玉米中酚酸黃酮液質(zhì)分析方法的建立與應(yīng)用
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更多相關(guān)文章: 玉米 液質(zhì)聯(lián)用 酚酸 黃酮 代謝組學(xué)
【摘要】:酚酸和黃酮是植物產(chǎn)生的一類次生代謝物,是對(duì)人體具有保健作用的天然活性物質(zhì),具有抗氧化、抗癌、抗腫瘤等多種生理功能。轉(zhuǎn)基因作物在對(duì)農(nóng)業(yè)和食品工業(yè)帶來(lái)貢獻(xiàn)的同時(shí),因其食用安全性及對(duì)生態(tài)環(huán)境潛在的危害性,正面臨著巨大的爭(zhēng)議。代謝組學(xué)作為研究生物體代謝產(chǎn)物的一門(mén)學(xué)科,已成功應(yīng)用于食品領(lǐng)域。本實(shí)驗(yàn)選擇了玉米中可能存在的香葉木素、香橙素、芹菜素、木犀草素、異鼠李素、橙皮素、柚皮素、蘆丁、槲皮素、金絲桃苷、金雀異黃酮、圣草酚、根皮素、丁香酸、對(duì)香豆酸、對(duì)羥基苯甲酸、芥子酸、苯甲酸、龍膽酸、反式阿魏酸、香草酸、咖啡酸、沒(méi)食子酸、原兒茶酸、香豆酸、肉桂酸、(-)-倍兒茶酸、高原兒茶酸、高香草酸、兒茶素、表兒茶素共三十一種酚酸和黃酮,通過(guò)優(yōu)化各項(xiàng)液相條件和質(zhì)譜條件,建立了靈敏度高、重現(xiàn)性和穩(wěn)定性好的,能同時(shí)檢測(cè)這三十一種酚酸和黃酮的液質(zhì)聯(lián)用方法。本實(shí)驗(yàn)還通過(guò)優(yōu)化玉米樣品中酚酸和黃酮的提取條件和固相萃取條件,建立了玉米中三十一種酚酸和黃酮的前處理方法。該前處理方法具有較高的回收率,且穩(wěn)定性和重現(xiàn)性良好。本實(shí)驗(yàn)將建立好的玉米中三十一種酚酸和黃酮的前處理方法和LC-MS檢測(cè)方法應(yīng)用于實(shí)際樣品,測(cè)定了 30種轉(zhuǎn)基因玉米和14種非轉(zhuǎn)基因玉米,獲得了每種目標(biāo)物在不同品種玉米中的種類及含量分布。在此基礎(chǔ)上,對(duì)轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因玉米進(jìn)行了代謝組學(xué)研究。首先對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理,通過(guò)變化倍數(shù)和熱圖,分析三十一種酚酸和黃酮在玉米中的變異范圍及總體分布情況。繼而應(yīng)用不同的多元統(tǒng)計(jì)方法——主成分分析(PCA)、偏最小二乘判別分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA),從酚酸和黃酮的角度,實(shí)現(xiàn)了轉(zhuǎn)基因玉米和非轉(zhuǎn)基因玉米的分離,并找到造成組間差異的代謝物,最后結(jié)合單維T-檢驗(yàn)確定具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異代謝物。
【關(guān)鍵詞】:玉米 液質(zhì)聯(lián)用 酚酸 黃酮 代謝組學(xué)
【學(xué)位授予單位】:天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:O657.63;TS213.4
【目錄】:
- 摘要4-5
- abstract5-8
- 1 前言8-18
- 1.1 轉(zhuǎn)基因玉米概述8-10
- 1.1.1 轉(zhuǎn)基因玉米的導(dǎo)入基因和導(dǎo)入方法8
- 1.1.2 轉(zhuǎn)基因玉米的檢測(cè)技術(shù)8
- 1.1.3 轉(zhuǎn)基因玉米的安全性評(píng)價(jià)8-10
- 1.2 酚酸和黃酮概述10-13
- 1.2.1 酚酸和黃酮的定義及分布10
- 1.2.2 酚酸和黃酮的結(jié)構(gòu)及分類10-11
- 1.2.3 酚酸和黃酮的作用及功能11-12
- 1.2.4 酚酸和黃酮的提取方法12-13
- 1.2.5 酚酸和黃酮的純化方法13
- 1.3 代謝組學(xué)概述13-16
- 1.3.1 代謝組學(xué)簡(jiǎn)介13-14
- 1.3.2 代謝組學(xué)的研究策略14
- 1.3.3 代謝組學(xué)的分析技術(shù)14-15
- 1.3.4 代謝組學(xué)的研究流程15-16
- 1.3.5 代謝組學(xué)的應(yīng)用和挑戰(zhàn)16
- 1.4 課題研究的目的、意義及主要研究?jī)?nèi)容16-18
- 1.4.1 課題研究的目的及意義16-17
- 1.4.2 課題研究的主要內(nèi)容17-18
- 2 材料與方法18-26
- 2.1 實(shí)驗(yàn)藥品與器材18-20
- 2.1.1 酚酸和黃酮標(biāo)準(zhǔn)品18-19
- 2.1.2 化學(xué)試劑與藥品19
- 2.1.3 儀器設(shè)備與材料19-20
- 2.2 實(shí)驗(yàn)方法20-23
- 2.2.1 酚酸和黃酮標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液及工作液的配制20-21
- 2.2.3 樣品前處理方法21
- 2.2.4 樣品的測(cè)定方法21-23
- 2.2.5 LC-MS/MS的定性及定量方法23
- 2.2.6 基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)23
- 2.3 轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因玉米的代謝物分析23-26
- 2.3.1 代謝組學(xué)數(shù)據(jù)預(yù)處理23-24
- 2.3.2 代謝組學(xué)數(shù)據(jù)分析24-26
- 3 結(jié)果與討論26-68
- 3.1 LC-MS/MS條件的優(yōu)化26-50
- 3.1.1 質(zhì)譜條件的優(yōu)化26-38
- 3.1.2 液相條件的優(yōu)化38-50
- 3.2 固相萃取條件的優(yōu)化50-55
- 3.2.1 固相萃取柱的選擇50-51
- 3.2.2 固相萃取上樣液pH的優(yōu)化51-52
- 3.2.3 固相萃取淋洗液比例的優(yōu)化52-53
- 3.2.4 固相萃取淋洗液體積的優(yōu)化53-54
- 3.2.5 固相萃取洗脫液體積的優(yōu)化54-55
- 3.3 樣品提取條件的優(yōu)化55-57
- 3.3.1 提取溶劑選擇55-56
- 3.3.2 提取溶劑比例的優(yōu)化56
- 3.3.3 料液比的優(yōu)化56-57
- 3.3.4 超聲時(shí)間的優(yōu)化57
- 3.4 方法性能評(píng)價(jià)57-61
- 3.4.1 方法的分析特征量58-59
- 3.4.2 基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)59
- 3.4.3 基質(zhì)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)59-61
- 3.5 實(shí)際樣品的測(cè)定61
- 3.6 轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因玉米的代謝物分析61-68
- 3.6.1 變異范圍分析61-62
- 3.6.2 熱圖分析62-63
- 3.6.3 主成分分析(PCA)63-64
- 3.6.4 偏最小二乘判別分析(PLS-DA)64-66
- 3.6.5 正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)66-67
- 3.6.6 差異代謝物的確定67-68
- 4 結(jié)論68-69
- 5 展望69-70
- 6 參考文獻(xiàn)70-76
- 7 攻讀碩士期間發(fā)表論文情況76-77
- 8 致謝77
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,本文編號(hào):880067
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