發(fā)布時間：2017-07-15 20:18

  本文關(guān)鍵詞：熒光光譜法研究頭孢匹羅、頭孢吡肟、硝基羥乙唑與溶菌酶的反應(yīng)機(jī)理

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【摘要】：近年來,隨著人類疾病發(fā)病率的增加,藥物已離不開人們的日常生活,研究藥物小分子與蛋白質(zhì)相互作用的課題已是人們關(guān)注的熱點,本文以溶菌酶為研究載體,研究硫酸頭孢匹羅,鹽酸頭孢吡肟,硝基羥乙唑與溶菌酶的相互作用,并在傳統(tǒng)熒光光譜法的基礎(chǔ)上用同步熒光光譜法和改進(jìn)光譜法來研究藥物和蛋白的相互作用機(jī)理。研究內(nèi)容共分以下五部分:第一章:介紹了蛋白和藥物的結(jié)合作用對藥物在體內(nèi)的吸收,分布,代謝等生理活性及藥物的療效和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的改變的影響,并對蛋白質(zhì)和藥物小分子相互作用的光譜方法研究進(jìn)行了綜述,共引用參考文獻(xiàn)51篇。第二章:通過熒光猝滅法和同步熒光光譜法,分別研究了不同溫度下硫酸頭孢匹羅(CPS)與溶菌酶(LYSO)之間的猝滅反應(yīng)機(jī)制。研究表明,CPS以靜態(tài)猝滅方式使LYSO的熒光強(qiáng)度降低,結(jié)合常數(shù)均為104數(shù)量級,其結(jié)合位點數(shù)約為1;并以靜電引力方式相互結(jié)合形成LYSO-CPS復(fù)合物;Hill系數(shù)nH略大于1,說明CPS和LYSO之間存在著很弱的正協(xié)同效應(yīng)。兩種方法所得的結(jié)論基本一致,表明同步熒光光譜法也可用于LYSO與藥物小分子結(jié)合機(jī)制的研究。并用圓二色光譜法檢測CPS對LYSO的猝滅反應(yīng)引起的蛋白質(zhì)分子二級結(jié)構(gòu)的變化。第三章:利用熒光猝滅法和同步熒光光譜法,研究了不同溫度下鹽酸頭孢吡肟(CPH)與溶菌酶(LYSO)之間的相互作用。結(jié)果表明,兩種方法所得CPH和LYSO之間反應(yīng)的猝滅方式、結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點數(shù)、作用力類型等基本一致,表明同步熒光光譜法在研究藥物和溶菌酶機(jī)理方面是一種有益的補(bǔ)充。第四章:在不同溫度下,利用熒光光譜法研究了pH=7.40生理條件下硝基羥乙唑(TRI)與溶菌酶(LYSO)的相互作用機(jī)理。結(jié)果表明,TRI與LYSO間通過靜態(tài)猝滅方式相互作用。并測定了TRI與LYSO反應(yīng)的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點數(shù);利用反應(yīng)過程的熱力學(xué)參數(shù)確定了TRI與LYSO反應(yīng)體系的作用力類型;由Hill系數(shù)得出了TRI與LYSO的協(xié)同性;根據(jù)非輻射能量轉(zhuǎn)移理論,確定了TRI到LYSO的結(jié)合距離,同時采用了同步光譜法考察了TRI對LYSO構(gòu)象的影響。第五章:為解決熒光猝滅法分析藥物與蛋白相互作用機(jī)理中存在的不足,在人的生理條件(pH=7.40),以藥物為檢測對象,用彈性散射(RLS)熒光法研究不同溫度下硝基羥乙唑(TRI)與溶菌酶(LYSO)相互作用機(jī)理。對比以LYSO為考察對象的熒光猝滅法,兩種方法所得TRI與LYSO作用機(jī)理一致,但RLS法所得體系結(jié)合常數(shù)比熒光猝滅法大兩個數(shù)量級,表明RLS法能夠更全面、準(zhǔn)確的表征TRI與LYSO的作用。并用UV光譜法對RLS法所得結(jié)果的合理性進(jìn)行了驗證。
【關(guān)鍵詞】：熒光光譜法 溶菌酶 硫酸頭孢匹羅 鹽酸頭孢吡肟 硝基羥乙唑
【學(xué)位授予單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R96;O657.3
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-13
• 第1章 綜述13-17
• 1.1 引言13
• 1.2 溶菌酶結(jié)構(gòu)簡介13
• 1.3 藥物和蛋白質(zhì)相互作用的研究方法13-16
• 1.3.1 熒光光譜法14
• 1.3.2 紫外-可見吸收(UV)光譜法14-15
• 1.3.3 圓二色(CD)光譜法15
• 1.3.4 共振光散射(RLS) 法15-16
• 1.4 本文的立題思路及研究內(nèi)容16
• 1.5 展望16-17
• 第2章 熒光猝滅法、同步熒光法用于硫酸頭孢匹羅與溶菌酶反應(yīng)機(jī)理比較研究17-26
• 2.1 引言17
• 2.2 實驗部分17-18
• 2.2.1 儀器與試劑17-18
• 2.2.2 實驗步驟18
• 2.3 結(jié)果與討論18-25
• 2.3.1 LYSO-CPS體系的UV光譜18-19
• 2.3.2 LYSO-CPS體系的熒光猝滅光譜19-21
• 2.3.3 LYSO的氨基酸殘基參與情況確定21
• 2.3.4 LYSO-CPS體系的同步熒光光譜21-23
• 2.3.5 LYSO-CPS體系的作用力類型23-24
• 2.3.6 藥物協(xié)同性24-25
• 2.3.7 LYSO-CPS體系的CD光譜25
• 2.4 結(jié)論25-26
• 第3章 鹽酸頭孢吡肟與溶菌酶反應(yīng)機(jī)理熒光猝滅法、同步熒光法比較研究26-32
• 3.1 引言26
• 3.2 實驗部分26-27
• 3.2.1 儀器與試劑26-27
• 3.2.2 實驗步驟27
• 3.3 結(jié)果與討論27-31
• 3.3.1 LYSO-CPH體系的UV光譜27-28
• 3.3.2 LYSO-CPH體系的熒光猝滅光譜28-29
• 3.3.3 LYSO-CPH體系的同步熒光光譜29-30
• 3.3.4 CPH與LYSO間的作用力類型30-31
• 3.4 結(jié)論31-32
• 第4章 硝基羥乙唑與溶菌酶反應(yīng)機(jī)制的光譜研究32-38
• 4.1 引言32
• 4.2 實驗部分32-33
• 4.2.1 儀器與試劑32
• 4.2.2 實驗步驟32-33
• 4.3 結(jié)果與討論33-37
• 4.3.1 LYSO-TRI體系的熒光猝滅光譜33-34
• 4.3.2 LYSO-TRI體系作用力類型34-35
• 4.3.3 藥物協(xié)同性35
• 4.3.4 LYSO-TRI體系的結(jié)合距離35-36
• 4.3.5 LYSO-TRI體系的同步熒光光譜36-37
• 4.4 結(jié)論37-38
• 第5章 改進(jìn)光譜法研究硝基羥乙唑和溶菌酶的相互作用機(jī)理38-44
• 5.1 引言38
• 5.2 實驗部分38-39
• 5.2.1 儀器與試劑38
• 5.2.2 實驗步驟38-39
• 5.3 結(jié)果與討論39-43
• 5.3.1 LYSO-TRI體系的熒光猝滅光譜39-40
• 5.3.2 LYSO-TRI體系的RLS法40-41
• 5.3.3 LYSO-TRI 體系的 UV 光譜41-42
• 5.3.4 LYSO-TRI體系作用力的研究42
• 5.3.5 藥物協(xié)同性42-43
• 5.4 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-53
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文53-54
• 致謝54

【相似文獻(xiàn)】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 韓榮;熒光光譜法研究頭孢匹羅、頭孢吡肟、硝基羥乙唑與溶菌酶的反應(yīng)機(jī)理[D];河北大學(xué);2016年

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本文編號：545589