本文關(guān)鍵詞：酶放大的流動注射化學發(fā)光免疫傳感器的構(gòu)建及在食品違禁添加劑中的應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 流動注射 化學發(fā)光免疫分析 免疫傳感器 酶放大 沙丁胺醇 二氧化硅 溴布特羅

【摘要】：流動注射分析(FIA)速度快,自動化程度高�；瘜W發(fā)光免疫分析法(CLIA)靈敏度高,特異性好,線性范圍寬。將兩種技術(shù)結(jié)合,建立的FI-CLIA綜合了二者的優(yōu)點,備受廣大科研工作者的青睞。本論文利用新型的羧基化樹脂珠作固相載體,同時引入酶標抗體或者以納米二氧化硅材料為載體的復合物,建立了酶催化放大的化學發(fā)光免疫傳感器,分別對食品中的β-受體激動劑沙丁胺醇和溴布特羅進行快速、靈敏的檢測。該類方法的建立在食品添加劑殘留及其他小分子的檢測方面有重要的應(yīng)用前景。本論文主要包括四個方面:1.介紹論文的研究背景及意義。詳述流動注射技術(shù),化學發(fā)光免疫分析基本原理與類型,常見的化學發(fā)光體系以及用于FI-CLIA的固定化載體。2.采用新型的羧基化樹脂珠負載包被抗原,同時引入辣根過氧化物酶,利用其對魯米諾-過氧化氫發(fā)光體系的酶催化增強作用,建立了一種操作簡單、分析快速、檢測靈敏的測定沙丁胺醇的流動注射化學發(fā)光免疫分析法。3.探索實現(xiàn)CL信號放大的策略,并制備了分散性良好、粒徑均勻的二氧化硅納米顆粒。利用硅烷偶聯(lián)劑(APTES)和戊二醛(GA)對Si O2表面功能化,用于負載辣根過氧化物酶(HRP)和抗體(Ab)。借助傅里葉變換紅外(FT-IR)光譜、透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM)等手段對制備的材料進行了表征。4.將上述制備的二氧化硅、酶和抗體復合物(HRP-Si O2-Ab)用于FI-CLIA,由于負載了大量的HRP,實現(xiàn)了酶催化放大的CL信號,提高了分析靈敏度。該方法首次應(yīng)用于溴布特羅的檢測,具有重要意義,為其他小分子分析提供了新思路,且豐富了基于納米粒子標記的化學發(fā)光免疫分析應(yīng)用。
【關(guān)鍵詞】：流動注射 化學發(fā)光免疫分析 免疫傳感器 酶放大 沙丁胺醇 二氧化硅 溴布特羅
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-10
• 第一章 緒論10-24
• 1.1 引言10
• 1.2 流動注射技術(shù)10-11
• 1.3 化學發(fā)光11-15
• 1.3.1 化學發(fā)光反應(yīng)的基本原理11-12
• 1.3.2 化學發(fā)光反應(yīng)體系12-15
• 1.4 免疫分析15-17
• 1.4.1 免疫分析的原理15-16
• 1.4.2 免疫分析模式的類型16-17
• 1.5 化學發(fā)光免疫分析17
• 1.6 免疫反應(yīng)器制備技術(shù)17-18
• 1.6.1 聚苯乙烯微球作為固相載體17-18
• 1.6.2 免疫磁球(IMB)作為固相載體18
• 1.7 展望18-19
• 1.8 本論文的研究目的、意義和創(chuàng)新點19
• 1.8.1 研究目的19
• 1.8.2 意義與創(chuàng)新點19
• 參考文獻19-24
• 第二章 基于羧基化樹脂珠和酶放大的流動注射化學發(fā)光競爭免疫分析 β-受體激動劑沙丁胺醇24-39
• 2.1 引言24-25
• 2.2 實驗部分25-29
• 2.2.1 試劑25-26
• 2.2.2 實驗所用溶液的配制26
• 2.2.3 儀器與設(shè)備26-27
• 2.2.4 沙丁胺醇抗原和抗體的合成27
• 2.2.5 化學發(fā)光免疫傳感器的制備27-28
• 2.2.6 分析過程28-29
• 2.3 結(jié)果與討論29-34
• 2.3.1 羧基樹脂珠的表征29
• 2.3.2 化學發(fā)光反應(yīng)的動力學表征29-30
• 2.3.3 化學發(fā)光檢測條件的優(yōu)化30
• 2.3.4 免疫分析過程的優(yōu)化30-32
• 2.3.5 流動注射化學發(fā)光競爭免疫分析沙丁胺醇標準曲線的建立32-33
• 2.3.6 免疫傳感器的再生，，重現(xiàn)性和穩(wěn)定性考察33-34
• 2.3.7 實際樣品分析34
• 2.4 結(jié)論34-35
• 參考文獻35-39
• 第三章 基于納米粒子的化學發(fā)光信號放大策略研究39-50
• 3.1 引言39-41
• 3.2 實驗部分41-43
• 3.2.1 實驗試劑41
• 3.2.2 實驗所用溶液的配制41
• 3.2.3 實驗儀器41
• 3.2.4 魯米諾功能化的銀納米粒子（魯米諾-AgNPs）的制備41-42
• 3.2.5 二氧化硅納米粒子的制備和表面修飾42
• 3.2.6 HRP-SiO_2-Ab復合物的制備42-43
• 3.3 結(jié)果與討論43-44
• 3.3.1 魯米諾-AgNPs的表征43
• 3.3.2 二氧化硅納米粒子的表征43-44
• 3.3.3 表面有功能基團改性的二氧化硅納米粒子的表征44
• 3.4 檢測魯米諾-AgNPs對CL的放大效果44-45
• 3.5 檢測HRP-SiO_2-Ab對CL的放大效果45-46
• 3.6 結(jié)論46
• 參考文獻46-50
• 第四章 基于HRP功能化的二氧化硅納米粒子作為信號放大的流動注射化學發(fā)光免疫分析溴布特羅50-60
• 4.1 引言50-52
• 4.2 實驗部分52-55
• 4.2.1 實驗試劑52-53
• 4.2.2 儀器53
• 4.2.3 溴布特羅包被抗原和抗體的制備53
• 4.2.4 免疫傳感器的制備及其檢測53-55
• 4.3 結(jié)果與討論55-57
• 4.3.1 羧基樹脂珠的表征55
• 4.3.2 實驗條件的優(yōu)化55-57
• 4.4 結(jié)論57-58
• 參考文獻58-60
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表和待發(fā)表的論文60-61
• 致謝61-62

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