本文關(guān)鍵詞：高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)多種貝類毒素研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：近年來(lái)，隨著各國(guó)沿海水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，海洋環(huán)境問(wèn)題也日趨嚴(yán)重，赤潮頻發(fā)，沿海地區(qū)人類食用海洋貝類中毒患病事件一直呈上升態(tài)勢(shì)。貝類毒素毒性大、反應(yīng)快、且無(wú)適宜解毒劑，具有突發(fā)性和廣泛性，故水產(chǎn)品的安全問(wèn)題直接關(guān)系到消費(fèi)者的身體健康和生命安全。為此，各國(guó)政府對(duì)貝類的生物毒素污染問(wèn)題越來(lái)越重視，，許多國(guó)家相繼對(duì)貝毒的檢測(cè)方法進(jìn)行了許多研究。但目前我國(guó)對(duì)貝毒的檢測(cè)分析能力還相對(duì)較弱，一些新的檢測(cè)分析技術(shù)，如液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)等在貝毒檢測(cè)分析方面的應(yīng)用較少。然而液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)自身的技術(shù)特點(diǎn)使得其在貝毒檢測(cè)分析方面具有巨大的應(yīng)用潛力，因此，本文嘗試應(yīng)用高效液相色譜-三重串聯(lián)四級(jí)桿質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）技術(shù)建立分析檢測(cè)腹瀉性貝毒（diarrhetic shellfish poisoning, DSP）、麻痹性貝毒（paralytic shellfish poisoning,PSP）、記憶缺失性貝毒（acids shellfish poisoning, ASP）三類貝毒的方法，并利用所建立的方法對(duì)實(shí)際樣品中的貝毒殘留量進(jìn)行分析測(cè)定。 論文主要包括三個(gè)部分： 1、HPLC-MS/MS分析水產(chǎn)品中腹瀉性貝類毒素殘留 對(duì)樣品前處理及凈化條件、色譜及質(zhì)譜條件進(jìn)行了研究和優(yōu)化，建立了一種專屬、靈敏的HPLC-MS/MS法檢測(cè)水產(chǎn)品中腹瀉性貝類毒素殘留的分析方法。具體方法為：用甲醇-水（80/20, V/V）溶液作為提取溶劑，超聲提取目標(biāo)化合物，離心后的上清液使用Waters OASIS HLB固相萃取柱凈化、氮?dú)獯蹈伞⒍ㄈ�、過(guò)膜后上機(jī)測(cè)定。在優(yōu)化的色譜分離條件及質(zhì)譜分析條件下，五種腹瀉性貝毒在濃度10.0~160.0μg/L內(nèi)線性關(guān)系良好（R2＞0.998）。在添加濃度2.0~200.0μg/kg水平下，五種腹瀉性貝毒的平均回收率在60.7%~94.0%之間，變異系數(shù)在2.0%~6.0%之間，GYM、SPX1、PTX2、OA、AZA1五種腹瀉性貝毒的檢出限分別為0.2μg/kg、0.1μg/kg、1.0μg/kg、0.1μg/kg、0.2μg/kg。 2、HPLC-MS/MS分析水產(chǎn)品中麻痹性貝類毒素殘留 對(duì)樣品前處理及凈化條件、色譜及質(zhì)譜條件進(jìn)行了研究和優(yōu)化，確定了GTX23-c、GTX14-c、dcGTX23-b、C12、NEO-c和GTX5-b六種麻痹性貝毒的色譜質(zhì)譜分析條件，并分別建立了HPLC-MS/MS法檢測(cè)水產(chǎn)品中麻痹性貝類毒素dc-STX和STX-e殘留的分析方法。具體方法為：用0.1mol/L的HCl溶液作為提取溶劑，100℃水浴加熱提取目標(biāo)化合物，離心后的上清液使用WatersOASIS HLB固相萃取柱凈化、過(guò)膜后上機(jī)測(cè)定。在優(yōu)化的色譜分離條件及質(zhì)譜分析條件下，兩種麻痹性貝毒在濃度10.0~500.0μg/L內(nèi)線性關(guān)系良好（R2＞0.998）。dc-STX在添加濃度50.0~500.0μg/kg水平下，平均回收率在53.4%~62.5%之間，變異系數(shù)在2.5%~4.6%之間；STX-e在添加濃度50.0~300.0μg/kg水平下，平均回收率在59.8%~68.0%之間，變異系數(shù)在1.6%~2.4%之間。dc-STX和STX-e的檢出限分別為20.0μg/kg和30.0μg/kg。 3、HPLC-MS/MS分析水產(chǎn)品中記憶缺失性貝類毒素殘留 對(duì)樣品前處理及凈化條件、色譜及質(zhì)譜條件進(jìn)行了研究和優(yōu)化，建立了一種專屬、靈敏的HPLC-MS/MS法檢測(cè)水產(chǎn)品中記憶缺失性貝類毒素DA-f殘留的分析方法。具體方法為：用甲醇-水（50/50, V/V）溶液作為提取溶劑，超聲提取目標(biāo)化合物，離心后的上清液使用Supelclean LC-SAX固相萃取柱凈化、過(guò)膜后上機(jī)測(cè)定。在優(yōu)化的色譜分離條件及質(zhì)譜分析條件下，DA-f在濃度20.0~1000.0μg/L內(nèi)線性關(guān)系良好（R2＞0.999）。在添加濃度20.0~100.0μg/kg水平下，DA-f的平均回收率在71.3%~84.1%之間，變異系數(shù)在4.4%~4.6%之間，DA-f的檢出限為5.0μg/kg。 4、實(shí)際樣品中DSP、PSP、ASP三類貝毒殘量檢測(cè) 將本研究所建立的方法應(yīng)用于東港出入境檢驗(yàn)檢疫中心2012年度的海洋毒素檢測(cè)工作中。以建立的高靈敏度、低檢出限的方法為基礎(chǔ)依據(jù)，對(duì)此次抽檢紫石房蛤、文蛤、青蛤、雜色蛤、貽貝等樣品中DSP、PSP、ASP三類貝毒的殘留量進(jìn)行了測(cè)定。共檢測(cè)三批，均有不同程度的檢出，但含量也均遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于標(biāo)準(zhǔn)限量，樣品檢測(cè)合格率為100％。本研究為我國(guó)貝類及其產(chǎn)品中貝毒的檢測(cè)分析提供了具體的方法和技術(shù)規(guī)范，具有重要的理論研究?jī)r(jià)值和實(shí)際應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜 貝類毒素 水產(chǎn)品 定性定量分析
【學(xué)位授予單位】：遼寧大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：TS254.7;O657.7
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-15
• 引言15-34
• 0.1 貝類毒素概述15-24
• 0.1.1 腹瀉性貝毒15-19
• 0.1.2 麻痹性貝毒19-21
• 0.1.3 記憶缺失性貝毒21-22
• 0.1.4 神經(jīng)性貝毒22
• 0.1.5 西加魚(yú)毒素22-23
• 0.1.6 氨代螺旋酸貝毒23-24
• 0.2 貝類毒素檢測(cè)分析方法研究進(jìn)展24-30
• 0.2.1 生物檢測(cè)分析方法24-25
• 0.2.2 生物化學(xué)檢測(cè)分析方法25-27
• 0.2.3 化學(xué)儀器分析法27-30
• 0.3 檢測(cè)分析技術(shù)的未來(lái)發(fā)展趨勢(shì)30
• 0.4 各國(guó)對(duì)貝類毒素殘留限量的要求30-31
• 0.5 本課題的研究目的、內(nèi)容和特色31-34
• 0.5.1 本研究的目的及意義31-32
• 0.5.2 本研究的內(nèi)容及技術(shù)路線32-34
• 第1章 液質(zhì)聯(lián)用分析腹瀉性貝毒方法的研究34-51
• 1.1 引言34
• 1.2 實(shí)驗(yàn)部分34-39
• 1.2.1 儀器和試劑34-36
• 1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和流動(dòng)相的配置36-37
• 1.2.3 樣品的處理及凈化37-38
• 1.2.4 色譜和質(zhì)譜條件38
• 1.2.5 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線38
• 1.2.6 定性定量方法38-39
• 1.2.7 回收率、精密度和檢出限39
• 1.3 結(jié)果和討論39-50
• 1.3.1 提取及凈化條件的選擇39-42
• 1.3.2 色譜條件的選擇及質(zhì)譜分析42-47
• 1.3.3 方法線性47-48
• 1.3.4 回收率與精密度48-49
• 1.3.5 最低檢測(cè)限49-50
• 1.4 水產(chǎn)品中 DSPs 殘留的檢測(cè)50-51
• 第2章 液質(zhì)聯(lián)用分析麻痹性貝毒方法的研究51-67
• 2.1 引言51
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分51-57
• 2.2.1 儀器和試劑51-54
• 2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和流動(dòng)相的配置54
• 2.2.3 樣品的處理及凈化54-55
• 2.2.4 色譜和質(zhì)譜條件55-56
• 2.2.5 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線56
• 2.2.6 定性定量方法56-57
• 2.2.7 添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)求回收率和精密度實(shí)驗(yàn)57
• 2.3 結(jié)果和討論57-66
• 2.3.1 提取及凈化條件的選擇57-58
• 2.3.2 色譜條件的選擇及質(zhì)譜分析58-63
• 2.3.3 方法線性63-65
• 2.3.4 回收率與精密度65-66
• 2.3.5 最低檢測(cè)限66
• 2.4 水產(chǎn)品中 PSPs 殘留的檢測(cè)66-67
• 第3章 液質(zhì)聯(lián)用分析記憶缺失性貝毒方法的研究67-79
• 3.1 引言67
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分67-72
• 3.2.1 儀器和試劑67-69
• 3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液和流動(dòng)相的配置69
• 3.2.3 樣品的處理及凈化69-70
• 3.2.4 色譜和質(zhì)譜條件70-71
• 3.2.5 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線71
• 3.2.6 定性定量方法71
• 3.2.7 添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)求回收率和精密度實(shí)驗(yàn)71-72
• 3.3 結(jié)果和討論72-78
• 3.3.1 提取及凈化條件的選擇72-73
• 3.3.2 色譜條件的選擇及質(zhì)譜分析73-76
• 3.3.3 方法線性76-77
• 3.3.4 回收率與精密度77-78
• 3.3.5 最低檢測(cè)限78
• 3.4 水產(chǎn)品中 ASP 殘留的檢測(cè)78-79
• 第4章 總結(jié)與展望79-82
• 4.1 總結(jié)79-81
• 4.2 展望81-82
• 致謝82-83
• 參考文獻(xiàn)83-88
• 附錄88-89
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文以及參加科研情況89-90
• 一、發(fā)表論文89
• 二、參與科研情況89-90

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

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  本文關(guān)鍵詞：高效液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)多種貝類毒素研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：373177