功能化聚苯乙烯納米球的制備及其在蛋白質(zhì)分離純化應用
發(fā)布時間:2022-12-09 17:26
蛋白質(zhì)是生物體內(nèi)最重要的生物大分子之一,由于具有極好的生物學特性,在食品、生物醫(yī)學、生物制藥等諸多領域有著廣泛的應用。蛋白質(zhì)的分離純化技術作為蛋白質(zhì)研究的前提和基礎備受關注。但傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)分離純化技術只能簡單地分離得到蛋白粗產(chǎn)品,無法滿足現(xiàn)代化工業(yè)生產(chǎn)對于高純蛋白的要求。因此,本文以苯乙烯為原料采用乳液聚合法制備聚苯乙烯(PS)納米球,通過改性分別制備了磺化聚苯乙烯(SPS)納米球、羧基化聚苯乙烯(PS-COOH)納米球、金屬螯合聚苯乙烯(PS-ANTA-M2+)納米球和金屬螯合磁性聚苯乙烯(Fe3O4@PS-ANTA-M2+)納米球,并用于蛋白質(zhì)分離純化研究。旨在開發(fā)一種低成本、高負載量、可重復利用的蛋白質(zhì)分離純化介質(zhì),實現(xiàn)操作簡單、高效快速的蛋白質(zhì)分離純化流程。主要研究工作與結(jié)果如下:(1)SPS納米球的制備及其在蛋白質(zhì)分離應用。以苯乙烯為單體采用乳液聚合法制備PS納米球,通過濃硫酸改性得SPS納米球。納米球粒徑均一且單一分散,納米球表面磺化度達到2.36±0.08 mmol/g,對蛋白質(zhì)具有高...
【文章頁數(shù)】:93 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRCT
第一章 緒論
1.1 前言
1.2 蛋白質(zhì)分離純化技術
1.2.1 根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同的分離技術
1.2.2 根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同的分離技術
1.2.3 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷不同的分離技術
1.2.4 根據(jù)親和配體特異性的分離技術
1.2.5 根據(jù)蛋白質(zhì)其他特性的分離技術
1.3 功能化聚合物的研究現(xiàn)狀
1.2.1 聚合物微球的制備
1.2.2 聚合物微球的功能化
1.4 本課題的研究目的、意義、技術路線及內(nèi)容
1.4.1 研究目的及意義
1.4.2 技術路線與研究內(nèi)容
第二章 SPS納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離應用
2.1 前言
2.2 實驗材料與設備
2.2.1 實驗材料與試劑
2.2.2 實驗儀器與設備
2.3 實驗方法
2.3.1 乳液聚合法制備SPS納米球
2.3.2 SEM分析
2.3.3 ITC分析
2.3.4 吸附時間對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.5 初始底物濃度對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.6 溶液pH對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.7 溶液溫度對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.8 金屬鹽對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.9 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附熱力學分析
2.3.10 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附動力學分析
2.3.11 考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量
2.4 結(jié)果與討論
2.4.1 SEM分析
2.4.2 ITC分析
2.4.3 吸附時間對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.4 初始底物濃度對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.5 溶液pH對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.6 溶液溫度對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.7 金屬鹽對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.8 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附熱力學分析
2.4.9 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附動力學分析
2.5 本章小結(jié)
第三章 PS-ANTA-M~(2+)納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離純化應用
3.1 前言
3.2 實驗材料與設備
3.2.1 實驗材料與試劑
3.2.2 實驗儀器與設備
3.3 實驗方法
3.3.1 乳液聚合法制備PS-COOH納米球
3.3.2 固定化ANTA和金屬離子
3.3.3 羧基含量測定
3.3.4 PS-ANTA-M~(2+)納米球表征
3.3.5 目標蛋白分離純化
3.4 結(jié)果與討論
3.4.1 丙烯酸對羧基含量的影響
3.4.2 PS-COOH納米球的分散性能分析
3.4.3 PS-ANTA-M~(2+)納米球的表征
3.4.4 ITC分析
3.4.5 PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的分離純化研究
3.5 本章小結(jié)
第四章 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離純化應用
4.1 前言
4.2 實驗材料與設備
4.2.1 實驗材料與試劑
4.2.2 實驗儀器與設備
4.3 實驗方法
4.3.1 制備油酸修飾的Fe_3O_4納米顆粒
4.3.2 制備Fe_3O_4@PS-COOH納米球
4.3.3 固定化ANTA和金屬離子
4.3.4 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球表征
4.3.5 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附性能研究
4.3.6 目標蛋白分離純化
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球的表征
4.4.2 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附性能研究
4.4.3 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的分離純化研究
4.5 本章小結(jié)
結(jié)論和展望
一、結(jié)論
二、研究創(chuàng)新點
三、展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的研究成果
致謝
附件
【參考文獻】:
期刊論文
[1]微米級SPS微球的制備及對Pb2+的快速吸附[J]. 楊小翠,龔斌,彭堯天,肖凱軍. 現(xiàn)代食品科技. 2019(04)
[2]蛋白質(zhì)層析系統(tǒng)在實驗教學中的應用[J]. 趙玉紅,李欣,崔建林,趙立青,李小菊,李登文,張金紅,周浩. 實驗技術與管理. 2016(05)
[3]非溶劑/溶劑界面誘導相分離法制備多孔磺化聚苯乙烯微球[J]. 查濤,宋林勇,周藝峰,聶王焰,陳鵬鵬. 應用化工. 2015(08)
[4]新型磁性納米材料對胰蛋白酶的固定化[J]. 孫俊,翁龍梅,劉孟,胡坤雅. 江蘇大學學報(自然科學版). 2015(03)
[5]有機溶劑沉淀法去除子宮內(nèi)膜癌血清高豐度蛋白的比較研究[J]. 陳鋒菊,張曉羲,寧麗紅. 湖南文理學院學報(自然科學版). 2013(03)
[6]微米級單分散聚苯乙烯微球的研究進展[J]. 楊飛,趙雄燕,王鑫,籍姣青,孫占英,孫璐. 塑料科技. 2013(06)
[7]超濾技術及其應用與發(fā)展[J]. 曹明,王勇. 廣州化工. 2011(19)
[8]蠶蛋白質(zhì)資源的研究現(xiàn)狀及其在食品工業(yè)中的應用[J]. 李國榮,張華峰,李建科,吳曉霞. 食品工業(yè)科技. 2012(05)
[9]大粒徑由羧基修飾的交聯(lián)聚苯乙烯微球的制備與表征[J]. 王勝廣,于潔,王琛. 功能材料與器件學報. 2011(01)
[10]魚糜漂洗水中魚蛋白的提取研究[J]. 徐律,楊金生,丁迎燕,夏松養(yǎng). 飼料工業(yè). 2010(16)
碩士論文
[1]聚苯乙烯微球的制備及其在催化降解中的應用[D]. 陳源.浙江大學 2017
[2]用離子交換層析技術提取發(fā)酵液中丙酸[D]. 崔曉蓬.河北大學 2016
[3]磁性納米材料改性及固定化脂肪酶的研究[D]. 張大準.河南大學 2011
[4]生物醫(yī)用磁性納米材料的制備及應用[D]. 劉光.蘇州大學 2011
[5]改性葡聚糖和蛋白質(zhì)作為功能高分子的研究[D]. 羅成果.鄭州大學 2006
本文編號:3715059
【文章頁數(shù)】:93 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRCT
第一章 緒論
1.1 前言
1.2 蛋白質(zhì)分離純化技術
1.2.1 根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同的分離技術
1.2.2 根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同的分離技術
1.2.3 根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷不同的分離技術
1.2.4 根據(jù)親和配體特異性的分離技術
1.2.5 根據(jù)蛋白質(zhì)其他特性的分離技術
1.3 功能化聚合物的研究現(xiàn)狀
1.2.1 聚合物微球的制備
1.2.2 聚合物微球的功能化
1.4 本課題的研究目的、意義、技術路線及內(nèi)容
1.4.1 研究目的及意義
1.4.2 技術路線與研究內(nèi)容
第二章 SPS納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離應用
2.1 前言
2.2 實驗材料與設備
2.2.1 實驗材料與試劑
2.2.2 實驗儀器與設備
2.3 實驗方法
2.3.1 乳液聚合法制備SPS納米球
2.3.2 SEM分析
2.3.3 ITC分析
2.3.4 吸附時間對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.5 初始底物濃度對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.6 溶液pH對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.7 溶液溫度對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.8 金屬鹽對蛋白質(zhì)吸附的影響分析
2.3.9 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附熱力學分析
2.3.10 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附動力學分析
2.3.11 考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量
2.4 結(jié)果與討論
2.4.1 SEM分析
2.4.2 ITC分析
2.4.3 吸附時間對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.4 初始底物濃度對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.5 溶液pH對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.6 溶液溫度對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.7 金屬鹽對蛋白質(zhì)吸附的影響
2.4.8 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附熱力學分析
2.4.9 SPS納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附動力學分析
2.5 本章小結(jié)
第三章 PS-ANTA-M~(2+)納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離純化應用
3.1 前言
3.2 實驗材料與設備
3.2.1 實驗材料與試劑
3.2.2 實驗儀器與設備
3.3 實驗方法
3.3.1 乳液聚合法制備PS-COOH納米球
3.3.2 固定化ANTA和金屬離子
3.3.3 羧基含量測定
3.3.4 PS-ANTA-M~(2+)納米球表征
3.3.5 目標蛋白分離純化
3.4 結(jié)果與討論
3.4.1 丙烯酸對羧基含量的影響
3.4.2 PS-COOH納米球的分散性能分析
3.4.3 PS-ANTA-M~(2+)納米球的表征
3.4.4 ITC分析
3.4.5 PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的分離純化研究
3.5 本章小結(jié)
第四章 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球的制備表征及其在蛋白質(zhì)分離純化應用
4.1 前言
4.2 實驗材料與設備
4.2.1 實驗材料與試劑
4.2.2 實驗儀器與設備
4.3 實驗方法
4.3.1 制備油酸修飾的Fe_3O_4納米顆粒
4.3.2 制備Fe_3O_4@PS-COOH納米球
4.3.3 固定化ANTA和金屬離子
4.3.4 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球表征
4.3.5 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附性能研究
4.3.6 目標蛋白分離純化
4.4 結(jié)果與討論
4.4.1 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球的表征
4.4.2 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的吸附性能研究
4.4.3 Fe_3O_4@PS-ANTA-M~(2+)納米球?qū)Φ鞍踪|(zhì)的分離純化研究
4.5 本章小結(jié)
結(jié)論和展望
一、結(jié)論
二、研究創(chuàng)新點
三、展望
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的研究成果
致謝
附件
【參考文獻】:
期刊論文
[1]微米級SPS微球的制備及對Pb2+的快速吸附[J]. 楊小翠,龔斌,彭堯天,肖凱軍. 現(xiàn)代食品科技. 2019(04)
[2]蛋白質(zhì)層析系統(tǒng)在實驗教學中的應用[J]. 趙玉紅,李欣,崔建林,趙立青,李小菊,李登文,張金紅,周浩. 實驗技術與管理. 2016(05)
[3]非溶劑/溶劑界面誘導相分離法制備多孔磺化聚苯乙烯微球[J]. 查濤,宋林勇,周藝峰,聶王焰,陳鵬鵬. 應用化工. 2015(08)
[4]新型磁性納米材料對胰蛋白酶的固定化[J]. 孫俊,翁龍梅,劉孟,胡坤雅. 江蘇大學學報(自然科學版). 2015(03)
[5]有機溶劑沉淀法去除子宮內(nèi)膜癌血清高豐度蛋白的比較研究[J]. 陳鋒菊,張曉羲,寧麗紅. 湖南文理學院學報(自然科學版). 2013(03)
[6]微米級單分散聚苯乙烯微球的研究進展[J]. 楊飛,趙雄燕,王鑫,籍姣青,孫占英,孫璐. 塑料科技. 2013(06)
[7]超濾技術及其應用與發(fā)展[J]. 曹明,王勇. 廣州化工. 2011(19)
[8]蠶蛋白質(zhì)資源的研究現(xiàn)狀及其在食品工業(yè)中的應用[J]. 李國榮,張華峰,李建科,吳曉霞. 食品工業(yè)科技. 2012(05)
[9]大粒徑由羧基修飾的交聯(lián)聚苯乙烯微球的制備與表征[J]. 王勝廣,于潔,王琛. 功能材料與器件學報. 2011(01)
[10]魚糜漂洗水中魚蛋白的提取研究[J]. 徐律,楊金生,丁迎燕,夏松養(yǎng). 飼料工業(yè). 2010(16)
碩士論文
[1]聚苯乙烯微球的制備及其在催化降解中的應用[D]. 陳源.浙江大學 2017
[2]用離子交換層析技術提取發(fā)酵液中丙酸[D]. 崔曉蓬.河北大學 2016
[3]磁性納米材料改性及固定化脂肪酶的研究[D]. 張大準.河南大學 2011
[4]生物醫(yī)用磁性納米材料的制備及應用[D]. 劉光.蘇州大學 2011
[5]改性葡聚糖和蛋白質(zhì)作為功能高分子的研究[D]. 羅成果.鄭州大學 2006
本文編號:3715059
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