本文關(guān)鍵詞：液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析流感病毒感染引起宿主蛋白類泛素化修飾

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【摘要】：干擾素刺激基因15編碼蛋白質(zhì)(Interferon stimulated gene 15 k Da protein,ISG15)是最早被鑒定的類泛素分子蛋白質(zhì),在病毒感染和免疫調(diào)節(jié)等方面具有重要作用。本研究利用免疫沉淀技術(shù)將被類泛素ISG15修飾的蛋白富集純化,采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)流感病毒感染A549宿主細(xì)胞過(guò)程中產(chǎn)生的類泛素ISG15修飾蛋白進(jìn)行了分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在流感病毒感染的實(shí)驗(yàn)組A549細(xì)胞中,鑒定到了22種來(lái)源于宿主細(xì)胞的ISG15修飾的蛋白,包括類泛素蛋白ISG15、細(xì)胞周期蛋白-T1、熱休克蛋白71、鈣調(diào)素結(jié)合蛋白、真核翻譯起始因子等,以及1種來(lái)源于流感病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白NS1。在鑒定的22種宿主蛋白中,有6種蛋白在未感染病毒的對(duì)照組A549細(xì)胞中也得到鑒定,包括膜聯(lián)蛋白A1、果糖二磷酸醛縮酶A、線粒體三磷酸腺苷合成酶亞基g、烯醇化酶、肌動(dòng)蛋白、微管蛋白。生物信息學(xué)分析表明,流感病毒感染引起的ISG15修飾的宿主蛋白分別歸屬于9個(gè)不同的蛋白分類,包括細(xì)胞骨架蛋白、分子伴侶蛋白、酶調(diào)節(jié)劑、核酸結(jié)合蛋白、激酶類、轉(zhuǎn)移酶類、轉(zhuǎn)錄因子、氧化還原酶類以及結(jié)構(gòu)蛋白。本研究為大規(guī)模分析鑒定ISG15修飾蛋白提供了一種特異、有效的研究方法。
【作者單位】： 吉林大學(xué)人獸共患病研究所 人獸共患病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;吉林亞泰生物藥業(yè)股份有限公司;吉林大學(xué)第二醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 流感病毒 類泛素蛋白 干擾素刺激基因編碼蛋白質(zhì) 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(Nos.21175055,31372409) 吉林省科技廳項(xiàng)目(Nos.20110739,20150204001YY) 吉林省衛(wèi)生計(jì)生委項(xiàng)目(No.2015Z041) 吉林大學(xué)白求恩計(jì)劃B(No.2012210)資助~~
【分類號(hào)】：R373.13;S852.65;O657.63
【正文快照】： 本文系國(guó)家自然科學(xué)基金(Nos.21175055,31372409)、吉林省科技廳項(xiàng)目(Nos.20110739,20150204001YY)、吉林省衛(wèi)生計(jì)生委項(xiàng)目(No.2015Z041)和吉林大學(xué)白求恩計(jì)劃B(No.2012210)資助*E-mail:liu_ning@jlu.edu.cn1引言流感病毒等微生物在宿主細(xì)胞中有效復(fù)制和拮抗宿主免疫反應(yīng)涉及

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