本文關(guān)鍵詞：萘酰亞胺類細胞器靶向型熒光探針的合成及應(yīng)用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：隨著生命科學研究的不斷深入,活細胞熒光成像和檢測向著更微觀結(jié)構(gòu)發(fā)展,亞細胞器靶向型熒光分子探針應(yīng)運而生,并在近些年快速發(fā)展。萘酰亞胺發(fā)色團具有高熒光量子產(chǎn)率、光穩(wěn)定性好、以及良好的雙光子性質(zhì)等優(yōu)點被廣泛的應(yīng)用于熒光分子探針的設(shè)計。但具有識別檢測功能的細胞器靶向型萘酰亞胺類探針開發(fā)較少。本文以萘酰亞胺為母體開發(fā)設(shè)計了兩種細胞器靶向性熒光探針,用于研究線粒體膜電位以及細胞膜附近一氧化氮。本文設(shè)計合成一例以萘酰亞胺為母體的熒光探針MITFPS,探針具有雙極性能夠穩(wěn)定定位于線粒體,光譜測試表明該探針具有雙光子活性,熒光強度對溶劑極性具有敏感性,熒光壽命測試證明該探針的熒光壽命隨溶劑極性的增加逐漸降低。細胞共定位實驗以及細胞固定實驗表明該化合物能夠穩(wěn)定定位于線粒體,熒光成像表明經(jīng)地塞米松刺激后,MCF-7細胞的線粒體發(fā)生顯著的形貌變化。此外,通過雙光子熒光壽命成像MITFPS可以指示病變線粒體膜電位的變化。本文首次合成了一例具有細胞膜靶向性的一氧化氮熒光探針MEM-STNO。以萘酰亞胺為母體、經(jīng)典的一氧化氮受體鄰苯二胺為識別基團,分子兩端分別連接長烷基鏈以及季銨鹽陽離子形成兩親性結(jié)構(gòu)。一氧化氮滴點實驗證明目標化合物對一氧化氮具有較高的靈敏度,響應(yīng)前后熒光增強近21倍。使用MCF-7以及神經(jīng)元細胞進行共聚焦顯微鏡成像,結(jié)果表明目標化合物能夠特異性染色到不同細胞的細胞膜上并能夠穩(wěn)定定位達60 min,外源性一氧化氮刺激細胞實驗說明探針MEM-STNO對細胞膜附近的一氧化氮具有快速響應(yīng)能力,得到熒光增強型信號。
【關(guān)鍵詞】：萘酰亞胺 熒光探針 線粒體 細胞膜 一氧化氮
【學位授予單位】：大連理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-10
• 1 文獻綜述10-30
• 1.1 熒光分子探針技術(shù)10-12
• 1.1.1 熒光的發(fā)現(xiàn)10
• 1.1.2 熒光的發(fā)光原理10-11
• 1.1.3 熒光分子探針11-12
• 1.2 熒光分子探針的識別原理12-13
• 1.2.1 光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移PET型分子探針12
• 1.2.2 分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移ICT型分子探針12
• 1.2.3 熒光共振能量轉(zhuǎn)移FRET型分子探針12
• 1.2.4 激基復(fù)合物Excimer型分子探針12-13
• 1.3 萘酰亞胺類熒光分子探針的應(yīng)用13-21
• 1.3.1 萘酰亞胺類分子特性13
• 1.3.2 萘酰亞胺類陽離子識別型探針13-18
• 1.3.3 萘酰亞胺類陰離子識別型探針18-19
• 1.3.4 萘酰亞胺類生物小分子識別型探針19-21
• 1.4 細胞器定位型熒光分子探針21-29
• 1.4.1 細胞核熒光探針21-23
• 1.4.2 細胞膜熒光探針23-25
• 1.4.3 線粒體熒光探針25-27
• 1.4.4 溶酶體熒光探針27-29
• 1.5 本文研究的內(nèi)容及意義29-30
• 2 萘酰亞胺類線粒體膜電位探針的合成及應(yīng)用30-56
• 2.1 概述30-32
• 2.2 線粒體膜電位探針MITFPS的合成路線32
• 2.3 實驗部分32-37
• 2.3.1 原料與儀器32-33
• 2.3.2 MITFPS的具體合成步驟33-36
• 2.3.3 MITFPS的光譜測試方法36-37
• 2.4 結(jié)果與討論37-55
• 2.4.1 MITFPS的光譜測試37-39
• 2.4.2 MITFPS的熒光壽命測試39-41
• 2.4.3 MITFPS的雙光子性質(zhì)測試41-42
• 2.4.4 MITFPS的細胞毒性實驗42-43
• 2.4.5 MITFPS的線粒體定位機理43-44
• 2.4.6 MITFPS的細胞成像實驗44-55
• 2.5 本章小結(jié)55-56
• 3 萘酰亞胺類細胞膜一氧化氮探針的合成及應(yīng)用56-72
• 3.1 概述56-58
• 3.2 細胞膜一氧化氮探針MEM-STNO的合成路線58-59
• 3.3 實驗部分59-64
• 3.3.1 原料與儀器59
• 3.3.2 MEM-STNO的具體合成步驟59-64
• 3.4 結(jié)果與討論64-71
• 3.2.1 MEM-STNO的光譜測試64-66
• 3.2.2 MEM-STNO的細胞成像實驗66-71
• 3.5 本章小結(jié)71-72
• 結(jié)論72-73
• 參考文獻73-80
• 附錄A 論文中化合物的核磁譜圖80-87
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表學術(shù)論文情況87-88
• 致謝88-89

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 熊慶;任全霞;郭亞可;孫麗;張華;韓博;陳文;;多壁碳納米管-神經(jīng)生長因子復(fù)合物的制備及生物活性測定[J];石河子大學學報(自然科學版);2013年05期

  本文關(guān)鍵詞：萘酰亞胺類細胞器靶向型熒光探針的合成及應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：377424