酸水解—液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法分析13種水產(chǎn)品中含糖醛酸多糖
本文關鍵詞:酸水解—液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法分析13種水產(chǎn)品中含糖醛酸多糖
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【摘要】:含糖醛酸多糖(UACPs)是水產(chǎn)品的重要營養(yǎng)功效成分。本課題基于高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)技術(shù),建立了含糖醛酸多糖的分析方法,并將其應用于13種水產(chǎn)品中含糖醛酸多糖的分析中。分析了透明質(zhì)酸(HA),硫酸軟骨素(CS),肝素(HP)和由→4)-Glc A(1→2)-Man(1→重復片段組成的AGSP這四種UACPs酸水解、PMP衍生化后的產(chǎn)物,選擇了10種離子對用于質(zhì)譜檢測,并優(yōu)化了各離子對的碰撞能量(CE)和解簇電壓(DP)值,建立了酸水解-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析含糖醛酸多糖的方法。用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解法提取了13種水產(chǎn)品中的多糖,酸水解-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn),草魚內(nèi)臟樣品中含有HA、CS、HP以及一種由糖醛酸與己糖組成的重復二糖單元構(gòu)成的未知UACP;鯉魚樣品中含有CS和HP以及少量HA;而大黃花魚和帶魚內(nèi)臟樣品中的UACPs以CS為主。對紫石房蛤、青蛤、櫛孔扇貝、擬紫口玉螺及扁玉螺這5種貝類各組織部位的分析發(fā)現(xiàn),貝類的各組織部位的UACPs組成存在差異;親緣相近的兩種貝類,如青蛤與紫石房蛤,擬紫口玉螺與扁玉螺,UACPs組成有一定的相似性。通過對雌雄櫛江珧內(nèi)臟和閉殼肌中UACPs的比對研究發(fā)現(xiàn),雌性和雄性樣本間無明顯差異,內(nèi)臟與閉殼肌的UACPs的組成差異顯著,同時證實HPLC-MS/MS檢測降解產(chǎn)生的二糖片段的方法適用于UACPs糖組的分析。另外,對扇貝丁、魷魚絲和鱈魚片三種即食性海產(chǎn)品的檢測發(fā)現(xiàn),三者均含有硫酸軟骨素,鱈魚片中還發(fā)現(xiàn)了少量透明質(zhì)酸。本課題的研究結(jié)果全面揭示了4種魚類內(nèi)臟、6種可食用貝類和3種即食性海產(chǎn)品中的含糖醛酸多糖,為這些水產(chǎn)品的開發(fā)和利用提供了科學依據(jù),并推進了對動物源水產(chǎn)品中營養(yǎng)成分的認識。
【關鍵詞】:水產(chǎn)品 貝類 魚類 HPLC-MS/MS 多糖 硫酸軟骨素
【學位授予單位】:大連工業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:O657.63;TS254.7
【目錄】:
- 摘要3-4
- Abstract4-8
- 第一章 緒論8-19
- 1.1 多糖的概述8
- 1.2 糖胺聚糖的分類及其生物活性8-10
- 1.2.1 透明質(zhì)酸9
- 1.2.2 硫酸軟骨素9
- 1.2.3 肝素9-10
- 1.3 鮑魚性腺多糖10-11
- 1.4 多糖的降解方法11-14
- 1.4.1 物理降解方法11-12
- 1.4.2 化學降解法12-13
- 1.4.3 生物降解法13-14
- 1.5 多糖組成的分析方法14-16
- 1.5.1 氣相色譜法14
- 1.5.2 高效液相色譜法14-15
- 1.5.3 高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法15
- 1.5.4 薄層色譜法15-16
- 1.5.5 離子色譜法16
- 1.6 糖類的衍生化方法16-17
- 1.6.1 柱前衍生16-17
- 1.6.2 柱后衍生17
- 1.7 本論文的研究內(nèi)容及研究意義17-19
- 1.7.1 研究內(nèi)容17
- 1.7.2 研究意義17-19
- 第二章 材料與方法19-25
- 2.1 材料19-22
- 2.1.1 實驗原料19
- 2.1.2 主要實驗試劑19-21
- 2.1.3 主要實驗儀器21-22
- 2.2 實驗方法22-25
- 2.2.1 原料處理22
- 2.2.2 原料中粗多糖的提取22
- 2.2.3 櫛江珧粗多糖除糖原22
- 2.2.4 酸水解22-23
- 2.2.5 PMP柱前衍生化23
- 2.2.6 HPLC-MS/MS分析23-25
- 第三章 結(jié)果與討論25-40
- 3.1 標準品的定性分析25-28
- 3.2 質(zhì)譜碰撞能量與去簇電壓的優(yōu)化28-30
- 3.3 水產(chǎn)品中酸性多糖的分析30-40
- 3.3.1 四種魚內(nèi)臟酸性多糖的分析30-31
- 3.3.2 五種貝類不同部位的酸性多糖分析31-35
- 3.3.3 櫛江珧酸性多糖組學分析35-38
- 3.3.4 三種即食海產(chǎn)品中的酸性多糖分析38-40
- 第四章 結(jié)論40-41
- 參考文獻41-46
- 致謝46-47
- 附錄47
【參考文獻】
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,本文編號:766051
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