本文關(guān)鍵詞：基于間接競爭原理的流式微球技術(shù)快速檢測麥芽中赭曲霉毒素A

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【摘要】：建立了一種快速、靈敏檢測中藥麥芽中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)含量的間接競爭流式微球方法。麥芽樣品經(jīng)60%甲醇/PBS提取,加入20%甲醇/PBS溶液稀釋5倍后,離心取上清液制備樣品。在編碼熒光微球上偶聯(lián)牛血清白蛋白-OTA(BSA-OTA)復合物,與樣品中OTA競爭結(jié)合抗OTA特異性抗體,然后加入FITC-IgG孵育,離心洗滌后,用流式細胞儀檢測微球表面的平均熒光強度,實現(xiàn)樣品中OTA的準確定性定量測定。本方法檢測OTA的半數(shù)抑制濃度IC_(50)為1.20 ng/mL,相關(guān)系數(shù)R~2=0.9892,檢出限(IC_(10))為0.12 ng/mL,加樣回收率為93.9%~97.4%,RSD3.6%。16份實際麥芽樣品中檢測到2個陽性樣品,OTA的最高含量為3.83μg/kg,未超出歐盟的OTA限量標準,與液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)法檢測結(jié)果相一致。本方法簡單、快速、靈敏、可靠,可拓展用于其它復雜基質(zhì)中多種真菌毒素的定性與定量檢測。
【作者單位】： 成都中醫(yī)藥大學藥學院;中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)科大學藥用植物研究所;遼寧醫(yī)學院藥學院;
【關(guān)鍵詞】： 流式微球技術(shù) 間接競爭 麥芽 赭曲霉毒素A 快速檢測
【基金】：國家自然科學基金(Nos.81473346,81274072) 協(xié)和新星人才支持計劃資助~~
【分類號】：O657;R284.1
【正文快照】： 1引言赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)是由曲霉屬和青霉屬真菌產(chǎn)生的有毒次生代謝產(chǎn)物[1],具有嚴重的致癌、致畸、致突變及肝細胞毒性、免疫抑制和生殖紊亂等毒性作用[2],已被國際癌癥研究機構(gòu)[3]列為人類可能的致癌物(2B級),也被美國國家毒理學計劃[4]定為極有可能對人類產(chǎn)生

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2 吳雨潔;徐衛(wèi);繆扣榮;范磊;胡榮連;劉澎;李建勇;;流式微球技術(shù)在白血病BCR-ABL融合蛋白中的檢測意義[A];第12屆全國實驗血液學會議論文摘要[C];2009年

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1 劉新光;流式微球技術(shù)檢測血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa抗體的方法建立及臨床應用[D];山東大學;2008年

2 孟美麗;應用流式微球技術(shù)檢測慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜患者的血小板特異性抗體[D];南昌大學;2009年

3 李金霖;流式微球技術(shù)檢測特發(fā)性血小板減少性紫癜患者血小板糖蛋白自身抗體的方法建立及臨床應用[D];南方醫(yī)科大學;2010年

4 李錦霞;流式微球技術(shù)檢測血小板特異性自身抗體的方法建立及臨床應用[D];蘇州大學;2010年

5 張恒;流式微球技術(shù)檢測GPⅡb/Ⅲa自身抗體在ITP診斷中的臨床意義[D];石河子大學;2014年

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本文編號：557795