間：2017-10-07 18:25

  本文關(guān)鍵詞：基于羅丹明結(jié)構(gòu)的比率型pH、次氯酸根熒光探針的設(shè)計(jì)、合成及應(yīng)用研究

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【摘要】：細(xì)胞內(nèi)pH穩(wěn)態(tài)對維持細(xì)胞正常的生理功能具有重要作用。細(xì)胞器的內(nèi)環(huán)境有不同的pH, pH異常易引發(fā)多種生理疾病。因此,監(jiān)測細(xì)胞的pH變化具有重要意義。細(xì)胞內(nèi)的次氯酸是過氧化氫與氯離子在MPO的催化下產(chǎn)生的,能對病原體的入侵起到防御作用,但次氯酸水平過量會(huì)導(dǎo)致一系列疾病。因此,生物體中次氯酸的檢測是一項(xiàng)意義重大的課題。熒光探針是檢測細(xì)胞內(nèi)特定物質(zhì)的常用手段。羅丹明類分子具有優(yōu)良的光學(xué)性質(zhì),且一定條件下會(huì)由螺環(huán)結(jié)構(gòu)(無熒光)轉(zhuǎn)變成開環(huán)結(jié)構(gòu)(有熒光),因而被廣泛用于熒光探針的設(shè)計(jì)。單一熒光團(tuán)的熒光信號(hào)易受外界因素干擾,使檢測不太準(zhǔn)確�；诖�,我們設(shè)計(jì)在羅丹明母體中引入萘酰亞胺、香豆素?zé)晒鈭F(tuán),通過測量兩個(gè)熒光團(tuán)發(fā)射強(qiáng)度并計(jì)算其比值分別實(shí)現(xiàn)對pH、次氯酸根的比率測定。第一章,概述了熒光探針的結(jié)構(gòu)與識(shí)別機(jī)理,以及pH、次氯酸熒光探針的研究進(jìn)展。第二章,以萘酰亞胺為能量供體,羅丹明為能量受體,設(shè)計(jì)合成了基于FRET機(jī)理的pH熒光探針RNL,適用于pH 4.5-5.5這一范圍的pH比率檢測；探針含溶酶體靶向基團(tuán)——-(2-氨乙基)嗎啉,被成功用于溶酶體內(nèi)pH的測定。第三章,分別以香豆素、羅丹明基團(tuán)為FRET能量供體和受體,合成了比率型次氯酸根熒光探針RCP,探針?biāo)苄暂^好,對次氯酸根有較高的選擇性和靈敏度。由于吡啶鹽結(jié)構(gòu)的引入,探針能夠?qū)�粒體進(jìn)行靶向定位。本論文的創(chuàng)新點(diǎn)：1.基于FRET原理,以萘酰亞胺、香豆素基團(tuán)為能量供體,羅丹明基團(tuán)為能量受體,分別構(gòu)建了pH熒光探針RNL和次氯酸根熒光探針RCP,實(shí)現(xiàn)分析物的比率測定。2.將溶酶體靶向基團(tuán)——4-(2-氨乙基)嗎啉引入到pH熒光探針中,使探針具備靶向溶酶體功能。3.將線粒體靶向基團(tuán)——吡啶鹽引入到次氯酸根熒光探針中,使探針具備靶向線粒體功能,且很大程度上改善了探針的水溶性。
【關(guān)鍵詞】：羅丹明 熒光探針 比率型 pH 次氯酸根
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657.3
【目錄】：

• 摘要10-12
• Abstract12-14
• 符號(hào)說明14-15
• 第一章 緒論15-37
• 1.1 熒光探針概述15-22
• 1.1.1 引言15
• 1.1.2 熒光探針的結(jié)構(gòu)15-16
• 1.1.3 熒光探針的識(shí)別機(jī)理16-22
• 1.2 pH的生理意義及pH熒光探針的研究進(jìn)展22-28
• 1.2.1 pH的生理意義22
• 1.2.2 pH熒光探針的研究進(jìn)展22-28
• 1.3 次氯酸的生理意義及次氯酸熒光探針的研究進(jìn)展28-31
• 1.3.1 次氯酸的生理意義28-29
• 1.3.2 次氯酸熒光探針的研究進(jìn)展29-31
• 1.4 論文的選題背景及主要研究內(nèi)容31-32
• 參考文獻(xiàn)32-37
• 第二章 基于萘酰亞胺-羅丹明結(jié)構(gòu)的靶向溶酶體pH比率熒光探針的合成及應(yīng)用研究37-57
• 2.1 引言37-38
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分38-41
• 2.2.1 儀器與試劑38-39
• 2.2.2 化合物的合成與表征39-40
• 2.2.3 溶液配制與紫外熒光測試40
• 2.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)與成像40-41
• 2.3 結(jié)果與討論41-52
• 2.3.1 目標(biāo)探針RNL的設(shè)計(jì)與合成41-42
• 2.3.2 探針RNL的光譜性質(zhì)42-49
• 2.3.3 探針RNL在細(xì)胞內(nèi)的熒光成像49-52
• 2.4 本章小結(jié)52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 第三章 一種新型靶向線粒體的次氯酸根比率熒光探針的合成及應(yīng)用研究57-74
• 3.1 引言57-58
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分58-61
• 3.2.1 儀器與試劑58
• 3.2.2 化合物的合成與表征58-60
• 3.2.3 溶液配制與紫外熒光測試60-61
• 3.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)61
• 3.3 結(jié)果與討論61-70
• 3.3.1 目標(biāo)探針RCP的設(shè)計(jì)與合成61
• 3.3.2 探針RCP的光譜性質(zhì)61-67
• 3.3.3 探針RCP可能的作用機(jī)理67-68
• 3.3.4 探針RCP在細(xì)胞內(nèi)的熒光成像68-70
• 3.4 本章小結(jié)70
• 參考文獻(xiàn)70-74
• 結(jié)束語74-75
• 附錄75-81
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文81-82
• 致謝82-83
• 附表83

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本文編號(hào)：989392