發(fā)布時(shí)間：2017-09-03 14:01

  本文關(guān)鍵詞：基于細(xì)胞組學(xué)技術(shù)提高膠球藻C-169中性脂染色的有效性

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【摘要】：本研究基于流式細(xì)胞儀、熒光酶標(biāo)儀、激光共聚焦掃描顯微鏡等細(xì)胞組學(xué)分析技術(shù),系統(tǒng)研究了藻液細(xì)胞濃度、Nile Red濃度、助溶劑種類和濃度,以及染色溫度、染色時(shí)間、振蕩時(shí)間等對(duì)檢測藻細(xì)胞中性脂相對(duì)含量(以平均熒光強(qiáng)度表示)的影響,提高了膠球藻C-169中性脂染色的有效性。結(jié)果表明,Nile Red熒光染色的最佳藻細(xì)胞濃度為106 m L,染料濃度在0.05~0.2μg/m L之間較適宜且不會(huì)產(chǎn)生過量的熒光干擾;添加15%~30%(V/V)丙三醇能顯著增強(qiáng)染料進(jìn)入細(xì)胞的通透性;25~40℃范圍內(nèi)膠球藻染色后的熒光強(qiáng)度較強(qiáng)但無顯著差異(p0.05);染色時(shí)間超過10 min及振蕩時(shí)間超過30 s均未顯著提高膠球藻C-169染色后的平均熒光強(qiáng)度。系統(tǒng)優(yōu)化后的染色方法可從細(xì)胞水平上顯著提高中性脂熒光檢測的精確性,同時(shí)為其他微藻采用這一熒光探針快速測定中性脂含量提供了快速有效方法。
【作者單位】： 華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 膠球藻C- 細(xì)胞組學(xué) 流式細(xì)胞術(shù) Nile Red 中性脂
【正文快照】： 微藻是世界上分布最廣、種類變化最大的低等植物類群,每年光合作用固定的二氧化碳占全球CO2固定量的50%以上,是能量轉(zhuǎn)換和碳元素循環(huán)的重要載體[1]。微藻具有光合作用效率高、生長周期短、環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)等特點(diǎn),某些富含油脂的品種其單位面積油脂產(chǎn)量可達(dá)陸生油料作物的30倍以

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2 寇正;潘俊敏;;尼羅紅確定衣藻中中性脂含量[A];生命的分子機(jī)器及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)——2012年全國生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)摘要集[C];2012年

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3 李露;膠球藻C-169的高通量培養(yǎng)與油脂積累能力的快速評(píng)價(jià)[D];華南理工大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：785389