近年來,基于新型近紅外有機(jī)小分子熒光染料及探針的生物熒光成像技術(shù)受到廣泛關(guān)注。研究表明,在常規(guī)羅丹明體系中引入橋連雜原子可對(duì)染料分子光學(xué)性質(zhì)進(jìn)行調(diào)控。相比傳統(tǒng)羅丹明,硅基羅丹明和磷基羅丹明的最大吸收和最大發(fā)射波長均紅移至近紅外區(qū),滿足了近紅外生物熒光成像要求。在本論文中,我們致力于設(shè)計(jì)新型硅基和磷基羅丹明染料的合成路線,并構(gòu)建磷基羅丹明熒光探針PR-HOCl和PR-ONOO^-,進(jìn)一步通過光譜分析手段、細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)和小動(dòng)物光學(xué)成像實(shí)驗(yàn)證實(shí),PR-HOCl可靈敏檢測(cè)生物體內(nèi)HOCl,PR-ONOO^-可原位在線、精確定位溶酶體。具體內(nèi)容包括如下:（1）硅基和磷基羅丹明熒光染料的合成目前主要采用傳統(tǒng)方法制備硅基羅丹明衍生物,該方法合成難度和成本均較高,為相應(yīng)應(yīng)用帶來了巨大困難。我們?cè)O(shè)計(jì)并優(yōu)化了硅基和磷基羅丹明衍生物的合成路線,對(duì)硅基羅丹明關(guān)鍵中間體合成條件進(jìn)行優(yōu)化,最終實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)率最大化。此外,還考察了含芐苯磷基羅丹明在不同pH環(huán)境中熒光強(qiáng)度的變化情況。（2）基于近紅外磷基羅丹明的次氯酸熒光探針構(gòu)建及深度成像次氯酸（HOCl）在許多細(xì)胞調(diào)節(jié)過程中起著重... 

【文章頁數(shù)】：104 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 新型近紅外有機(jī)小分子熒光探針的作用機(jī)理及分類
        1.2.1 熒光探針的作用機(jī)理
        1.2.2 新型近紅外有機(jī)小分子熒光探針
    1.3 硅、磷取代羅丹明近紅外有機(jī)小分子的研究進(jìn)展
        1.3.1 硅基羅丹明熒光染料的研究進(jìn)展
        1.3.2 磷基羅丹明熒光染料的研究進(jìn)展
    1.4 本文研究思路及內(nèi)容
第二章 硅基和磷基羅丹明熒光染料的合成
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.3 實(shí)驗(yàn)過程
        2.3.1 硅基和磷基羅丹明染料的合成路線
        2.3.2 硅基羅丹明中間體的合成
        2.3.3 硅基羅丹明染料的合成
        2.3.4 磷基羅丹明染料的合成
        2.3.5 光譜學(xué)性質(zhì)研究
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.4.1 硅基羅丹明關(guān)鍵中間體條件優(yōu)化
        2.4.2 光譜學(xué)性質(zhì)研究
    2.5 本章小結(jié)
第三章 基于近紅外磷基羅丹明的次氯酸熒光探針構(gòu)建及深度成像
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.3 目標(biāo)化合物的合成方法
        3.3.1 化合物2 的合成
        3.3.2 化合物3 的合成
        3.3.3 化合物4 的合成
        3.3.4 探針PR-HOCl的合成
    3.4 光譜學(xué)實(shí)驗(yàn)
        3.4.1 熒光探針PR-HOCl光譜學(xué)性質(zhì)研究
        3.4.2 pH對(duì)探針PR-HOCl的影響
        3.4.3 探針PR-HOCl選擇性研究
        3.4.4 探針動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
    3.5 生物實(shí)驗(yàn)
        3.5.1 探針細(xì)胞毒性分析
        3.5.2 內(nèi)源性次氯酸RAW264.7 細(xì)胞熒光成像實(shí)驗(yàn)
        3.5.3 外源性次氯酸RAW264.7 細(xì)胞熒光成像實(shí)驗(yàn)
        3.5.4 BALB/c裸鼠肝組織切片制備和染色
        3.5.5 內(nèi)源性HOCl活 BALB/c裸鼠熒光成像實(shí)驗(yàn)
    3.6 結(jié)果與討論
        3.6.1 探針PR-HOCl設(shè)計(jì)與合成
        3.6.2 PR-HOCl光譜性質(zhì)
        3.6.3 pH對(duì)探針的影響
        3.6.4 探針PR-HOCl選擇性實(shí)驗(yàn)研究
        3.6.5 探針PR-HOCl動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
        3.6.6 外源性和內(nèi)源HOCl RAW264.7 細(xì)胞熒光成像實(shí)驗(yàn)
        3.6.7 肝組織切片熒光成像實(shí)驗(yàn)
        3.6.8 炎癥小鼠模型中HOCl深層熒光成像實(shí)驗(yàn)
    3.7 本章小結(jié)
第四章 精確定位溶酶體的近紅外磷基羅丹明熒光探針
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    4.3 目標(biāo)化合物的合成與表征
        4.3.1 化合物2 的合成
        4.3.2 化合物3 的合成
        4.3.3 目標(biāo)化合物PR-ONOO-的合成
    4.4 光譜學(xué)實(shí)驗(yàn)
        4.4.1 熒光探針PR-ONOO-紫外吸收和熒光光譜性質(zhì)研究
        4.4.2 pH對(duì)探針PR-ONOO-及對(duì)探針響應(yīng)ONOO-的影響
        4.4.3 探針PR-ONOO-選擇性研究
        4.4.4 探針動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
    4.5 生物實(shí)驗(yàn)
        4.5.1 探針細(xì)胞毒性分析
        4.5.2 外源性O(shè)NOO-RAW264.7 細(xì)胞熒光成像實(shí)驗(yàn)
        4.5.3 內(nèi)源性O(shè)NOO-探針PR-ONOO-亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)
    4.6 結(jié)果與討論
        4.6.1 熒光探針PR-ONOO-紫外吸收和熒光光譜性質(zhì)研究
        4.6.2 pH對(duì)探針PR-ONOO-及對(duì)探針響應(yīng)ONOO-的影響
        4.6.3 探針PR-ONOO-選擇性研究實(shí)驗(yàn)
        4.6.4 探針動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
        4.6.5 探針細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        4.6.6 外源性O(shè)NOO-RAW264.7 細(xì)胞熒光成像實(shí)驗(yàn)
        4.6.7 內(nèi)源性O(shè)NOO-探針PR-ONOO-亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)
    4.7 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
在攻讀碩士期間取得的科研成果
致謝
附錄



本文編號(hào)：3728839