從珊瑚菌子實體中分離純化得到多糖組分RFPF2A,并研究其化學(xué)結(jié)構(gòu)特征和抗氧化活性。采用DEAE sepharose fast flow離子柱、Sephacryl G-25和S-400 High-resolution凝膠柱層析進行分離純化,經(jīng)紅外光譜、高效液相色譜、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用和核磁共振等譜圖分析確定多糖的結(jié)構(gòu)組成,并測定RFPF2A的羥基自由基清除能力、超氧陰離子清除能力、亞鐵離子金屬螯合能力和總還原力。結(jié)果表明:RFPF2A分子質(zhì)量為9.87×10²kDa,由β-(1,6)-D-吡喃葡萄糖、α-(1,2,6)-D-吡喃半乳糖和β-(1,4)-D-吡喃甘露糖組合而成,摩爾比為n(葡萄糖)∶n(半乳糖)∶n(甘露糖)=1∶0.15∶0.26。當(dāng)多糖質(zhì)量濃度為5 mg/mL時,羥基自由基的清除能力達60%,超氧陰離子清除能力達74.47%,亞鐵離子金屬螯合能力達61.82%,還原力吸光值達1.506。因此,RFPF2A多糖具有顯著的抗氧化活性,并表現(xiàn)出一定的質(zhì)量濃度依賴性。

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【部分圖文】：

圖1RFPF2A的HPLC曲線

RFPF2A的高效液相色譜圖如圖1所示,RFPF2A的洗脫譜圖呈對稱峰,由此判斷其為均一組分的多糖。通過峰面積計算表明多糖的純度達到90%以上,RFPF2A保留時間為6.582min,根據(jù)保留時間計算得到分子量為9.87×102kDa。2.1.2RFPF2A單糖組成分析

圖2混合標(biāo)準(zhǔn)品乙�；苌锏臍赓|(zhì)色譜圖

7種單糖混標(biāo)的GC-MS譜圖如圖2所示,由表1和圖2確定混標(biāo)中各單糖的出峰順序依次為L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、L-巖藻糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖。表1中的RSD1為6次重復(fù)試驗的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差值,RSD2為6次平行試驗的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差值,兩個相對標(biāo)準(zhǔn)偏差R....

圖3RFPF2A的乙酰化衍生物的氣質(zhì)譜圖

RFPF2A的氣質(zhì)譜圖如圖3所示,通過與混標(biāo)譜圖及各個峰保留時間處的質(zhì)譜圖對比可知:RFPF2A主要含有D-葡萄糖,另外還含有少量的D-半乳糖、D-甘露糖,其摩爾比為1.00∶0.15∶0.26。董芳等[11]通過熱水浸提、樹脂脫色、分級醇沉和脫蛋白后得到均一多糖組分RBP-I,....

圖4RFPF2A的紅外光譜分析

紅外光譜能夠測定分子間的伸縮振動及不同原子之間的極性鍵,可以用來分析多糖中的單糖種類、糖苷鍵和功能團。由圖4可清晰看到:在3422cm-1處有明顯的寬廣的吸收峰,它是多糖的O—H伸縮振動峰[21-24];在2928cm-1處有吸收峰,它是C—H鍵的伸縮振動峰[25];在1....

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