近年來,熒光標(biāo)記技術(shù)在生物學(xué)、醫(yī)療科學(xué)以及醫(yī)藥領(lǐng)域之中獲得了廣泛的應(yīng)用。熒光探針作為一種理想的檢測(cè)工具,具有靈敏度高、可操作性強(qiáng)、成本低廉、選擇性好、快速準(zhǔn)確、原位測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。在生物大分子檢測(cè)、離子檢測(cè)、細(xì)胞學(xué)應(yīng)用、免疫學(xué)應(yīng)用等方面也得到了廣泛關(guān)注,并越來越多地受到研究者的重視。然而目前大部分有機(jī)熒光探針存在熒光聚集誘導(dǎo)猝滅(ACQ)效應(yīng),并且水溶性差、細(xì)胞滲透性差、毒性強(qiáng),不能應(yīng)用于生物細(xì)胞成像及活體組織成像中。因此開發(fā)具有良好生物相容性和具有聚集誘導(dǎo)發(fā)光(AIE)性質(zhì)的三苯胺類探針具有非常重要的意義。三苯胺熒光核的結(jié)構(gòu)類似螺旋槳。在三苯胺結(jié)構(gòu)單元中,由于與氮原子相接的苯環(huán)具有較高的活性、結(jié)構(gòu)多樣性和易裁剪修飾的特性,可以通過在苯環(huán)適當(dāng)?shù)奈恢眠M(jìn)行化學(xué)反應(yīng)連接不同的功能基團(tuán),從而得到具有特定功能的三苯胺類發(fā)光材料。鑒此,本論文基于三苯胺為熒光核設(shè)計(jì)了幾種高選擇性、高靈敏度的熒光探針,并應(yīng)用于檢測(cè)活性氧物種(ROS),研究其作用機(jī)理,并將它們應(yīng)用于生物細(xì)胞成像。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:1、通過Suzuki-Miyaura偶聯(lián)反應(yīng),Menshutkin反應(yīng)修飾三苯胺,得到了一系列帶有一、二...

【文章頁(yè)數(shù)】：110 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 前言
    1.2 熒光探針概述
    1.3 熒光探針的設(shè)計(jì)原理
    1.4 熒光探針在生命分析中的研究進(jìn)展
        1.4.1 檢測(cè)活性氧(ROS)物種
        1.4.2 檢測(cè)活性硫(RSS)物種
        1.4.3 檢測(cè)活性氮(RNS)物種
        1.4.4 生物成像
    1.5 本論文研究意義及內(nèi)容
    參考文獻(xiàn)
第2章 正電荷引導(dǎo)的三苯胺類熒光探針的合成及在細(xì)胞成像中的應(yīng)用
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 試劑
        2.2.2 儀器
        2.2.3 細(xì)胞毒性
        2.2.4 細(xì)胞成像測(cè)試
        2.2.5 熒光分子與Hoechst33342、Mito Tracker Red的復(fù)染色測(cè)試
        2.2.6 轉(zhuǎn)基因煙草BY-2細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.7 轉(zhuǎn)基因煙草BY-2細(xì)胞成像測(cè)試
        2.2.8 三苯胺衍生物的合成
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.3.1 TPA衍生物的合成及表征
        2.3.2 TPA衍生物的光學(xué)性質(zhì)
        2.3.3 TPA衍生物的理論計(jì)算
        2.3.4 AIE性質(zhì)研究
        2.3.5 TPA衍生物對(duì)O2
·-的檢測(cè)
        2.3.6 內(nèi)源性O(shè)2
·-檢測(cè)
        2.3.7 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)及哺乳動(dòng)物細(xì)胞染色
        2.3.8 共染色實(shí)驗(yàn)
        2.3.9 TPA衍生物對(duì)植物細(xì)胞染色
    2.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第3章 Pluronic F127 復(fù)合型熒光納米微粒的合成及應(yīng)用研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 試劑
        3.2.2 儀器
        3.2.3 細(xì)胞毒性
        3.2.4 細(xì)胞成像測(cè)試與復(fù)染色測(cè)試
        3.2.5 三苯胺衍生物TPA-Py-I^-,TPA-Py-BF4
-,TPA-Py-PF6
-,TPA-diPy-BF4
-,TPA-triPy-BF4
-的合成
        3.2.6 三苯胺衍生物熒光納米微粒的制備
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.3.1 TPA衍生物熒光納米微粒的合成與表征
        3.3.2 溫度和pH對(duì)熒光納米微粒的影響
        3.3.3 細(xì)胞毒性評(píng)價(jià)
        3.3.4 哺乳動(dòng)物細(xì)胞成像
        3.3.5 植物細(xì)胞成像
    3.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第4章 具有雙反應(yīng)位點(diǎn)的脂滴靶向熒光探針用于檢測(cè)活細(xì)胞中的CIO-

    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 試劑
        4.2.2 儀器
        4.2.3 細(xì)胞毒性
        4.2.4 細(xì)胞成像測(cè)試
        4.2.5 熒光分子與Nile Red的復(fù)染色測(cè)試
        4.2.6 斑馬魚的培養(yǎng)與熒光成像
        4.2.7 三苯胺衍生物TPAs-SCH₃,TPAs-2SCH₃,TPAs-3SCH₃,TPAs-SCH₃-CHO的合成
        4.2.8 三苯胺衍生物TPA-Br-CHO的合成
        4.2.9 三苯胺衍生物TPAs-SCH₃-2CN的合成
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        4.3.1 TPA衍生物的合成及表征
        4.3.2 細(xì)胞成像
        4.3.3 CIO^-體外檢測(cè)及機(jī)理探究
        4.3.4 內(nèi)源性CIO^-檢測(cè)
        4.3.5 斑馬魚成像
    4.4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論與展望
致謝
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果



本文編號(hào)：3871008

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