本文關鍵詞：酶的催化反應規(guī)律及不同蛋白質之間相互作用本質研究

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【摘要】：酶是專一、有催化活性的一類特殊蛋白質,細胞是多蛋白體系,關于蛋白質之間相互作用的研究大都以靜態(tài)的蛋白質為研究對象,運用傳統方法進行理論研究,而酶作為生命活動的重要參與者,很少被應用到該項研究中。因此,本課題旨在通過研究不同蛋白質對酶及酶促反應的影響來分析酶促反應作用機制,進而探索蛋白質之間相互作用的本質,即維系蛋白質之間相互作用的力的研究。為了探究蛋白質對酶及酶促反應的影響,本文以α-淀粉酶(地衣芽孢桿菌)、蔗糖酶(面包酵母)為研究對象,在不同濃度的還原型谷胱甘肽(GSH)、牛血清蛋白(BSA)和兩種蛋白的混合溶液中分別加入α-淀粉酶、蔗糖酶,利用Zeta電位儀對帶電蛋白質表面電位進行測量,一段時間處理之后,分析酶系的活性、米氏常數、活化能等參數。研究結果如下:外加蛋白對不同的酶及酶促反應產生的影響結果不同,對于α-淀粉酶,加入濃度為0.6 mmol/L的GSH、BSA、混合液,酶的活性分別增加7.9%、8.7%、11.1%,米氏常數從129.7 g/L分別降至116.0、104.2、85.1 g/L,活化能從13.91 kJ/mol降至10、9.91、9.88 kJ/mol;對于蔗糖酶,酶的活性分別增加7.35%、7.74%、8.64%,米氏常數從44.51 g/L分別降低至41.76、39.76、37.86 g/L,活化能從11.9 kJ/mol降到了11.58、11.41、11.35 kJ/mol。另外,這種改變與不同帶電蛋白質的濃度呈正相關;蛋白質表面電位不同,對酶的影響也不同。影響程度表現為:GSHBSA混合溶液。實驗結果表明,帶不同表面電荷的蛋白質對α-淀粉酶、蔗糖酶的影響是不可忽視的,蛋白質的加入使酶的活性增加,酶與底物的親和力增加,反應速率加快,效率更高。本文以蛋白質及酶的Zeta電位為出發(fā)點,對蛋白質與酶之間的距離和電場力進行了計算,對帶電蛋白質影響酶的機理進行了探討,認為與酶帶同種電荷不同帶電量的蛋白質的加入與酶形成一定的距離,對酶本身產生微弱的斥力,使酶在酶促反應中更好的發(fā)揮催化活性,以此為依據,對實驗結果進行了分析,以期為提高酶活、多酶系統中各種酶的協同作用、酶和蛋白質等生物大分子之間的相互作用方面奠定理論基礎。
【關鍵詞】：α-淀粉酶 蔗糖酶 帶電蛋白 活化能 Zeta電位
【學位授予單位】：大連工業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：O643.32;O629.73
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 第一章 緒論9-18
• 1.1 酶9-12
• 1.1.1 α-淀粉酶簡介9-11
• 1.1.1.1 α-淀粉酶研究現狀10
• 1.1.1.2 α-淀粉酶的工業(yè)應用前景10-11
• 1.1.2 蔗糖酶簡介11-12
• 1.2 Zeta電位12-13
• 1.2.1 Zeta電位的概念12
• 1.2.2 Zeta電位的應用12-13
• 1.3 外界因素對酶及酶促反應的影響13-16
• 1.3.1 外場對酶的影響13-15
• 1.3.1.1 電場對酶活的影響14
• 1.3.1.2 超聲波對酶促反應的影響14-15
• 1.3.2 磁場對酶的影響15-16
• 1.3.2.1 磁場對酶活的影響15
• 1.3.2.2 磁場對酶促反應的影響15-16
• 1.4 本課題研究的主要意義、目的和內容16-18
• 1.4.1 本課題研究的主要意義和目的16
• 1.4.2 本課題研究的主要內容16-18
• 第二章 帶電蛋白質對α-淀粉酶活性及酶促反應的影響18-29
• 2.1 實驗材料18-19
• 2.1.1 實驗藥品18-19
• 2.1.2 實驗儀器19
• 2.2 實驗方法19-22
• 2.2.1 Zeta電位的測量19-20
• 2.2.2 不同濃度不同帶電荷的蛋白質處理酶液20-21
• 2.2.3 α-淀粉酶活性的測定21-22
• 2.2.4 米氏參數的測量22
• 2.2.5 活化能的計算22
• 2.3 實驗結果與分析22-27
• 2.3.1 Zeta電位的測量22-24
• 2.3.2 蛋白質對酶活性的影響24-25
• 2.3.3 α-淀粉酶米氏常數的測定結果25-26
• 2.3.4 不同Zeta電位的蛋白質對 α-淀粉酶活化能的影響26-27
• 2.4 小結27-29
• 第三章 帶電蛋白質對蔗糖酶活性及酶促反應的影響29-39
• 3.1 實驗材料29-30
• 3.1.1 實驗藥品29
• 3.1.2 實驗儀器29-30
• 3.2 實驗方法30-32
• 3.2.1 Zeta電位的測量30-31
• 3.2.2 不同濃度不同帶電荷的蛋白質處理酶液31
• 3.2.3 蔗糖酶活性的測定31-32
• 3.2.4 米氏參數的測量32
• 3.2.5 活化能的計算32
• 3.3 實驗結果與分析32-37
• 3.3.1 Zeta電位的測量32-33
• 3.3.2 蛋白質對酶活性的影響33-35
• 3.3.3 蔗糖酶米氏常數的測定結果35-36
• 3.3.4 不同Zeta電位的蛋白質對蔗糖酶活化能的影響36-37
• 3.4 小結37-39
• 第四章 蛋白質影響酶促反應機理探討39-43
• 第五章 結論與展望43-45
• 5.1 結論43-44
• 5.2 展望44-45
• 參考文獻45-49
• 致謝49

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前6條

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本文編號：563411