本文關(guān)鍵詞：馬尾藻源植物生長調(diào)節(jié)劑的檢測、制備及應(yīng)用研究

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【摘要】：馬尾藻(Sargassum),屬馬尾藻科,在我國是資源豐富的一類褐藻,其綜合利用率較低。研究表明,馬尾藻中含有豐富的植物激素等生物活性物質(zhì),它們對于促進植物的生長、發(fā)育和抗逆等具有顯著的功效。目前對于馬尾藻中的植物激素研究較少,利用率較低。因此,本研究通過生物酶解技術(shù)提取其中的植物激素并建立液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜同時檢測馬尾藻中4種的植物激素的方法,以正交設(shè)計的方法獲得最佳工藝,并以植物激素含量和馬尾藻多糖為指標,對自制馬尾藻源生長調(diào)節(jié)劑進行了質(zhì)量評價,最終將制備的生長調(diào)節(jié)劑通過豆芽、辣椒和小白菜進行了培育試驗。本研究的主要結(jié)果如下：1.本研究優(yōu)化了馬尾藻中植物激素的檢測方法。利用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法(UPLC-MS/MS)可同時檢測吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、脫落酸(ABA)、玉米素(ZT)4種植物激素。優(yōu)化后的前處理和凈化方法為：提取溶劑為70%甲醇,并采用超聲提取法,其濃縮物經(jīng)過PCX+PAX固相小柱凈化,結(jié)果表明4種植物激素的回收率為80-105%,相對標準偏差為1.06%-6.42%。在0.01-1 μg/mL內(nèi),各種植物激素的相關(guān)系數(shù)均大于0.9990。該方法的檢出限為0.025-0.2 μg/kgo2.本研究通過單因素設(shè)計優(yōu)化了馬尾藻源植物生長調(diào)節(jié)劑的浸提工藝,得到料液比為1：3,浸提溫度為35℃,反應(yīng)時間為2h時IAA含量提取最佳為11.26μg/Kg。本研究也優(yōu)化了生物酶解提取馬尾藻源植物生長調(diào)節(jié)劑的工藝條件,通過正交設(shè)計確定了生物酶解的最佳條件：纖維素酶和果膠酶的用量分別為0.15 g/50 g和0.30g/50 g,酶解溫度為30℃,反應(yīng)pH為7,酶解時間為3 h。通過浸提工藝和酶解工藝的結(jié)合使用,所得的植物激素含量：IAA 17.65 μg/Kg, ABA 0.44 μg/Kg, IB A 0.95 μg/Kg, ZT 1.56 μg/Kg,馬尾藻多糖含量為2.42%.3.本研究以綠豆、辣椒和小白菜為試驗對象,采用種子浸泡的方式進行種子萌發(fā)和幼苗生長的試驗,初步研究促生長功效。結(jié)果表明,200倍和400倍稀釋的馬尾藻源植物生長調(diào)節(jié)劑對于綠豆、辣椒和小白菜種子的發(fā)芽勢、發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)以及幼苗的根長、單株高、單株鮮重、葉片面積和葉綠素含量均具有顯著影響。綜合考慮選用400倍稀釋的馬尾藻源植物生長調(diào)節(jié)劑用于綠豆、辣椒和小白菜種子的萌發(fā)和幼苗生長。
【關(guān)鍵詞】：馬尾藻 酶解 內(nèi)源性植物激素 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜 生長調(diào)節(jié)劑
【學(xué)位授予單位】：福建農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：O657.63;TQ452
【目錄】：

• 摘要9-11
• Abstract11-13
• 第一章 綜述13-35
• 1 馬尾藻的研究概況13-16
• 1.1 馬尾藻簡介13-14
• 1.2 馬尾藻的研究價值14-16
• 2 植物生長調(diào)節(jié)劑概況16-33
• 2.1 植物生長調(diào)節(jié)劑簡介和研究16-19
• 2.2 植物激素的簡介和研究進展19-24
• 2.3 植物生長調(diào)節(jié)劑的檢測24-31
• 2.3.1 前處理方法25
• 2.3.2 凈化方法25-27
• 2.3.3 檢測方法27-31
• 2.4 植物生長調(diào)節(jié)劑的制備方法31-33
• 2.4.1 物理機械法32
• 2.4.2 化學(xué)提取法32
• 2.4.3 生物法32-33
• 3 本文的研究目的意義和內(nèi)容33-35
• 第二章 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定馬尾藻中4種內(nèi)源性植物激素35-50
• 1 前言35
• 2 材料與方法35-37
• 2.1 材料35-36
• 2.1.1 實驗材料35-36
• 2.1.2 實驗試劑36
• 2.1.3 標準溶液36
• 2.2 儀器與設(shè)備36
• 2.3 實驗方法36-37
• 2.3.1 樣品前處理36-37
• 2.3.2 樣品凈化37
• 2.4 超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測條件37
• 2.4.1 超高效液相色譜條件37
• 2.4.2 質(zhì)譜條件37
• 3 結(jié)果與討論37-49
• 3.1 前處理提取溶劑的優(yōu)化37-38
• 3.2 凈化方法的優(yōu)化38-40
• 3.3 色譜條件的優(yōu)化40-42
• 3.4 質(zhì)譜條件的優(yōu)化42-45
• 3.5 方法評價45-48
• 3.5.1 方法的標準曲線、線性范圍和檢出限45-47
• 3.5.2 方法的準確度和精密度47-48
• 3.6 方法應(yīng)用48-49
• 4 本章小結(jié)49-50
• 第三章 馬尾藻植物生長調(diào)節(jié)劑的制備工藝50-64
• 1 前言50-51
• 2 材料與方法51-54
• 2.1 材料51
• 2.1.1 實驗材料51
• 2.1.2 實驗試劑51
• 2.2 儀器與設(shè)備51
• 2.3 實驗方法51-54
• 2.3.1 生長調(diào)節(jié)劑加工工藝流程51-52
• 2.3.2 浸提52
• 2.3.3 酶解52-53
• 2.3.4 浸提工藝設(shè)計53
• 2.3.5 酶解條件正交試驗設(shè)計53-54
• 2.3.6 馬尾藻可溶性糖含量的測定54
• 3 結(jié)果與討論54-63
• 3.1 浸提工藝優(yōu)化54-57
• 3.1.1 浸提工藝料液比的確定54-55
• 3.1.2 浸提工藝時間的確定55-56
• 3.1.3 浸提工藝溫度的確定56-57
• 3.1.4 浸提工藝優(yōu)化的結(jié)果57
• 3.2 酶解正交試驗結(jié)果57-61
• 3.3 酶解正交驗證試驗61
• 3.4 馬尾藻可溶性糖標準曲線繪制和樣品測定61-62
• 3.5 生長調(diào)節(jié)劑質(zhì)量指標評價62-63
• 4 本章小結(jié)63-64
• 第四章 馬尾藻源生長調(diào)節(jié)劑的功效驗證64-77
• 1 前言64
• 2 材料與方法64-67
• 2.1 材料64-65
• 2.1.1 實驗材料64-65
• 2.1.2 實驗試劑65
• 2.2 儀器與設(shè)備65
• 2.3 實驗方法65-67
• 2.3.1 不同稀釋倍數(shù)海藻生長調(diào)節(jié)劑的制備65
• 2.3.2 發(fā)芽試驗65-66
• 2.3.3 室內(nèi)栽培試驗66
• 2.3.4 種子發(fā)芽的指標檢測方法66
• 2.3.5 幼苗各類指標檢測方法66-67
• 3 結(jié)果與討論67-76
• 3.1 馬尾藻源植物生長調(diào)節(jié)劑的稀釋倍數(shù)和種子測定天數(shù)的確定67
• 3.2 不同稀釋倍數(shù)馬尾藻源植物生長調(diào)節(jié)劑對種子發(fā)芽的影響67-72
• 3.3 不同稀釋倍數(shù)馬尾藻源植物生長調(diào)節(jié)劑對幼苗生長的影響72-76
• 4 本章小結(jié)76-77
• 第五章 結(jié)論與展望77-79
• 5.1 結(jié)論77-78
• 5.2 展望78-79
• 在學(xué)期間發(fā)表論文及專利等79-80
• 參考文獻80-89
• 致謝89-90

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