本文關(guān)鍵詞：基于PET機(jī)理的反應(yīng)型熒光探針設(shè)計(jì)與應(yīng)用

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【摘要】：21世紀(jì)以來(lái),隨著科技和生命科學(xué)的不斷進(jìn)步,人們對(duì)檢測(cè)技術(shù)提出了更高的要求。熒光探針?lè)?作為一種生物檢測(cè)技術(shù)手段,其具有高選擇性,高靈敏度,易操作以及可實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)監(jiān)控等特點(diǎn)而逐漸成為一種可用于定位,分子識(shí)別和動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)生物分子的有效工具。熒光探針的設(shè)計(jì)與應(yīng)用成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)之一。小分子生物硫醇,如半胱氨酸(Cys)、高半胱氨酸(Hcy)和還原型谷胱甘肽(GSH)是大多數(shù)肽的組成成分,在許多疾病的發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用,因此實(shí)現(xiàn)生物體內(nèi)硫醇分子的檢測(cè)具有重要的醫(yī)學(xué)意義。本文利用萘酰亞胺作為熒光母體合成了一例特異性識(shí)別生物硫醇的探針TC,該探針具有優(yōu)異的雙光子性能和低細(xì)胞毒性,在雙光子激發(fā)的熒光成像過(guò)程中,可以有效避免生物樣品的背景熒光干擾。更重要的是,它可以定位于細(xì)胞的溶酶體,進(jìn)而有利于實(shí)現(xiàn)了對(duì)該細(xì)胞器功能的闡釋。α-酮戊二酸(α-KA)是代謝途徑中最重要的氮素運(yùn)載體之一,神經(jīng)膠質(zhì)瘤中細(xì)胞質(zhì)異檸檬酸脫氫酶的體細(xì)胞突變能夠使a-酮戊二酸在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成2-羥基戊二酸(2-HG),并且在罹患急性髓樣白血病病人的腫瘤中α-KA含量降低。因此實(shí)現(xiàn)對(duì)α-KA含量的準(zhǔn)確檢測(cè)對(duì)疾病的早期診斷具有重要的推動(dòng)作用。本文利用萘酰亞胺衍生物作為熒光母體合成一例以肼為識(shí)別基團(tuán)的熒光探針sz,實(shí)現(xiàn)了對(duì)a-酮戊二酸的"turn-on"型檢測(cè)。探針sz具有良好的選擇性,不會(huì)與常見(jiàn)的氨基酸發(fā)生作用。此外,探針sz對(duì)a-酮戊二酸檢測(cè)的靈敏度高,檢測(cè)限可達(dá)到0.1631μM。
【關(guān)鍵詞】：熒光探針 萘酰亞胺 溶酶體 雙光子 生物識(shí)別
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：O657.3;R446
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 1 緒論8-30
• 1.1 熒光探針簡(jiǎn)介8-14
• 1.1.1 熒光和熒光探針概述8
• 1.1.2 熒光探針的識(shí)別機(jī)理8-11
• 1.1.3 反應(yīng)型熒光探針的原理及應(yīng)用11-14
• 1.2 硫醇及其熒光探針研究進(jìn)展14-27
• 1.2.1 硫醇的生理功能及檢測(cè)意義14-15
• 1.2.2 反應(yīng)型硫醇熒光探針的研究進(jìn)展15-27
• 1.3 α-酮戊二酸及其熒光探針的研究27-29
• 1.3.1 α-酮戊二酸的生理功能及其檢測(cè)意義27
• 1.3.2 反應(yīng)型α-酮戊二酸熒光探針的研究進(jìn)展27-29
• 1.4 論文選題及設(shè)計(jì)思想29-30
• 2 基于PET機(jī)理檢測(cè)溶酶體中硫醇的熒光探針30-49
• 2.1 引言30
• 2.2 探針?lè)肿釉O(shè)計(jì)30-31
• 2.3 實(shí)驗(yàn)部分31-37
• 2.3.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑31-32
• 2.3.2 探針TC的合成步驟32
• 2.3.3 中間體及探針TC的合成方法32-34
• 2.3.4 探針?lè)肿庸庾V測(cè)試方法34-35
• 2.3.5 探針?lè)肿訜晒饬孔赢a(chǎn)率的測(cè)定方法35
• 2.3.6 最低檢測(cè)限的計(jì)算方法35
• 2.3.7 高斯模擬和理論計(jì)算35
• 2.3.8 生物成像35-37
• 2.4 結(jié)果與討論37-48
• 2.4.1 探針TC的吸收和發(fā)射光譜37-38
• 2.4.2 探針TC對(duì)硫醇的濃度滴定38-39
• 2.4.3 探針TC對(duì)硫醇的時(shí)間響應(yīng)39
• 2.4.4 探針TC對(duì)常見(jiàn)氨基酸的選擇性和競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn)39-40
• 2.4.5 探針TC與硫醇反應(yīng)前后pH滴定實(shí)驗(yàn)40-41
• 2.4.6 探針TC的細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)41-43
• 2.4.7 探針TC的亞細(xì)胞器定位成像實(shí)驗(yàn)43
• 2.4.8 探針TC的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)43-44
• 2.4.9 探針TC的組織深度成像實(shí)驗(yàn)44-45
• 2.4.10 探針TC的組織成像實(shí)驗(yàn)45-46
• 2.4.11 探針TC對(duì)硫醇的檢測(cè)機(jī)理46
• 2.4.12 探針TC通過(guò)高斯模擬計(jì)算驗(yàn)證機(jī)理46-48
• 2.5 本章小結(jié)48-49
• 3 基于PET機(jī)理檢測(cè)α-酮戊二酸的熒光探針49-59
• 3.1 引言49
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分49-52
• 3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑49
• 3.2.2 探針sz的合成步驟49-50
• 3.2.3 中間體及探針sz的合成方法50-51
• 3.2.4 探針?lè)肿庸庾V測(cè)試方法51-52
• 3.2.5 探針熒光量子產(chǎn)率的測(cè)定方法52
• 3.2.6 最低檢測(cè)限的計(jì)算方法52
• 3.3 結(jié)果與討論52-58
• 3.3.1 探針sz的吸收和發(fā)射光譜52-53
• 3.3.2 探針sz的光穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)53-54
• 3.3.3 探針sz對(duì)α-KA的濃度滴定實(shí)驗(yàn)54
• 3.3.4 探針sz對(duì)α-KA的時(shí)間響應(yīng)54-55
• 3.3.5 探針sz的pH穩(wěn)定實(shí)驗(yàn)55
• 3.3.6 溫度對(duì)探針sz的影響55-56
• 3.3.7 探針sz對(duì)常見(jiàn)氨基酸選擇性實(shí)驗(yàn)56-57
• 3.3.8 探針sz對(duì)α-KA的機(jī)理檢測(cè)57-58
• 3.4 本章小結(jié)58-59
• 結(jié)論59-60
• 參考文獻(xiàn)60-66
• 附錄A 化合物結(jié)構(gòu)表征66-72
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況72-73
• 致謝73-74

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王姍姍;;小分子熒光探針在硫醇檢測(cè)中的最新研究進(jìn)展[J];科技信息;2010年23期

2 向雨秘;龍少波;朱R，

本文編號(hào)：588150