本文關(guān)鍵詞：基于金納米顆粒葉酸生物傳感器的研究

  更多相關(guān)文章： 金納米顆粒 葉酸 葉酸受體 乳腺癌 子宮頸癌 多壁碳納米管

【摘要】：金納米顆粒獨(dú)特的物理、化學(xué)、光、電、催化性能,使其成為構(gòu)建化學(xué)、生物傳感器的重要材料。金納米顆粒可直接合成且穩(wěn)定性強(qiáng),具有獨(dú)特的光電性能;在與配體結(jié)合時(shí),金納米顆粒提供了較大的比表面積以及較好的生物相容性。在近些年的研究中,金納米顆粒做為傳感元素,被廣泛應(yīng)用于檢測(cè)金屬離子,小分子,蛋白質(zhì),核酸,惡性腫瘤細(xì)胞等。葉酸,N-{[(2-氨基-4-羥基-6蝶啶)甲氨基]苯甲�；鶀-L-谷氨酸,為水溶性維生素B,常見(jiàn)于卷心菜,西蘭花,花椰菜,水果,堅(jiān)果中。由于多數(shù)癌細(xì)胞表面過(guò)表達(dá)葉酸受體,因此葉酸作為腫瘤檢測(cè)的標(biāo)記物應(yīng)用于生物傳感中。葉酸的缺乏,極易導(dǎo)致缺鐵性貧血,癌癥,阿茲海默氏癥,心血管疾病等。本論文以金納米顆粒為主要材料,構(gòu)建基于金納米顆粒的葉酸傳感器。具體研究包括以下三個(gè)方面:1.金納米顆粒修飾的葉酸殼聚糖生物傳感器檢測(cè)乳腺癌MCF-7細(xì)胞在裸玻碳電極上電沉積上金納米顆粒增加電極的導(dǎo)電性,在沉積了金納米顆粒的玻碳電極表面附著殼聚糖與葉酸的交聯(lián)物構(gòu)建葉酸標(biāo)記的電化學(xué)傳感器。修飾了金納米顆粒/葉酸和殼聚糖交聯(lián)的傳感器對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7具有良好的電化學(xué)響應(yīng),MCF-7在5.0×103 cells/mL到1.2×105 cells/mL濃度范圍內(nèi)與傳感器響應(yīng)電流呈線性相關(guān),相關(guān)曲線的回歸系數(shù)為0.9935。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,納米顆粒濃度為40 mg/mL時(shí),細(xì)胞的死亡率為18%,該傳感器簡(jiǎn)便易于制備,有望應(yīng)用于體外早期乳腺癌檢測(cè)。2.基于金納米顆粒SERS信號(hào)檢測(cè)宮頸癌HeLa細(xì)胞宮頸癌細(xì)胞過(guò)表達(dá)葉酸受體,利用葉酸和受體之間的特異性識(shí)別作用進(jìn)行靶向識(shí)別檢測(cè)子宮頸癌HeLa細(xì)胞。以金納米顆粒為SERS基底,巰基苯甲酸為拉曼信標(biāo)分子,在功能化的金納米顆粒上封裝上一層厚度適宜的二氧化硅層用于防止納米顆粒對(duì)細(xì)胞的毒性影響。通過(guò)表面拉曼增強(qiáng)散射對(duì)子宮頸癌HeLa細(xì)胞和人肺腺癌細(xì)胞A 549進(jìn)行檢測(cè),HeLa有強(qiáng)的拉曼信號(hào),而A 549無(wú)明顯信號(hào)。該分析技術(shù)有望于成為葉酸修飾的傳感器檢測(cè)癌細(xì)胞的一種新方法,能夠直接應(yīng)用于體外早期子宮頸癌診斷。3.金納米顆粒/多壁碳納米管葉酸傳感器的研制將功能化的多壁碳納米管與金納米顆�；旌�,滴加到裸玻碳電極表面構(gòu)建電化學(xué)傳感器用于對(duì)葉酸的檢測(cè)。利用多壁碳納米管金納米顆粒提供的較大的比表面積和對(duì)電子轉(zhuǎn)移的促進(jìn)作用催化氧化葉酸放大電化學(xué)信號(hào)。通過(guò)循環(huán)伏安(CV),交流阻抗(EIS)對(duì)傳感器進(jìn)行電化學(xué)表征,以差分脈沖伏安分析(DPV)對(duì)葉酸含量進(jìn)行定量檢測(cè)。在最佳實(shí)驗(yàn)條件下,葉酸濃度從2.0×10-6 M到2.0×10-4M與傳感器電流響應(yīng)呈線性相關(guān),線性相關(guān)系數(shù)為0.9967,最低檢測(cè)限達(dá)到1.4×10-7 M(信噪比S/N=3)。
【關(guān)鍵詞】：金納米顆粒 葉酸 葉酸受體 乳腺癌 子宮頸癌 多壁碳納米管
【學(xué)位授予單位】：上海師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657.1;TP212
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-10
• 第一章 緒論10-21
• 1.1 金納米顆粒10-18
• 1.1.1 前言10
• 1.1.2 金納米顆粒的制備10-12
• 1.1.3 金納米顆粒的功能化12-13
• 1.1.4 金納米顆粒在生物傳感中的應(yīng)用13-16
• 1.1.5 金納米顆粒的表面增強(qiáng)拉曼散射16-18
• 1.2 葉酸18-20
• 1.2.1 前言18
• 1.2.2 葉酸與葉酸受體18-19
• 1.2.3 葉酸缺乏的危害19-20
• 1.3 本文構(gòu)思20-21
• 第二章 金納米顆粒修飾的葉酸殼聚糖生物傳感器檢測(cè)乳腺癌MCF-721-34
• 2.1 引言21-22
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分22-25
• 2.2.1 主要試劑和實(shí)驗(yàn)儀器22-23
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)原理23-24
• 2.2.3 葉酸電化學(xué)傳感器的制備24
• 2.2.4 電化學(xué)測(cè)試24-25
• 2.2.5 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)25
• 2.3 結(jié)果與討論25-33
• 2.3.1 葉酸電化學(xué)傳感器的表征25-27
• 2.3.2 葉酸傳感器的電化學(xué)行為27-29
• 2.3.3 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化29-30
• 2.3.4 定量檢測(cè)30-31
• 2.3.5 葉酸傳感器的特異性31-32
• 2.3.6 細(xì)胞存活率(MTT法)32-33
• 2.4 本章小結(jié)33-34
• 第三章 基于金納米顆粒SERS信號(hào)檢測(cè)子宮頸癌He La34-46
• 3.1 引言34-35
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分35-37
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備和儀器35
• 3.2.2 實(shí)驗(yàn)原理和方法35-36
• 3.2.3 葉酸修飾的硅包MBA的金納米顆粒的合成36-37
• 3.2.4 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)37
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論37-44
• 3.3.1 對(duì)葉酸修飾的硅包MBA的金納米顆粒的表征37-40
• 3.3.2 化學(xué)穩(wěn)定性考察40-42
• 3.3.3 靶向檢測(cè)子宮頸癌He La42
• 3.3.4 傳感器的特異性42-43
• 3.3.5 細(xì)胞的存活率（MTT法）43-44
• 3.4 本章小結(jié)44-46
• 第四章 金納米顆粒/多壁碳納米管葉酸傳感器的研制46-56
• 4.1 引言46-47
• 4.2 實(shí)驗(yàn)部分47-48
• 4.2.1 主要試劑和儀器47
• 4.2.2 實(shí)驗(yàn)原理47-48
• 4.2.3 基于金納米顆粒修飾的多壁碳納米管傳感器的制備48
• 4.2.4 電化學(xué)測(cè)試48
• 4.3 結(jié)果與討論48-54
• 4.3.1 基于金納米顆粒修飾的多壁碳納米管傳感器的表征48-50
• 4.3.2 基于金納米顆粒修飾的多壁碳納米管傳感器電化學(xué)行為50
• 4.3.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化50-51
• 4.3.4 金納米顆粒修飾的多壁碳納米管對(duì)葉酸的定量檢測(cè)51-53
• 4.3.5 金納米顆粒修飾的多壁碳納米管傳感器的特異性53
• 4.3.6 傳感器的重現(xiàn)性和穩(wěn)定性53
• 4.3.7 加標(biāo)回收測(cè)定53-54
• 4.4 本章小結(jié)54-56
• 參考文獻(xiàn)56-72
• 附錄 攻讀學(xué)位期間所發(fā)表的學(xué)術(shù)論文72-73
• 致謝73

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本文編號(hào)：720071