食源性致病菌嚴(yán)重威脅人類身體健康,長(zhǎng)期以來備受關(guān)注。檢測(cè)食源性致病菌的方法包括培養(yǎng)計(jì)數(shù)法、免疫學(xué)方法、分子生物學(xué)方法和生物傳感方法等。抗菌肽(antimicrobial peptide,AMP)是一種新型生物識(shí)別元件,已應(yīng)用于檢測(cè)食源性致病菌的生物傳感器中。本文利用AMP在細(xì)菌表面豐富識(shí)別位點(diǎn)的優(yōu)勢(shì),實(shí)現(xiàn)AMP的識(shí)別和信號(hào)放大的雙功能,構(gòu)建一系列快速、靈敏檢測(cè)大腸桿菌0157:H7的比色傳感方法。主要內(nèi)容如下:1、免疫磁分離技術(shù)在分離大腸桿菌O157:H7中的應(yīng)用免疫磁分離技術(shù)能從食品樣本中特異性的分離富集食源性致病菌。本章對(duì)大腸桿菌0157:H7的捕獲率高達(dá)90%。同時(shí),本文利用磁分離-洗脫法,將磁珠表面捕獲到的細(xì)菌洗脫,回收率為85%。該方法有望降低磁珠的非特異性吸附,降低背景信號(hào),為后續(xù)檢測(cè)方法開發(fā)奠定良好的基礎(chǔ)。2、基于生物素-抗菌肽和生物素-辣根過氧化物酶競(jìng)爭(zhēng)作用檢測(cè)大腸桿菌0157:H7本章通過偶聯(lián)生物素的AMP(bio-AMP)和偶聯(lián)生物素的辣根過氧化物酶(bio-HRP)在鏈霉親和素磁珠(MNB-SA)表面的競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)實(shí)現(xiàn)大腸桿菌0157:H7的比色法檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)過程中,b...

【文章頁數(shù)】：133 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１．１?２００６－２０１５十年中國(guó)食源性疾病暴發(fā)情況Ｗ??Ｆｉｇ．?１．１?Ｆｏｏｄｂｏｍｅ?ｐｏｉｓｉｏｎｉｎｇ?ｉｎ?Ｃｈｉｎａ?ｆｒｏｍ?２００６－２０１５．??

展中國(guó)家和地區(qū)為甚，非洲每年有９１００萬人感染食源性疾病，其中１３．７萬人死??亡Ｗ。在中國(guó)，食源性疾病的暴發(fā)事件也極為普遍，平均每年感染數(shù)１０萬例，涉??及人數(shù)１０００多萬，其中，由食源性致病菌引起的占一半以上（圖１．１）?［３］。因?yàn)??監(jiān)測(cè)系統(tǒng)尚在完善中，所以實(shí)際生活中發(fā)生....

圖１．２掃描電鏡下大腸桿菌照片??Ｆｉｇ．?１．２?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?Ｅ．?ｃｏｌｉ?ｂａｃｔｅｒｉａ．??

大腸桿菌〇１５７：Ｈ７造成多起食源性疾病的暴發(fā)，被列為最重要的食源性??致病菌之一。大腸桿菌０１５７：Ｈ７的形態(tài)及各方面理化性質(zhì)簡(jiǎn)單介紹如下：??形態(tài)：桿狀，尺寸在１－３?ｐｍ，無芽孢，周身鞭毛（如圖１．２）。??生化特性：除２４小時(shí)之內(nèi)不發(fā)酵山梨醇之外，其他常見的生化特性均與其....

圖１．４常見ＥＬＩＳＡ原理圖??

－細(xì)菌－抗體”三明治結(jié)構(gòu)檢測(cè)大腸桿菌０１５７：Ｈ７，經(jīng)過一夜的增菌，能在碎牛肉和??乳制品中檢測(cè)到０．２－０．９ｃｆｌｉ／ｇ。食品工業(yè)中常用的質(zhì)量控制方法是酶聯(lián)免疫吸附??法，基本原理如圖１．４所示，相比于傳統(tǒng)的培養(yǎng)和菌落計(jì)數(shù)法，ＥＬＩＳＡ具有特異??性好，快速方便，省時(shí)省力等優(yōu)....

圖１．６比色法檢測(cè)食源性致病菌的原理圖引用獲愛思唯爾版權(quán)許可??

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文?第一章緒論??實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌的比色檢測(cè)（原理如圖１．６）。??Ｎｏｆｏｏｄｂｏｍｅ?Ｘ?ＮａＣ＊?＾??＾?ｂａｃｔｅｒｉａ?ｇｅｎｏｍｅ?＇?＾?＼?＿?＊ＴＴ＾ｐｐ?＇??／１Ｎ?八?＃?康??．賽：??］＞ｔｉｍ??．．?－＾＾７?Ｆｏｏｄｂｏｒｎｃ?Ｂａ....

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