本文關鍵詞：大豆巰基肽的共價色譜法制備及其MALDI-TOF-MS分析

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【摘要】：建立了一種從復雜的大豆球蛋白酶解物中提取巰基肽的高選擇性方法。首先,對大豆球蛋白酶解物中的二硫鍵用1,4-二硫蘇糖醇進行還原,對還原劑的用量進行了考察和優(yōu)化,提高了酶解物中的巰基肽含量。然后用Thiopropyl-Sephrose 6B共價色譜制備還原酶解物中的巰基肽,對共價色譜的吸附、解吸條件進行了考察和優(yōu)化。研究表明:二硫鍵還原最佳1,4-二硫蘇糖醇用量為20 mmol/L,還原之后酶解物中的巰基含量從1.8μmol/g提高到了113.8μmol/g。共價色譜的最佳條件為還原酶解物的上樣量為酶解物中巰基含量占凝膠活性位點的80%,鍵合時間30 min;解吸時1,4-二硫蘇糖醇濃度20 mmol/L,解吸時間20 min。此外,C18柱可以有效地將巰基肽中的1,4-二硫蘇糖醇和2-巰基吡啶去除。MALDI-TOF-MS分析表明制備的巰基肽中可檢測到45個肽段,其中36個肽段含有巰基,表明Thiolpropyl-Sepharose 6B共價色譜對巰基肽有很高的選擇性。
【作者單位】： 江南大學食品學院食品科學與工程國家重點實驗室;
【關鍵詞】： 大豆球蛋白酶解物 巰基肽 還原 Thiolpropyl-Sepharose B MALDI-TOF-MS
【基金】：國家自然科學基金(31201380) 江蘇省自然科學基金(BK2011151)
【分類號】：O657.63;TS201.2
【正文快照】： 巰基化合物可以增強食品安全,改善食品營養(yǎng),有很高的應用價值。研究表明巰基化合物可以抑制食品中黃曲霉毒素B1的致突變活性[1],從而提高食品的安全性。食品中的蛋白質在堿性處理過程中可能會產生脫羥丙氨酸,進一步形成賴氨酸丙氨酸,賴氨酸丙氨酸能夠引起小鼠近端腎小管黏膜組

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1 劉瑞;酶解多肽一級序列分析與反應過程建模及結構變化初探[D];天津大學;2006年

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本文編號：765784